Важност и примена на лабораториски тестови во неплодност на кучки (преглед)

Важноста и употребата на некои лабораториски тестови во неплодност на кучки (преглед)

Прво објавено: 10 ноември 2016 година

Уредничка група: MEDICHUB MEDIA

Апстракт

Оваа студија е резиме на некои лабораториски средства и методи, користени во истрагата на случаи кои можат да бидат поврзани со репродуктивни болести и патологија, соодветно неплодност, во кучки. Ossibleе се дискутира за можните причини и серолошките, цитолошките, бактериолошките, имунолошките проценки со цел да се нагласат настаните што се случуваат при надзор на еструсот, правилното управување и оптималните услови за размножување во кучката, како и идентификување на синкопите при проценка на овие.

Резиме

Оваа студија е резиме на некои методи и лабораториски параклинички средства вклучени во истрагата на некои случаи што можат да бидат вклучени во областа на репродуктивни нарушувања и патологија, на тема неплодност на кучки. Ossibleе бидат наведени и дебатирани можните причини и проценки на серолошкиот, цитолошкиот, бактериолошкиот, имунолошкиот редослед, со намера да се потенцира и да се привлече вниманието на каскадата настани вклучени во естралниот мониторинг, доброто управување и оптималните услови за размножување на кучки, како и идентификување на синкопите нивно оценување.

Неплодноста може да се смета за обратна фаза на плодноста и ја изразува неможноста на сексуално зрели жени да се размножуваат. Ова се смета за минливо, реверзибилно нарушување, за разлика од стерилитетот, кое е дефинитивно и неповратно нарушување на репродуктивната функција. Каузалните фактори на овие патолошки состојби можат да дејствуваат од првите фази на развој на нов организам, почнувајќи од фазата на зигот, потоа во фазите на ембрионална органогенеза и развој на фетусот, а потоа и во вонбрачен живот (од телињата до пубертетот, а потоа и во периодот на гениталиите). ) Гинеколошкото истражување има за цел индивидуално познавање на секое животно и негова класификација во физиолошка или патолошка состојба од репродуктивна гледна точка, да ја знае општата состојба на главните индекси на репродукција, како и мерките што мора итно да се применат за нивно подобрување. Бидејќи е можно да се меша со дејството на неколку штетни фактори што може да го отежнат поставувањето на етиолошка дијагноза, специјалистот мора да го испита животното со посебна проникливост.

Пред самата гинеколошка истрага, мора да се анализираат следниве елементи: исхрана, хигиена, услови за одржување, движење и одмор на стадото, епидемиолошка состојба, извршување на вештачки оплодувања итн. Елементите врз основа на кои се врши гинеколошката истрага се: анамнезата и внатрешниот и надворешниот клинички преглед (Bîrţoiu A., Seiciu F., 2006).

Некои од најчестите симптоми кои се јавуваат кај кучиња кои не можат да се репродуцираат би биле неправилен еструс, неможност за забременување, тежина при воспоставување сексуален контакт и губење на бременоста. Со цел да се именува плодноста во нормални граници на кучка со репродуктивен капацитет на здрави кокошки, потребен е нормален и редовен еструс, со здрав репродуктивен систем, нормални јајца, репродуктивни хормони во оптимални и постојани граници, оплодување без абнормалности од сперма, реакција позитивно на опкружувањето на спроведувањето на формираниот зигот, неговото гнездење во ендометриумот, нормалното поставување на плацентата и поддршка на гестација до мандат, стабилни концентрации на прогестерон. Сите овие услови мора да се одржуваат на оптимално ниво во текот на двата месеци од бременоста, во спротивно процесот на репродукција е променет, што резултира во неплодност (Фонтбон А., 2006).

Неплодноста може да влијае на кучки од сите возрасти, но има тенденција да се јавува кај геријатрија. За кучиња над 6-годишна возраст, честа причина е ендометријална цистична хиперплазија. Кучињата кои имале историја на инфекции на матката, исто така може да развијат потешкотии при всадување на оплодено јајце. Но, во повеќето случаи, главна причина за неплодност е оплодувањето за време на погрешен период на еструс. Расите на кучиња склони кон откажување на тироидната жлезда имаат поголема преваленца на проблеми со плодноста. Раси со посебен ризик од хипотироидизам се боксери, добермани, дакели, златни ретривери, германски булдози, ирски сетери, џуџести шнауцери и пудли.

