Еритроцитни пирават киназа - Синево
Генерални информации
Пируват киназа (PK) е гликолитички ензим кој ја катализира претворањето на фосфоенолот во пируват (PEP) во пируват, една од двете реакции што резултираат во производство на ATP 1 .
Недостаток на PK е втор по фреквенција по недостаток на G-6-P DH, кој се наоѓа главно во Европа, САД и Јапонија; се наследува рецесивно автосомно рецесивно 1 и има ефект на намалување на метаболизмот на глукозата, намалена концентрација на АТП во еритроцити и појава на хронична хемолитичка анемија, не-сфероцитна, со променлива сериозност 5 .
Намалената синтеза на АТП влијае на клеточната мембрана, најчесто вклучува ретикулоцити и млади еритроцити 3 .
Метаболизам на еритроцити
Зрелите еритроцити се ануклеирани клетки (неспособни за поделба на клетките), немаат рибозоми (не покажува синтеза на протеини) и митохондрии (неспособни за оксидативна фосфорилација).
Theивотниот век на циркулирачките еритроцити е 100 - 120 дена, а нивната основна функција е транспорт на кислород до ткивата 1 .
Гликозата, главната метаболна подлога на црвените крвни клетки, се метаболизира на два важни начина: 90% од гликолитичката патека (производител на енергија), а остатокот (5-10%) од патот на хексоза-монофосфат.
(HMP) со заштитна улога од оксидативен стрес. Под одредени услови кои го зголемуваат оксидативниот стрес, и фракцијата на глукоза што влегува во HMP патеката се зголемува 1 .
Пируват киназата е тетрамеричен протеин со молекуларна тежина од 230 KD. Постојат два гени (PKM2 и PKLR) кои кодираат четири PK изоензими.
Генот PKM2 се наоѓа на хромозомот 15 (15q 22) и ги кодира изоензимите на PK-M2 и PK-M1. PK-M2 се наоѓа за време на феталниот живот во сите ткива, а потоа, како што созрева телото, PK-M2 опстојува како доминантен изоензим кај зрелите леукоцити, тромбоцитите, белите дробови, бубрезите, слезината, масното ткиво. Исто така, тој е главниот ензим кај претходниците на еритроидот. PK-M1 е изоензим присутен во мускулното и мозочното ткиво.
Генот PKLR се наоѓа на хромозомот 1 (1q 21) и ги кодира изоензимите на PZ-L и PK-R.
PK - L е доминантен ензим на црниот дроб, а PK - R е изоензим присутен кај зрелите еритроцити.
Хемолитична анемија поврзана со недостаток на PK е резултат на мутации (идентификувани се приближно 200) што се јавуваат во PKLR генот. Повеќето варијанти на PK се абнормални протеини кои се разликуваат едни од други по физичко-хемиски и кинетички својства 1 .
Ензимски карактеристики и хематолошки промени поврзани со недостаток на PK 3
- хемолитична анемија со променлива тежина (лесни, компензирани форми; умерени форми; тешки форми); хепатоспленомегалија, макроцитоза, поикилоцитоза, релативно малку ретикулоцити.
-Недостаток на хомозиготни ензими;
-Променлива резидуална ензимска активност од различни патолошки ензимски типови;
- Посебни видови: двојни хетерозиготи за две ензимски варијанти.
-Клинички тивки форми, освен новороденчиња кои можат да имаат хипербилирубинемија.
-Недостаток на хетерозиготни ензими со 50% ензимска активност.
Примерок собрани - крвта ќе дојде 3 .
Контејнер за берба - правосмукалка со EDTA K3 3 .
Количината собрана - колку што дозволува вакуумот 3 .
Потребна е обработка по бербата - целиот примерок од крв веднаш се лади во фрижидер 2; 3 .
Стабилност на тестот - целата крв е стабилна 7 дена на 2-8 ° C 2; 3 .
Метод - фотометриски (ензимски) 3 .
Референтни вредности - 5,3 - 17,3 U/g Hb 3
Фактори на конверзија: U/gHb x 0,34 = U/ml еритроцити 2 .
Интерпретација на резултатите и клинички импликации
● вроден недостаток на PK - не-сфероцитна хемолитична анемија, продолжена неонатална жолтица;
Стекнат недостаток на PK - кај миелодиспластични синдроми, акутни леукемии и други анемии 2; 5 .
Во случај на вроден недостаток на PK, интраваскуларната хемолиза може да се влоши за време на бременоста или по третманот со орални контрацептиви 2 .
1. Бертил Глејдер. Наследна хемолитична анемија поради нарушувања на ензимите во црвените крвни клетки. Во клиничката хематологија на Wintrobe. Филаделфија, ед. 2009, 933-949.
2. Франсис Фишбах. Преглед на основни тестови за хематологија и коагулација на крв. Во прирачник за лабораториски и дијагностички тестови. ед.8, 2009 година, 115-116.
3. Kohne E. Еритроцитни ензими. Во Lothar Thomas Clinical Laboratory Diagnostics, 1998, 494-496.
4. Лабораторија во Синево. Специфични препораки на користената технологија за работа. 2010 година. Реп. Тип: Каталог.
5. Марк Ј. Еритроцитни ензимопатии. Во Трактат за интерна медицина-хематологија - дел I, Букурешт, ед. 1997, 819-821.