Атхезија на клетките - луѓе - исхрана - животна средина
Принцип на моделот на проток
Регрутирањето и активирањето на овие леукоцити е повеќестепен процес, вклучително и тркалање,
(А) Подготовка на HUVEC добиен од вени на папочната врвца; (Б) проточна комора и систем за перфузија, како и (Ц) видео документација за приврзани ќелии користејќи го моделот на проток. вклучува цврста адхезија на леукоцитите на ендотелот, трансендотелијална дијапедеза и хемотактички контролирана миграција до местото на воспаление.
Ендотелијалните и леукоцитните адхезивни молекули на семејствата на селектин и интегрин (на пр. E-, P- или L-селектин и LFA-1 (CD11a/CD18), VCAM, ICAM) се неопходни за екстравазација на неутрофилите за време на воспалителните процеси, како тие посредуваат во процесите на адхезија на клетките споменати погоре.
Како дел од ин витро моделот за испитување на адхезијата и тркалањето, ендотелијалните клетки (HUVEC клетки) прво се одгледуваат на слајдовите на микроскопот. По достигнувањето на сливот, клетките се ставаат во проточна комора и леукоцитите се пренесуваат преку ендотелните клетки со пумпа за перфузија, при што може да се пресметаат и прилагодат интраваскуларните смолкнување.
Горна лева слика.
Принцип на статички модел
Како дел од ин-витро моделот за да се испита адхезијата, ендотелијалните клетки (HUVEC клетки) прво се одгледуваат на плочки со повеќе буна, како во моделот на проток. По достигнувањето на сливот, клетките се стимулираат со соодветни активатори и се инкубираат со претходно обоени мононуклеарни клетки (Т-лимфоцити), а потоа се мери интензитетот на боењето флуориметриски, што е пропорционално на прилепените клетки.
Бојата на калцеин-АМ се користи за боење на мононуклеарните клетки. Оваа нефлуоресцентна боја продира во клеточната мембрана и се расцепува интрацелуларно од неспецифични естерази и се формира флуороген непропустлив калцеин. Калцеин, исто така познат под името Флуорексон, е дериват на флуоресцеин и има максимум на возбуда од 495 nm (возбудување) и максимум на емисија (емисија) на 515 nm и затоа може квантитативно да се снима во читачот на Fluoroscan.
Пробна проценка
Користејќи документација поддржана од видео, сериите на слики се проценуваат во рамките на моделот на проток и се снима приврзаноста на мононуклеарните ќелии по единицата за слика.
Слика горе десно.
Трошоци за модел на проток
Приближно 100 € за мулти-плоча со 4 бунари
Статичка цена на моделот
Пример за примена
Влијание на млечните олигосахариди врз адхезијата на леукоцитите на човечките ендотелијални клетки (Боде и сор. 2004а, б и Реис и сор. 2004)