Медицинско училиште во Хановер - PDF бесплатно преземање
1 Медицинско училиште во Хановер Од Детската клиника на Медицинскиот факултет во Хановер во соработка со Институтот за клиничка фармакологија проф. медицински Томас Лике Метаболички пат на Л-аргинин/азотен оксид кај недоносени деца Дисертација за добивање на докторат по медицина на Медицинскиот факултет во Хановер презентирана од Ана Бак, родена во Тшеjабинск (Русија) Хановер 2012
2 Прифатено од Сенатот на медицинското училиште во Хановер на Печатено со одобрение од претседателот на медицинското училиште во Хановер: проф. Д-р. медицински Дитер Битер-Суерман Супервизор на тезата: Проф. медицински Томас Лике Говорник: Проф. Др. медицински Дороти Виман Ко-судија: проф. медицински Јан Киелштајн Ден на усно испитување: Членови на Испитен одбор: Проф. медицински Константин фон Кајзенберг ПД Др. Вивиен Шахт-Сталбок ПД Др. Хосеин Тезвал
3 Список на кратенки A. Arteria ADMA Асиметричен диметиларгинин ANS Синдром на респираторен дистрес билатерално BE база вишок BGA анализа на крвни гасови BH 4 тетрахидробиопертин CAD судир активирана дисоцијација CAT катјонски транспортер на аминокиселини CD3OD деутериран метанол CF6 фактор на спојување 6 cgmp цикличен гуанусан притисок монофосфат Очила за компримиран воздух со диметиламинохидролаза DLB DMA Диметиламин ЕДТА етилендиамин тетраацетат ЕЛИСА-имуносорбентна врска со ензим enos ендотелијална конститутивна НЕ синтетаза еутр. еутрофична FAD флавин аденозин динуклеотид FG недоносените FMN флавин мононуклеотид FN предвремено храна за бебиња FSGS фокална сегментална гломерулосклероза GC-MS гасна хроматографија-масена спектрометрија GC-MS/MS гасна хроматографија-тандем масена спектрометрија GOP глутамат-hruvaminase-транс-глутамат-oxalo-aminase-транс-глутамат-hruvaminase-транс-pyamate-oxalaminase-транс-pyamate-трансаминаза-трансаминаза-трансаминаза-транс-pyamate
4 Hk хематокрит HPLC хипнотр на течна хроматографија со високи перформанси. хипотрофи инос индуцирана НЕ синтетаза IVH интравентрикуларна хеморагија KG големина на тело KH јаглени хидрати KHK корорнарна срцева болест LDL липопротеин со ниска густина LPS липополисахарид M. макносно заболување изразено во макрофаги НЕ синтетаза MAD среден артериски притисок MCH средна количина на коронарни клетки MCCH средна корорнарна количина Мајчино млеко NADPH никотинамид аденин динуклеотид фосфат nb не е утврдено NEC некротизирачки ентероколитис NICI негативно-јонска хемиска јонизација NMMA N-монометил-L-аргинин NO азотен оксид NO2 нитрит NO3 нитрат NOS NO синтетаза nnos невронски конститутивен NO синтетаза pavk периферна артериска оклузивна болест pco2 парцијален притисок на крајно исфрлање јаглерод диоксид притисок EPA перзистентен Притисок PFAA пентафлуоропропионски анхидрид PFO постојан отвор на јајце-клетка po2 парцијален притисок на кислород
5 PPHN PRMT RAAS RDW респект. RSD SDMA SIOD SpO2 SSW TNF-! UPLC VEGF VSD перзистентна белодробна хипертензија протеин-аргинин-метилтрансферазени ренин-ангиотензин-алдостерон систем дистрибуција на црвени крвни клетки ширина на дишење Релативна стандардна девијација симетричен диметиларгинин Шимке имуноозен дисплазија заситеност со кислород недела на бременост фактор на некроза на тумор-! Течна хроматографија на ултра перформанси Васкуларен ендотелијален фактор на раст Дефект на вентрикуларниот септал
