Датотека за демо-архива на животната средина преку интернет - Упатство 67548EWG за приближување на правните и

Б.32. 1-ви метод

Б.32. 1.1. вовед

Погледнете го генералниот воведен дел Б.

Б.32. 1.2. Дефиниции

Погледнете го генералниот воведен дел Б.

Б.32. 1.3. Референтни супстанции

Б.32. 1.4. Принцип на методот

Испитната супстанција нормално се администрира во испитуваните групи животни 7 дена во неделата за поголем дел од животниот циклус со употреба на соодветен начин на администрација, една доза по група. За време и по изложеност, испитаните животни се забележуваат секој ден за знаци на интоксикација, особено за развој на тумори

Б.32. 1.5. Критериуми за квалитет

Б.32. 1.6 Опис на методот

Пред почетокот на експериментот, животните се аклимираат за период од најмалку 5 дена под експериментално домување и услови за хранење. Пред почетокот на експериментот, здрави млади животни се рандомизирани и распоредени во потребниот број на групи за третман и контрола.

Најпосакувано експериментално животно е стаорецот. Сепак, други животински видови (глодари или не-глодари) може да се користат врз основа на резултатите од претходните студии. Тестовите треба да се спроведат со млади, здрави животни од вообичаени соеви на лабораториски животни; администрацијата на испитната супстанција треба да започне соодветен период по одвикнувањето од браната.

На почетокот на експериментот, варијабилноста на телесната тежина на животните не треба да биде поголема од ± 20% од средната вредност. Ако определување на субхронична орална токсичност претходи на долгорочна студија, истите животински видови или тест животински соеви треба да се користат во двата случаи.

Број и пол

Кај глодарите, треба да се користат најмалку 100 животни (50 жени и 50 машки) за секоја доза и соодветната контролна група. Theенките не смеат да имаат ѓубре и не се бремени. Доколку треба да бидат убиени животни во текот на експериментот, вкупниот број на животни мора да се зголеми за бројот на животни што треба да бидат убиени пред крајот на експериментот.

Дози и фреквенција на изложеност

Треба да се користат најмалку три дози и дополнителна контролна група. Треба да се избере највисоката доза така што ќе се појават само мали симптоми на интоксикација, како што е одложено зголемување на телесната тежина (помалку од 10%). Сепак, на нормалниот животен век на животните не треба да влијаат други последици, освен последиците поврзани со туморот.

Најниската доза не треба да влијае на нормалниот тек на раст и развој или животниот век на животните и не треба да предизвикува знаци на токсични ефекти. Нормално треба да биде не помалку од 10 проценти од највисоката доза.

Средната доза е помеѓу највисоката и најниската доза.

При избор на дози, мора да се земат предвид податоците од претходните експерименти.

Изложеноста е обично дневна. Ако супстанцијата се администрира во вода за пиење или се меша со добиточната храна, водата или добиточната храна мора да бидат достапни за животните во секое време.

Со исклучок на изложеност на испитуваната супстанција, контролната група мора да одговара на експерименталните животински групи во сите погледи.

Под посебни услови, на пример, кога користите аеросол во студии за инхалација или емулгатор со непознати биолошки ефекти во студии за орална токсичност, препорачуваме употреба на дополнителна, нетретирана контролна група на која не смее да се администрира возилото.

Главно се користи орална, дермална и инхалативна администрација. Изборот на начинот на администрација зависи од физичките и хемиските својства на испитната супстанција и видот на изложеност на луѓето.

Ако испитаната супстанција се апсорбира од гастроинтестиналниот тракт и е можно изложеност кај луѓето преку орален пат, треба да се избере орален начин на администрација, под услов да нема контраиндикации. Испитната супстанција треба да се даде на животните во добиточната храна, растворени во вода за пиење или во капсули.

Секојдневна администрација на 7 дена од неделата е пожелна, бидејќи со петдневен ритам за време на периодот без администрација е можно закрепнување или намалување на симптомите на интоксикација и може да влијае на резултатот и проценката. Од практични причини, сепак, петдневниот циклус на администрација се смета за прифатлив.

Кожното изложување со примена на кожата може да се избере за да се симулира еден од најголемите начини на изложеност кај луѓето; служи и како модел за поттикнување на промени на кожата.

Бидејќи студиите за апликација за инхалација претставуваат поголеми технички проблеми во споредба со другите начини на администрација, тука треба да се дадат подетални упатства. Треба да се напомене дека интратрахеалната инстилација е валидна алтернатива во посебни случаи.

