Протокол на цревна фиброза предизвикана од хронична салмонела (превод на германски)
Резиме
Овој протокол опишува глушец модел на цревна фиброза управувана од Салмонела, кој наликува на главните патолошки карактеристики на Кронова болест, вклучувајќи трансмурално воспаление и фиброза. Овој метод може да се искористи за да се проценат факторите на домаќинот што ги менува фибротичните исходи кај мутантни глувци што се чуваат на генетска позадина c57Bl/6.
Апстракт
Ткиво-фиброза, која се карактеризира со патолошко натрупување на екстрацелуларната матрица, како што е колаген, е резултат на постојано воспаление и дисрегулирана поправка. Во инфламаторно заболување на дебелото црево (ИБД), фиброзата доведува до повторливи формации на стегања за кои не постои друга ефективна терапија освен хируршка ресекција. Поради доцниот почеток, процесите што водат фиброза се помалку изучувани и главно непознати. Затоа, фибротичните компликации се голем предизвик кај IBD.Овој протокол опишува робустен in vivo модел на цревна фиброза во кој предтретман на стрептомицин на глувци C57Bl/6 проследен со орална гајажа со дезинфекција видете Фиброза на Cecum. Објаснети се методите за подготовка на S. Typhimurium -AroA за вакцинација, квантификација на патогени оптоварувања во цекумот и слезината и проценка на таложењето на колаген во цревните ткива. Овој експериментален модел на болест е корисен за проучување на факторите на домаќинот кои ја влошуваат или ја влошуваат цревната фиброза слична на ЦД.
Вовед
Потребна е претплата. Ве молиме, препорачајте JoАВО на вашиот библиотекар.
Протокол
Сите протоколи за животни се одобрени од Комитетот за нега на животни на Универзитетот во Британска Колумбија.
1. Подготовка на култури Салмонела Тифимуриум АроА за орална гаважа на глувци
2. Проценка на контаминација со салмонела во ткивото
3. Пикросириус Црвено боење и квантификација на колаген.
Потребна е претплата. Ве молиме, препорачајте JoАВО на вашиот библиотекар.
Резултати од репрезентацијата
Третман со стрептомицин проследен со орална инфекција со S. Typhimurium -AroA доведува до робусно воспаление на цревата и фиброза, особено во цекумот (слика 1) Типични оптоварувања на болести од 10 8 до 10 9 CFU на 1 g cecum и 10 4 CFU на 1 g слезина може да се обноват од заразени животни (Слика 2) Проценка на фиброза кај црвени дамки на пикросириус, сецитирани во врвот на цревата, ја покажуваат врвната фиброза 21 ден по инфекцијата, додека голем дел од патологијата е решен до 42-от ден (слика 3 и слика 4) Таложењето на колаген е најизразено во субмукозата на цревата, додека фиброзата е полесна во мукозната мембрана.
Сегментот 1, што претставува врв на Цекал, може да се користи за анализа на генската експресија, додека сегментот 2 е фиксиран во 10% тампон формалин за хистологија и сегментот 3 е хомогенизиран за набројување на бактериите.
Салмонела CFU по тежина на ткиво за време на инфекција. Оваа бројка е пронајдена од Ло и сор. 26 сменети. Кликнете овде за да видите поголема верзија на оваа слика.
Слики на светло поле од незабележани животни и животни од страна на Цеца, 21 и 42 дена по инфекцијата со S. Typhimurium AroA. Скала столб, 200 м. Оваа бројка е земена од Ло и сор. 26 сменети.
(А.) ПСР + боење нормализирано во областа на ткивото. Значењето определено со едностран тест ANOVA Kruskal-Wallis со тест Dunn's Post. **, П 0,05. Оваа бројка е пронајдена од Ло и сор. 26 сменети. (Б.) Пример за квантификација на колаген во ткивото на мозокот со Фиџи. Кликнете овде за да видите поголема верзија на оваа слика.
Потребна е претплата. Ве молиме, препорачајте JoАВО на вашиот библиотекар.
Дискусија
Потребна е претплата. Ве молиме, препорачајте JoАВО на вашиот библиотекар.
Откривање
Авторите не мора да откриваат финансиски судир на интереси.