6 Содржина 1. Вовед Значење и синтеза на азотен оксид ADMA - ендоген инхибитор на НО синтеза Синтеза на ADMA Деградација на ADMA патофизиолошко значење на ДДАХ L-аргинин/НО метаболички пат во детството Пациенти и методологија Студија за колектив Критериуми за исклучување Процедура на студии Информации и законска регулатива Добивање примероци и собирање податоци за пациентот Аналитички методи Мерење на АДМА во плазмата и урината Мерење на Л-аргинин во плазмата Мерење на нитрат и нитрит во плазма Мерење на нитрат и нитрит во урина Мерење на диметиламин во урина Мерење на креатинин во урина Резултати од статистиката Параметар на вкупната колективна АДМА во плазмата кај предвремено родени бебиња АДМА во урината кај недоносени Л-аргинин во плазма кај предвремено родени бебиња Нитрит во плазма кај недоносени Нитрит во плазма кај недоносени Нитрит во урина кај недоносени деца Нитрат во урина кај предвремено родени бебиња и
7 3.1.8 DMA во урина кај недоносени DMA/ADMA сооднос во урина кај недоносени L-аргинин/ADMA сооднос во плазма кај недоносени Параметри на возраст од SSW и SSW во споредба со ADMA во плазма кај недоносени ADMA во урина кај недоносени L- Аргинин во плазма кај недоносени новороденчиња Нитрит во плазма кај недоносени деца Нитрит во плазма кај недоносени новороденчиња Нитрит во урина кај недоносени новороденчиња Нитрат во урина кај недоносени новороденчиња ДМА во урина кај недоносени новороденчиња ДМА/АДМА однос кај недоносени Л-аргинин/АДМА кај недоносени Род АДМА во плазма кај недоносени новороденчиња АДМА во урина кај недоносени новороденчиња Л-аргинин во плазма кај недоносени деца Нитрит во плазма кај недоносени Нитрит во плазма кај недоносени деца Нитрит во урина кај недоносени Нитрит во урина кај недоносени ДМА во урина кај недоносени ДМА/АД кај предвремено родени бебиња сооднос Л-аргинин/АДМА кај недоносени новороденчиња Други корелации Корелација помеѓу Л-аргинин и АДМА во плазмата (вкупно колективно) Корелат јон помеѓу АДМА во плазмата или урината, како и нитрит и нитрат во плазмата или урината Дискусија за студискиот колектив и времето на прифаќање на примероците метаболички пат L-аргинин/НО: одредување на нормалните вредности ii
8 за предвремено родени бебиња Индиректна активност на ДДАХ кај предвремено родени бебиња Резиме литература Додаток Информации за пациентот Декларација за согласност Документација на пациентот Измерени вредности Преглед на измерените вредности на метаболичкиот пат на Л-аргинин/НО кај предвремено родени бебиња Статистички преглед на измерените параметри на метаболичкиот пат на Л-аргинин/НО кај предвремено родени бебиња Други податоци за пациентот Лек во моментот на прифаќање Исхрана на предвремено родени бебиња во моментот на прифаќање Пореметувања на постнаталната адаптација/болести на предвремено родени бебиња во моментот на прием
11 Вовед [Ирманиши и сор. 2004 година] Покрај тоа, иносот е пронајден и во епителните клетки, мазните мускулни клетки, кардиомиоцитите, хепатоцитите, микроваскуларните ендотелијални клетки и мезангијалните клетки [Мејер и сор. 1999 година; Дара и сор. 2010 година] И покрај нивното различно потекло, сите изоформи имаат заедничко што тие ја претвораат аминокиселината Л-аргинин во Л-цитрулин и НО во реакција на оксидација во две фази. НЕ биосинтезата е инхибирана од ендогениот NOS инхибитор асиметричен диметиларгинин (ADMA) [Игнаро 1990; Монкада и сор. 1991 година; Валанс и сор. 1992]. 3
15 Вовед Сл. 3: Болести поврзани со покачени концентрации на АДМА во плазмата кај возрасни 7
16 Вовед 1.3 Синтеза на АДМА Во синтезата на диметиларгинин, една или повеќе метил групи се пренесуваат од донаторот на метил групата С-аденосилметионин, метаболички производ на хомоцистеин, на остатоци од Л-аргинин базирани на протеини [Garlick et al. 1976 година; Паик и др. 1968 година] При оваа реакција, протеинските аргинин метилтрансферази (PRMT) се одговорни за метилацијата на аминокиселината аргинин (слика 4). Соодветно на тоа, во зависност од бројот на пренесени метил групи, монометиларгининот и АДМА се претвораат во протеин метилаза I, или монометилагин и симетричен диметиларгинин (SDMA) од протеин метилаза II. Вкупно 90% од реакцијата на метилација на аминокиселината L-аргинин се јавува преку PRMT Јас [Танг и сор. 2000 година] Сл. 4: Синтеза, ефект, метаболизам и елиминација на АДМА [изменета од Киелштајн и сор. 2002] 8
