Тотален билирубин; Централна воена универзитетска болница д-р
Тотален билирубин
Генерални информации
билирубин се произведува во макрофагите од ензимскиот катаболизам на хем-фракцијата од разни хемопротеини. Околу 80% од циркулирачкиот билирубин потекнува од стари еритроцити. Кога циркулирачките еритроцити ќе го достигнат крајот на нивниот нормален живот од околу 120 дена, тие се уништуваат од ретикулоендотелијалните клетки. Оксидацијата на хем генерира биливердин, кој пак се метаболизира во билирубин. Останатите 15-20% од циркулирачкиот билирубин доаѓа од други извори (уништување на зрели еритроцити во хематогената коскена срцевина или метаболизам на други протеини кои содржат хем - хепатални цитохроми, мускулен миоглобин, ензими).
Така, формираниот билирубин циркулира во крвта, транспортиран до црниот дроб во форма на растворлив билирубин-албумин комплекс. Иако билирубинот е доста силно врзан за албумин, црниот дроб може лесно да го извлече од крвта. На хепатално ниво, билирубинот е конјугиран со глукуронска киселина, под дејство на UDP-глукуронил трансфераза. Конјугираниот билирубин вклучува билирубин-моноглукуронид, кој преовладува во црниот дроб и билирубин-диглукуронид, кој преовладува во жолчката течност. Конјугираниот билирубин се транспортира до жолчните канали, од каде што се испушта заедно со жолчката во жолчните канали, а потоа во цревата, каде што претрпува низа последователни намалувања со формирање на уробилиноген и стеркобилиноген. Стеркобилиногенот и мал дел од уробилиногенот се излачуваат со фецесот; најголемиот дел од уробилиногенот се апсорбира во цревата, го достигнува црниот дроб преку порталната циркулација (ентеро-хепатално коло), повторно излачувајќи се преку жолчката.
Нивото на серумскиот билирубин се зголемува кога производството го надминува неговиот метаболизам и екскреција. Клинички хипербилирубинемија се појавува како жолтица - жолта пигментација на кожата и склерата, која се поставува во вредности на билирубин од 2-2,5 mg/dL.
Нарушувања на метаболизмот на билирубин може да се подели во четири главни категории:
• зголемено производство на пигменти;
• мало внесување на црниот дроб;
• несоодветна хепатална конјугација;
• намалена екскреција на конјугиран пигмент од црн дроб и жолчката.
Во лабораторијата се измерени две фракции на пигментот - конјугирана фракција растворлива во вода, што дава директна реакција со диазо реагенсот и што претставува конјугиран билирубин (во форма на моно- и диглукуронид) и растворлив во маснотии, кој претставува неконјугиран билирубин.
Првите три нарушувања на метаболизмот на билирубин се поврзани со претежно неконјугирана билирубинемија, а четвртата категорија е поврзана со претежно конјугирана билирубинемија и билирубинурија.
Серумски билирубин вкупно покажува зголемени вредности во следниве случаи:
• некомплицирана хемолиза;
• хепатоцелуларна жолтица;
• екстрахепатична билијарна опструкција;
• вирусен хепатитис;
• алкохолен хепатитис.
Индиректен билирубин (БИ)
Неконјугиран билирубин или индиректен билирубин се добива со разликата помеѓу вредноста на вкупниот и директниот билирубин. Плазматската концентрација на некоњугиран билирубин се одредува со:
• стапката со која новосинтетизираниот билирубин влегува во плазмата (промет на билирубин);
• стапка на елиминација на билирубин од црниот дроб (хепатален клиренс на билирубин).
Зголемувањето на вредностите на неконјугираниот билирубин во серумот може да ги има следниве причини:
• зголемен промет кој се карактеризира со зголемено уништување на циркулирачките еритроцити - се јавува кај болести поврзани со хемолиза:
*хемолитична анемија - во повеќето случаи на некомплицирана хемолиза, просечното ниво на серумски билирубин е 3-4 mg/dL;
*жолтица како резултат на зголемено производство на пигменти како резултат на инфаркти на ткивата (белодробни инфаркти, крвни збирки во ткивата, по катетеризација, руптури на аневризми на аортата);
• променето внесување на црниот дроб од страна на некои лекови (флаваспидинска киселина, новобиоцин);
• изменета конјугација на билирубин поради ниска активност на билирубин-глукуронил-трансфераза;
*неонатална жолтица - скоро сите новороденчиња покажуваат одреден степен на минлива неконјугирана хипербилирубинемија помеѓу вториот и петтиот ден од животот како резултат на фактот дека во оваа фаза ензимот на црниот дроб глукуронилтрансфераза е сè уште незрел. Вредноста на индиректниот билирубин не надминува 5 mg/dL. Кај новороденчињата со додаден хемолитички процес, товарот на пигментот доведува до потешка жолтица и нивоата на билирубин може да надминат 20 mg/dL.
