Пансерин C6000, медиум без протеини за CHO-клетки во суспензија, со L-глутамин

Дома/->
Пансерин C6000, медиум без протеини за CHO-клетки во суспензија, w: Л-глутамин

Користете клетки од адхерентна култура што содржи серум (на пр. ДМЕМ висока гликоза со 10% FCS) од фазата на најавување.
Отстранете го средството што содржи серум со пипета.
Измијте го тревникот на ќелиите со PBS без Ca, Mg.
Покријте го клеточниот тревник со трипсин/ЕДТА (0,25%, 0,02%) (прибл. 2 ml на шише T25).
Отстранете го трипсинот по околу 1 мин.
Инкубација додека клетките не се заокружат и не се одделат од подлогата. (по приближно 5 мин.).
Апсорбира клетки во DMEM, запрете ја преостанатата активност на трипсин со 10% FCS.
Центрифугирајте ги ќелиите, зафатете се во PBS и повторно центрифугирајте.
Земете клетки во PBS и утврдете го бројот на клетките. Семе 5 x 104 - 1 x 105 клетки/ml во загреан Panserin C6000.
Користете шишиња за култура за култура на суспензија (на пр. Зеленчук био-еден, шифра 690 190).
Инкубација на 37 ° C и 5% гасови со CO2 во инкубаторот.

Фаза на заостанување се јавува во првите неколку дена, со ретко какво размножување на клетките. Сепак, по приближно 7 дена, клетките се навикнаа на медиум без протеини и се зголемија на 1 × 10 6 клетки/ml.

Пренесете ги клетките на свеж медиум на секои 3 до 4 дена.

Семе 3 - 5 x 104 клетки/ml.

Време на генерирање CHO во Пансерин C6000: 16,5 ч.