22 Пациенти и методи 2. Пациенти и методи 2.1 Колективен студија Следната студија е потенцијална клиничка студија која беше иницирана и спроведена во детската клиника на Медицинскиот универзитет во Хановер во соработка со Институтот за клиничка фармакологија. Вкупно 108 предвремено родени бебиња на гестациска возраст од 23 до 36 недела од бременоста беа регрутирани во неонаталното одделение на медицинското училиште во Хановер. Сл. 5 ја покажува распределбата до соодветниот SSW (гестациска возраст). Покрај тоа, децата беа поделени во две групи според гестациската возраст: 32 FG со гестациска возраст на SSW и 76 FG со гестациска возраст на SSW. Родовата распределба се состоеше од 52 предвремено родени бебиња од машки и 56 жени (таб. 1). Времето во кое се земени крв и урина беше утврдено дека е помеѓу 7-ми и 12-ти ден од животот. Пациенти со n = 108 возраст (недела на бременост) и тоа 52 американски долари% од бременоста недела 76 табела 1: Студија за пациенти Сл. 5: Број на прерано прегледани бебиња во однос на гестациските недели (недела на бременост) 14
31 Резултати 3. Резултати Резултатите од мерењата на метаболичкиот пат на Л-аргинин/НО се наведени подолу. Статистичката евалуација е претставена во три дела. Првиот дел ги анализира параметрите за мерење за сите 108 пациенти (вкупно колективни) поврзани со гестациската возраст. За прв пат ги утврдивме нормалните вредности на АДМА во плазмата и урината кај предвремено родени бебиња на возраст помеѓу 23 и 36 недели од бременоста (3.1). Во вториот дел, резултатите се однесуваат на поделбата во две групи (предвремено родени бебиња во гестациската недела и позрели предвремено родени бебиња во гестациската недела). Поделбата на колективот на пациенти има за цел да ја илустрира можната врска помеѓу АДМА и гестациската возраст, а со тоа и степенот на зрелост на недоносените новороденчиња (3.2). Третиот дел содржи проценка на измерените биохемиски параметри во однос на полот на децата (3.3). 23
32 Резултати 3.1 Параметри поврзани со вкупната група на АДМА во плазмата кај предвремено родени бебиња Вкупната просечна вредност беше 860 nm со стандардна девијација од 174 nm. Исто така, постоеше позитивна корелација помеѓу концентрацијата на ADMA во плазмата и гестациската возраст (Сл.). Број минимална [nm] максимум [nm] просечна [nm] средна вредност [nm] стандардна девијација [nm] долната граница горната граница r = 0,298; p = 0,002 Сл: АДМА концентрација во плазмата заснована на возраста во бременоста недела 24
33 Резултати АДМА во урина кај недоносени новороденчиња Евалуацијата на концентрацијата на АДМА во урината е спроведена во однос на вредностите на креатинин во урината. Средна вредност од 12,7! Mol/mmol креатинин со стандардна девијација од 3,9! Mol/mmol креатинин е пресметана за ADMA во урината. Постоеше корелација помеѓу концентрацијата на АДМА во урината и возраста во гестациските недели (Слика). Минимален број [! Мол/ммол креатинин] Максимален [! Мол/ммол креатинин] Средна [! Мол/ммол креатинин] Средна вредност [! Мол/ммол креатинин] Стандардна девијација [! Мол/ммол креатинин] Долна граница Горна граница 73 5.3 23.1 12,7 12,7 3,9 11,7 13,6 r = 0,250; p = 0,033 Слика: АДМА концентрација во урината врз основа на возраста во бременоста недела 25