Други критериуми кои можат да играат улога во намалувањето на можноста за репродукција во кучки се:

кучешки вирус;
инфекции со Toxoplasma spp.;
антитела против сперма;
антимилерски антитела;
хипераденокортицизам;
хипотироидизам;
нарушени функции на јајниците;
хромозомски аберации;
вирусни или паразитски системски инфекции;
неплодност фактори кај машкото куче;
субклинички инфекции на матката;
Бруцела канис;
недостаток на стимулација пред копулаторот, со цел да се предизвика овулација на кучка.

Главниот метод за проверка на фазата на еструс на кучката е вагинална цитологија.

Сите промени забележани во вагиналната цитологија за време на естрието на кучка се должат на промените во концентрацијата на естроген во телото. Разбирањето на механизмот со кој се случуваат овие промени и нивните последователни видливи ефекти во цитологијата во клиничко опкружување ќе му помогнат на клиничарот во цртање график на нормални и абнормални циклуси. Естрогенот се произведува преку стероидогената патека, почнувајќи од текалните клетки, каде што разни ензими го претвораат холестеролот во разни бремености, а можеби и во андростенедион андрогени хормони, кои последователно се транспортираат по должината на основната мембрана во клетките на гранулозата (Оккенс и сор., 2006).

Одредување на серумски прогестерон

Во кучката, прогестеронот потекнува од лутеалното ткиво на јајниците. За време на анеструсот, базалните нивоа на прогестерон во серумот се нормално помалку од 1 ng/mL.

За време на проеструсот, преовулаторната лутеинизација се јавува кај некои фоликуларни клетки, како таква, неколку дена пред овулацијата, тие го менуваат своето производство на естроген во производство на прогестерон (Конканон, П.В., 2006). Серумските нивоа на прогестерон за време на проеструмот полека се зголемуваат на околу 1 ng/mL, каде што се стабилизираат неколку дена до скоро две недели. Во одреден момент, концентрациите повторно почнуваат да се зголемуваат и ќе достигнат околу 5 ng/mL пред кучката да овулира (Конканон, П.В., 1977). Штом започне ова зголемување на прогестеронот, неговата стапка на раст останува постојана меѓу кучките и така клиничарот може да ги поврзе физиолошките настани на врвот на лачењето на LH, овулацијата и почетокот на плодниот период со соодветни концентрации на серумски прогестерон.

Постојат хермафродитни животни со специфични промени на ниво на гениталиите, што е поврзано со хромозомски, гонадални и сексуални фенотипски аберации (Мејерс - Вален, 1993).

Анеуплоидијата, што е хромозомска аберација кај мејозата или митозата, што резултира во трисомија или моносомија, е уште една важна причина за неплодност на кучки. Генетски мутации кои влијаат на развојот на кучето може да се појават за време на една од трите основни точки во зачнувањето: 1) за време на хромозомското воспоставување на родот - моносомија (XO), трисомија (ХХХ или XXY) или химеризам (некои клетки XX, други XY на истата индивидуа); 2) кога се преведува родот од хромозомско ниво на гонадално ниво (разликата помеѓу реалниот хромозомски пол и репродуктивните органи, на пример, јајниците на кучката се XY, а не XX); 3) за време на развојот на репродуктивниот тракт и органите (надворешен изглед на женката, но со машки репродуктивни органи). Кога ќе се појави една од овие ситуации, нормалната репродуктивна функција е инхибирана и се воспоставува трајна и неповратна состојба на анеструс (Брин и сор., 2001).

Абнормалности на сексуалната диференцијација: лимфоцитен офоритис, лутеални цисти на јајници, инсуфициенција на хипофизата, аплазија/хипоплазија на јајниците.

Атипичен синдром на нерамнотежа на кортизол-естроген (ACEIS) идентификува присуство на неактивен или недоволен кортизол кој овозможува производство на голема количина на адено-естроген. Овој вишок не само што се врзува за рецепторот на тироидниот хормон, туку го нарушува и имунитетот, што повеќе не го штити пациентот. Зголемувањето на вкупниот естроген се јавува, како резултат на нерамнотежата дадена од средниот слој на адено-хипофизата со производството на кортизол. Оваа нерамнотежа може да биде предизвикана од недостаток, врзување или деактивирање на кортизол, високо ниво на концентрација или скоро непостоечко од тоа (Plechner, A.J., 2004).

Влијанието на исхраната во неплодноста

Кога диетата е премногу богата со јаглехидрати, кои се претвораат во шеќери (житарици, скроб од компир, грашок, моркови и сладок компир, како и едноставни шеќери како мед, овошје и фруктоза), оваа диета го прави нивото на шеќер во организмот да расте. Ова, пак, предизвикува ослободување на инсулин за намалување на нивото на шеќер. Кога нивото на шеќер паѓа, кортизолот се ослободува за да помогне во зголемување на нивото на шеќер. Оваа реакција има бумеранг ефект, со ефект наназад, што може да предизвика исцрпување на инсулин. Овој проток влијае на нивото на естроген, прогестерон и тестостерон. Кога кортизолот се ослободува постојано како одговор на диета со висока содржина на шеќер, тој се натпреварува со прогестерон за истите рецептори и добивки на кортизол секој пат. И прогестеронот е неопходен за плодност (Олсон, Л., 2015).

