Вирусна РНК на хепатит Ц (квантитативна) - Синево

Општи информации и препораки

Вирус на хепатит Ц (ХЦВ), член на семејството Флавивирида, се пренесува главно парентерално, со тоа што фреквенцијата на инфекција со ХЦВ е голема кај пациенти со трансплантација на органи или трансфузија на крв, лица со интравенска злоупотреба на лекови и лица на дијализа на бубрег 1; 2 .

Акутните инфекции се генерално лесни или асимптоматски, но прогресијата на хроничен хепатитис се јавува во 60-90% од случаите.

Карактеризацијата на геномот на HCV и протеините кодирани со него овозможи развој на серолошки методи за одредување на специфични антитела и молекуларни тестови за да се потврди дијагнозата и да се следи терапијата. Присуството на анти-HCV антитела е само показател за изложеност на HCV и не може да се смета за маркер за тековна инфекција 1 .

Меѓу биохемиските обележувачи на оштетување на црниот дроб, нивото на аланин аминотрансфераза (ALT) се сметаше за важен елемент во одлуката да се изврши биопсија на црниот дроб и/или да се започне антивирусна терапија. Сепак, степенот на зголемување на ALT не може да биде директно во корелација со нивото на HCV инфекција, бидејќи: кај пациенти со хроничен хепатитис Ц, серумското ниво на ALT може да варира спонтано, со можни се долги периоди на биохемиска ремисија; Нивото на ALT може да биде под влијание на други фактори како што се консумирање алкохол, придружни лекови, присуство на други вирусни инфекции, безалкохолна хепатална стеатоза; постои категорија на пациенти (се проценува на 20-40% од случаите на хронична HCV инфекција) кои имаат постојано нормално или дискретно покачено ниво на ALT, во услови на континуирана вирусна репликација .

Од друга страна, откривањето со засилување на нуклеинската киселина со употреба на верижна реакција на полимеризација (PCR) обезбедува мерка на вирусна репликација, што е корисно и за дијагностицирање на активна инфекција и за следење на третманот. Новите тестови кои го квантифицираат вирусното оптоварување со употреба на технологија „во реално време PCR“ имаат поголема аналитичка чувствителност и многу поширок (мерлив) опсег на линеарност во споредба со конвенционалната PCR технологија 1; 2 .

Во врска со дијагнозата, со користење на методот PCR, можно е да се открие HCV виремија пред имунолошка серо-конверзија 2 .

Одредување на виремија е исто така корисно при утврдување на прогресијата на болеста и проценка на ефикасноста на антивирусната терапија, како за класичниот режим на третман што вклучува комбинација на пегилиран препарат на интерферон (PegINFα) со рибавирин, така и за поновите протоколи кои содржат лекови со директно антивирусно дејство 1 .

Примерок собрани - венска крв 2 .

Контејнер за берба - вакутаин кој содржи ЕДТА како антикоагуланс 2 .

Количината собрана - сè додека вакуумот дозволува 2 .

Причини за одбивање да се обиде - употреба на хепарин како антикоагуланс 2 .

Потребна е обработка по бербата - одделете ја плазмата максимум 1 ден од бербата со центрифугирање на 800-1600 x g 20 минути на собна температура, а потоа пренесете ја во епрувета од полипропилен (мин.). 2 мл плазма) 2 .

Стабилност на примерокот - одвоената плазма може да се чува 72 часа на собна температура, 7 дена на 2-8 ° C или најмалку 6 недели замрзнати на -80 ° C. Примероците можат да бидат замрзнати/одмрзнати до пет пати без загуба на HCV 2 РНК .

Метод - PCR во реално време (TaqMan): верижна реакција на полимеризација со откривање во реално време на акумулираниот PCR производ, со мерење на емитираната флуоресценција.

Белешка: обработката на примерокот се прави автоматски 2 .