*наследен недостаток на глукуронилтрансфераза:
-Гилберт-ов синдром (лесна и постојана хипербилирубинемија со просечни вредности од 1,2-3 mg/dL, ретко надминувајќи 5 mg/dL);
-Синдром на Криглер Наџар (тип I со отсуство на вредности на глукуронилтрансфераза и БИ од 20-45 mg/dL и тип II со парцијален дефицит на глукуронилтрансфераза и вредности на BI помеѓу 6-20 mg/dL);
*стекнат недостаток на глукуронилтрансфераза;
*инхибиција на лекови;
*жолтица на мајчино млеко (реверзибилна инхибиција на глукуронилтрансфераза).
Директен билирубин (БД)
Конјугираниот билирубин, растворлив во вода и со висока реактивност, дава реакција на боја со диазо реагенсот, познат како директен билирубин. Зголемените директни нивоа на билирубин во серумот се поврзани со намалена екскреција на конјугиран пигмент од црниот дроб и жолчката и се јавуваат кај холестатска или хепатоцелуларна жолтица. Патолошкото зголемување на директен билирубин доведува до појава на овој пигмент во урината. Бидејќи индиректниот билирубин не се излачува преку урината, присуството на билирубин во урината означува зголемување на серумскиот конјугиран билирубин.
Зголемени вредности на директен билирубин се јавуваат кај:
• интрахепатична опструкција:
* поради семејни дефекти на хепаталната екскреторна функција:
-Синдром на Дубин Johnонсон (хронична идиопатска жолтица со вкупни вредности на билирубин помеѓу 3-15 mg/dL со доминација на конјугиран билирубин;
-Синдром на ротор;
* поради стекнати дефекти на хепаталната екскреторна функција:
-холестаза предизвикана од лекови;
-постоперативна жолтица;
-хепатитис и цироза - кај хепатоцелуларни заболувања обично постои мешање помеѓу трите фази на метаболизмот на билирубин: навлегување, конјугација и екскреција. Екскрецијата е, сепак, најпогодена фаза и како резултат на тоа преовладува конјугиран билирубин во серумот.
• екстрахепатична опструкција - механичка опструкција на жолчните канали најчесто се должи на камења, тумори или стегања.
Нивото на серумски билирубин ретко надминува 35 mg/dL.
ЗАБЕЛЕШКА:
Тотален билирубин = Некоњугиран билирубин (индиректен) + директен билирубин
Тотален и директен билирубин ги одредува анализаторот; индиректен билирубин е резултат на камен.
колекција
Обука на пациентот - пост (на пр. пост).
Примерок собрани - крв ќе дојде.
Контејнер за берба - правосмукалка без антикоагуланс со/без гел за одвојување.
Потребна е обработка по бербата - одделете го серумот веднаш и работете во максимум. 4 часа; за време на периодот на чекање, серумот е заштитен од светлина (изложеност на светлина предизвикува значително намалување по 2-3 часа). Ако не е можно да се работи за 4 часа, одделениот серум се чува на 4 ° C или -20 ° C.
Волумен на тест - минимум 0,5 mL сер.
Причини за одбивање на доказите - хемолизиран примерок, примерок не е заштитен од светлина.
Стабилност на примерокот - одделениот серум е стабилен 4 часа на собна температура; 48 часа на 2-8 ° C; 6 месеци на -20 ° C.
Метод
Метод - спектрофотометриски (колориметриски).
Референтни вредности
Тотален билирубин
Вредности (mg/dL)
предвремено: 1 ден
На време: 1 ден
Деца и возрасни
Директен билирубин
Индиректен билирубин
Фактор на конверзија: mg/dL x 17,1 = μmol/L.
Граница за откривање - 0,1 mg/dL (1,71 μmol/L).
Критички вредности -> 15 mg/dL (вкупен билирубин).
Граници и пречки
се намалува: амикацин, антиконвулзивен, преднизон, теофилин, тиоридазин, плишано мече.
• Аналитички пречки