Хипотироидизам е асоциран со неплодност и се карактеризира со анестезија, неправилности на естроен циклус и продолжено крварење од проестрално потекло (sonонсон, 1980; Несбит и сор., 1980). Репродуктивните проблеми поврзани со хипотироидизам се предизвикани од високо ниво на серумски пролактин (Chastin and Ganjam, 1986).

Анти-милеров хормон (АМХ), член на хомодимеричен гликопротеин од фамилијата на раст б (TGF-b) семејство, исто така наречен инхибиторна супстанција на Милер, е проучен пред се за неговата улога во регулирањето на машката диференцијација во ембрионалниот период. Така, хормонот произведен од клетките на Сертоли на феталниот тестис предизвикува регресија на каналите на Милер, примарните елементи на женскиот репродуктивен тракт и со тоа придонесува за нормален развој на машките гениталии. Со почетокот на пубертетот, АМХ, исто како инхибин Б., се произведува од клетките на грануларниот слој на фоликулите за раст на јајниците, а не од исконските фоликули, ниту од антралните фоликули во последната фаза на раст (под директна регулација на FSH). Поради специфичната експресија во клетките на грануларниот слој на неизбрани фоликули за раст (потенцијално плодни примарни и секундарни фоликули), АМХ е идеален маркер за проценка на резервата на јајниците (Висер и сор., 2006).

Нискиот израз на AMH на фоликулите ќе го намали прагот за FSH, предизвикувајќи фоликулите да продолжат да растат и да овулираат во следниот циклус (Дурлингер и сор., 1999; Дурлингер, 2002).

Синдром на псевдогестација

Синдромот на псевдогестација е присутен кај небремени кучки по 6-12 недели еструс и се карактеризира со знаци на едем на вулвата, лактација и проширување на млечната жлезда (onesонс и сор., 1988).

Вагиналните неоплазми се најчестиот вид на тумор во репродуктивниот систем на кучката (Manothaiudom et al., 1991). Најважните вагинални неоплазми се: преоден клеточен карцином на уретрата (КБТ), преносливи венерични тумори (ТВТ), карцином на сквамозен клетка (СЦЦ), лејомиом и фибропапилум. Овие вагинални тумори обично се присутни кај геријатриските кучиња, со исклучок на венерични тумори кои обично се присутни кај младите.

Вообичаените дијагностички методи за овие тумори се физички преглед, целосен тест панел, палпација (дигитален преглед), вагиноскопија, вагинална цитологија и хируршка биопсија.

Имунолошка основа на неплодност

Патолошкиот имунолошки одговор е една од етиологиите на неплодност, дури и ако досега нема многу докази. Главната цел на проучување на оваа етиологија би била синтеза на податоци за антигенска толеранција, нејзино губење, имунолошка патогенеза предизвикана од неплодност и лабораториска дијагноза (Смит и сор., 1999).

Автоимунитет и антигени цели во патологијата на јајниците

Вклучувањето на автоимуни механизми во предвремено прекинување на функцијата на јајниците се расправаше од многу специјалисти. Во некои патологии на јајниците, како што се идиопатска неплодност, синдром на полицистични јајници или ендометритис, се предложени слични механизми. Во секој случај, точната улога на автоимунитетот во патофизиологијата на овие болести сè уште останува контроверзна. Дијагнозата на автоимуно заболување на јајниците се заснова на клиничка, биолошка и хистолошка истрага, но посебен интерес им се дава на антиоварските автоантитела.

Како цели се вклучени стероидогени ензими, гонадотропини и нивни рецептори, лутеално тело, област на пелуциди и ооцити, кои понатаму се испитуваат.

Femaleенска толеранција на спермата антигени

Tractенскиот генитален тракт е нареден со клетки на имунолошката компонента која фагоцитира сперматозоиди и ги обработува нивните антигени за препознавање на имунитетот. Овој механизам може да биде под влијание на следниве фактори:

n од големиот број на сперматозоиди ослободени во горниот дел на вагината, можно е само мал дел, имунолошки различен од преостанатото мнозинство, да добие пристап до фалопиевите туби; елиминацијата на спермата од гениталниот тракт го намалува бројот на оние кои ќе добијат пристап до имунолошкиот систем; деградација на антигените на сперматозоидите од екстрацелуларните ензими специфични за матката; сперома фагоцитоза од соматски и макрофажни клетки, хемотактичка привлечност за макрофагите и неутрофилите во грлото на матката и перитонеалната празнина; неспецифично врзување на имуноглобулини или природно непатогени антитела за зрели сперматозоиди, како прелиминарно дејство на нивната фагоцитоза. Овој механизам, пак, може да ја зголеми фагоцитозата и имуногеноста; присуство на имуносупресивни фактори во спермата и фоликуларната течност итн.