Референтни вредности - Неоткриена HCV-RNA; границата за откривање на методот во опсегот на линеарност е 15 IU/mL, вредност што се совпаѓа со аналитичката чувствителност. „Неоткриен“ резултат значи дека тоа е или многу мала виремија (под границата на квантификација) или отсутна виремија. Резултат на HCV RNA 2 .

Интерпретација на резултатите

Резултатите од виремија се изразени и нумерички (IU/mL) и во логаритамска форма (log IU/mL). Логаритамскиот израз е корисен за проценка на одговорот на третманот. Промената на виремијата од 1-лог од основната линија укажува на 10-пати зголемување или намалување. Постигнување позитивен резултат укажува на присуство на активна инфекција .

Мониторинг на виремија за класичен режим на антивирусно лекување

PegINFα во комбинација со рибавирин е индициран за третман на хроничен хепатитис тип Ц кај возрасни пациенти со HCV-позитивна РНК, како и кај пациенти со компензирана цироза на црниот дроб по вирусна инфекција Ц.

Целта на антивирусниот третман е одржлив вирусолошки одговор (СВР) дефинирана како неоткриена HCV-RNA 6 месеци по завршувањето на третманот.

Одговорот на антивирусниот третман е под влијание на бројни фактори, или вирусолошки (генотип на ХВЦ, ниво на базална виремија) или поврзани со домаќинот (раса, сериозност на заболување на црниот дроб, инсулинска резистенција). Заедно со нив, постојат и фактори на исправување, кои се појавија за време на почетната терапија, но кои може да се интервенираат при вториот обид за третман (намалување на високи дози или дури и прекинување на третманот поради хематолошки несакани ефекти или депресија; мала усогласеност) 4 .

Во зависност од тоа кога се појавил вирусен клиренс, вирусолошкиот одговор може да спаѓа во една од следниве категории:

- брза вирусолошка реакција (RVR): добивање на незабележлива HCV-RNA 4 недели по започнувањето на терапијата; пациентите се сметаат за „брзо реагирани“;

- ран вирусолошки одговор („Ран вирусолошки одговор“, ЕВР) завршен: дефинирано со неоткриена виремија 12 недели по започнувањето на терапијата; пациентите се сметаат за „стандардно реагирани“;

- бавен вирусолошки одговор („Бавен вирусолошки одговор“) или делумно ран вирусолошки одговор: дефинирано со намалување на виремијата за log2 log10 од основната линија 12 недели по почетокот на третманот и добивање на неоткривачка HCV RNA на 24-та недела; пациентите се сметаат за „бавно реагирани“ 3; 4 .

Од друга страна, постојат следниве категории поврзани со неуспех на антивирусна терапија:

- недостаток на вирусолошки одговор („неодговор“): дефинирано со намалување на виремијата за 4 .

Времетраењето на комбинираниот третман зависи од вирусниот генотип. Според стандардните програми за антивирусна терапија, пациентите заразени со HCV генотип 1 или генотип 4, без оглед на почетната виремија, треба да добијат третман 48 недели. Мултинационалните клинички испитувања покажаа дека кај пациенти заразени со генотипови 2 или 3, времетраењето на комбинираната терапија може да се намали на 24 недели без да се загрози ефикасноста (стапка на одржлив вирусолошки одговор е 84%) 5 .

Податоците од студијата INDIV-2 укажуваат на можност за воспоставување индивидуализирана терапија, водена од вирусолошки одговор, кај пациенти со генотип 1/4, како што следува:

Мониторинг на виремија за протоколи кои вклучуваат антивирусни лекови со директно дејство (терапија без интерферон)

Виремија ќе се утврди пред почетокот на терапијата, по избор по 2-4 недели, на крајот на третманот (по 8, 12, 16 или 24 недели, во зависност од терапевтскиот режим) и по 12 или 24 недели по завршувањето на третманот 7 .

Хепаринот ја инхибира PCR, затоа не треба да се користи како антикоагуланс 2 .