34 Резултати Л-аргинин во плазмата кај недоносени новороденчиња Концентрацијата на Л-аргинин во плазмата во просек беше 44,9 М! Со стандардна девијација 19,8 М. Во овој случај, немаше корелација помеѓу концентрацијата на аргинин во плазмата и возраста на предвремено родените бебиња во неделата на бременоста (Слика). Минимален број [! M] Максимален [! M] Средна [! M] Средна [! M] Стандардна девијација [! M] Долната граница Горна граница 106 4,1 105,1 42,6 44,9 19,8 41,1 48,7 r = -0.048; p = 0,623 Слика: Концентрација на L-аргинин во плазмата заснована на возраста во гестациските недели (SSW) 26
35 Резултати Нитрит во плазмата кај предвремено родени бебиња Средната вредност на концентрацијата на нитрит во плазмата беше 2,9! М со вредностите на нитритите и гестациската старост (Слика). Минимален број [! M] Максимален [! M] Средна [! M] Средна [! M] Стандардна девијација 2,1! М. Немаше корелација помеѓу стандардната девијација на плазмата [! М] горната граница на горната граница 106 1,0 19,9 2,9 2,9 2,1 2,5 3,3 r = 0,097; p = 0,324 Слика: Концентрација на нитрит во плазмата заснована на возраста во гестациските недели (ССВ) 27
36 Резултати Нитрат во плазмата кај недоносени новороденчиња Просечната вредност на концентрацијата на нитрати во плазмата е 46,1 м! И стандардната девијација е 19,5! М. Резултатот од овие мерења не откри никаква корелација помеѓу гестациската старост на предвремено родените деца и нитратот во плазмата (Слика). Минимален број [! M] Максимален [! M] Средна [! M] Средна [! M] Стандардна девијација [! M] Долната граница Горна граница, 5 199,1 41,1,3 46,1 19,5 42,3 49,8 r = -0.110; p = 0,262 Сл: Концентрација на нитрат во плазмата заснована на возраста во гестациските недели (28 недела од бременоста)
37 Резултати Нитрит во урината на недоносени новороденчиња Во урината просечната концентрација на нитрити беше 4,3! Mol/mmol креатинин и стандардната девијација беше 10,7! Mol/mmol креатинин. Во случај на нитрит, исто така, немаше корелација помеѓу измерените вредности и гестациската старост во недели од бременоста (Слика). Минимален број [! Мол/ммол креатинин] Максимален [! Мол/ммол креатинин] Средна [! Мол/ммол креатинин] Средна вредност [! Мол/ммол креатинин] Стандардна девијација [! Мол/ммол креатинин] Долна граница Горна граница 76 0,3 70,2 1,4 4,3 10,7 1,8 6,7 r = -0,149; p = 0,198 Слика: Концентрација на нитрит во урина врз основа на возраста во гестациските недели (недела 29)
38 Резултати Нитратот во урината на недоносени новороденчиња 283! Мол/ммол креатинин е утврден како средна вредност за концентрацијата на нитратот во урината. Стандардната девијација беше 85 mol/mmol креатинин. Не е пронајдена корелација помеѓу уринарниот нитрат и гестациската возраст (Слика). Број на минимум [! Mol/mmol креатинин] максимум [! Mol/mmol креатинин] медијана [! Mol/mmol креатинин] значи [! Mol/mmol креатинин] стандардна девијација [! Mol/mmol креатинин] долната граница горната граница горната граница r = 0,066; p = 0,573 Слика: Концентрација на нитрати во урината врз основа на возраста во гестациските недели (ССВ) 30
39 Резултати ДМА во урината кај недоносени новороденчиња Средната вредност на концентрацијата на ДМА во урината беше 255! Мол/ммол креатинин и стандардната девијација беше 40 Мол/ммол креатинин. Имаше јасна корелација помеѓу измерените вредности на ДМА и гестациските недели кај децата (Слика). Број на минимум [! Мол/ммол креатинин] максимум [! Мол/ммол креатинин] медијана [! Мол/ммол креатинин] значи [! Мол/ммол креатинин] стандардна девијација [! Мол/ммол креатинин] долната граница горната граница горната граница r = -0,320; p = 0,005 Слика: Концентрација на ДМА во урината врз основа на возраста во гестациските недели (ССВ) 31