И за тестисите и за јајниците, тоа се случува кога рамнотежата се навалува во корист на патогените реактивни Т-клетки во себе, со: 1. исцрпување на супресори (регулаторни) Т-клетки и 2. активирање на патогени реактивни Т-клетки во себе.

Во јајниците, препознаени структури на автоантитела вклучуваат: ооцити и фоликули, област на пелуциди, клетки на гранулоза, текални клетки, лутеални клетки и хорионски гонадотропински рецептори. Roleе биде можна улога на хиперстимулација на јајниците пред ин витро оплодување во производството на автоантитела на јајниците, како и повторена траума на јајниците, извлекувајќи ооцит за ин витро оплодување (Agarwal et al., 2007).

Антитела против сперма (ASA)

Фактот дека спермата може да предизвика појава на антитела е добро познат уште од 1899 година. АСА се откриваат кај 7-15% од мажите и кај 13-80% од жените со необјаснета неплодност.

Може да се најде во серумот, спермата, на површината на спермата, во цервикалната слуз. Тие припаѓаат на класата на имуноглобулини IgG, IgM и IgA.

Лабораториско испитување на имунолошка неплодност

До денес, презентирани се многу малку анализи на имунитет со посредство на клетките. Ова се должи на комплексноста на клеточниот имунолошки систем, како и на компонентите што посредуваат во неплодноста, кои сè уште се дефинираат и развиваат. Кога постои сомневање за неплодност предизвикана од АСА (необјаснета неплодност), може да се користи еден од достапните тестови. Тие се поделени во 5 групи:

Тестови за аглутинација - макро: Тест за гел аглутинација (ГАТ); Мешана анти-глобулинска реакција (МАР); Immunobead® тест е специфична постапка што се користи за откривање на присуство на антитела на IgG, IgM и IgA, што покажува која област на сперматозоиди (глава, врат или опашка) влијае на автоантитела. Сперматозоидите се комбинираат со полиакриламидни честички, претходно обложени со анти-IgG, анти-IgM или анти-IgA.

Флуоресценција на антитела: имунофлуоресценција (IF); проточна цитометрија.

Боеметрија: Ензимски поврзана имуносорбентна анализа (ЕЛИСА).

Радиоимуна проценка: Тест со радио ознака на антиглобулин.

Секој од овие тестови има предности и недостатоци. За целосна проценка, препорачливо е да се користат сите овие тестови кои можат да обезбедат локација, изотип и квантификација на врзувањето на антителата.

Лутеална инсуфициенција во кучка, како последица на автоимуниот одговор на прогестеронот

Скратувањето на циклусот на еструс, ембрионалната смрт и абортусот може да бидат поврзани со недоволно лачење на прогестерон од лутеалното тело на кучката. Се проверува концентрацијата на прогестерон, пролактин и релаксин во хиполутеична фаза и контролата за време на бременоста и за време на не-гестацискиот естрозен циклус. Понатаму, анализираните антипрогестеронски антитела се анализираат за можна ембрионална загуба поврзана со хормонални промени, во корелација со одговорот на хормоналните антитела (enени К. и сор., 2006).

Диференцијалната дијагноза за неплодност се поставува помеѓу проблеми со управување и клинички протокол за временскиот рок на овулација, кучки кои последователно не дозволувале монтирање или не го фатиле монтирањето по присилно монтирање или вештачко оплодување, проверка за време на плодниот период на лошо управување од Земјоделците.

Периодите на приемчивост и плодност за време на еструсот значително се разликуваат меѓу нормалните кучки, па дури и од индивидуа до личност во следните циклуси. Овие периоди можеби не се совпаѓаат со првичниот избор на оптимално време на испорака, на десетти - 14-ти ден по првото вагинално крварење. Протоколите за одредување на времето на овулација со употреба на вагинална цитологија, повторена вагиноскопија и проверка на нивото на прогестерон и LH се корисни за идентификување на плодниот период, кога треба да се воведе размножување, што овозможува правилно управување со монтирањата. Клиничарот мора да има предвид дека оптимално време на овулација може да се утврди само кога сите резултати од поврзаните прегледи и тестови се во корелација (enени К. и сор., 2006).