Во случај на долгорочно изложување, обично се зема претпоставената изложеност на човекот како основа, по што животните се изложени 6 часа на ден за 5 дена со униформа концентрација на тест комора (периодично изложување). Или, се претпоставува можна изложеност на животната средина во која животните се изложени на испитуваната супстанција од 22 до 24 часа на 7 дена (континуирано изложување) и е обезбеден еден час на ден за хранење и одржување на комората истовремено. И во двата случаи животните се изложени на фиксна концентрација на испитната супстанција. Главната разлика што треба да се разгледа помеѓу наизменичното и континуираното изложување е тоа што во првиот случај животните може да се опорават од ефектите на дневна изложеност за време на период од 17-18 часа без изложеност и подолг период на викенд.

Која од двете форми на изложеност е избрана зависи од целите на предметната студија и од човечките услови што треба да се симулираат со тестот. Сепак, мора да се земат предвид некои технички потешкотии. На пример, придобивките од континуирана изложеност при симулирање на услови на животната средина, најверојатно, ќе бидат неутрализирани од потребата да им се обезбеди на животните вода и добиточна храна, како и од потребата за пософистицирани (и посигурни) техники за создавање аеросол и пареа и мониторинг.

За експерименти врз животни, треба да се користи систем за вдишување што овозможува динамична брзина на воздухот со брзина на размена на воздух од најмалку дванаесет пати на час, со цел да се обезбеди соодветна содржина на кислород и рамномерна дистрибуција на тест супстанцијата во атмосферата. Тест коморите за контрола, како и за испитаните животни треба да бидат идентични во дизајнот и конструкцијата, со цел да се создадат споредливи услови од секој поглед - со исклучок на изложеност на испитната супстанција.

Во пробната комора обично се создава мал негативен притисок со цел да се спречи испитната супстанција да излезе од комората. Тест-коморите треба да обезбедат животните што се испитуваат да се исцедат што е можно помалку. За да се обезбеди стабилност на атмосферата во комората за вдишување, вкупниот волумен на испитаните животни не треба да надминува 5% од волуменот на комората.

Следните мерења или контроли мора да се извршат:

За време на секојдневното набудување на животните, треба да се обрне особено внимание на промените во кожата, крзното, очите, мукозните мембрани, респираторниот и циркулаторниот систем, автономниот и централниот нервен систем, како и соматомоторните и однесувањето.

Редовно набудување на животните е потребно за да се обезбеди што е можно повеќе бројот на животните да не се намалува за време на студијата поради канибализам, автолиза на ткивата или грешки при движење на животните. Morивотните од Морибунд треба да бидат издвоени, убиени и расечени.

Клиничките симптоми и смртноста треба да се евидентираат за секое животно. Развојот на туморите мора да се следи со особено внимание, а времето на формирање, локализацијата, обемот, изгледот и прогресијата на секој јасно видлив или опиплив тумор мора да се запише.

Внесувањето храна (и потрошувачката на вода, доколку испитаната супстанција се администрира со вода за пиење) треба да се утврдува неделно во првите 13 недели од студијата, а потоа во тримесечни интервали, освен ако за здравјето на животните или телесната тежина не се потребни други мерки.

Тежината на телото на секое животно треба да се бележи еднаш неделно во текот на првите тринаесет недели од тестот и најмалку еднаш на секои четири недели после тоа.

Ако набудувањето на животните сугерира влошување на здравствената состојба во текот на студијата, мора да се направи диференцијална крвна слика на болните животни.

По 12 месеци, 18 месеци и пред жртвување, се подготвува размаска од крв од сите животни. Диференцијална крвна слика се зема од животни од највисока доза и контролна група. Ако резултатите од ова, но особено од последната анализа извршена пред убиството, или податоците од патолошките прегледи го сугерираат тоа, треба да се направи диференцијална крвна слика за следната пониска група (и).

Се прави целосна обдукција на сите животни, вклучително и на оние кои починале за време на експериментот или биле убиени од причини на болест. Сите препознатливи тумори или ткиво со сомнителни промени мора да бидат зачувани.

Следниве органи и ткива треба да се сочуваат во соодветен медиум за кој било подоцнежен хистопатолошки преглед: сите забележливи промени, мозок - вклучувајќи делови од ткиво од медулата/понсот, малиот мозок и церебралниот кортекс, хипофизата, тироидната жлезда/паратироидната жлезда, ткивото на тимусот, душникот и белите дробови, срцето, Аорта, плунковни жлезди, црн дроб, слезина, бубрези, надбубрежни жлезди, панкреас, гонади, матка, други органи на гениталиите, кожа, хранопровод, стомак, дуоденум, јејунум, илеум, цекум, дебело црево, ректум, мочен меур, репрезентативни лимфни јазли, женски млечна жлезда, мускули на бутот, Нерви на периферниот систем, градната коска со коскена срцевина, фемурот - вклучувајќи ја и површината на зглобот, 'рбетот, вратот, торакалниот и лумбалниот регион, очите.

Инстилацијата на белите дробови и мочниот меур со фиксирачки раствор претставува оптимално зачувување на овие ткива; Во студиите за инхалација, ваквиот метод на фиксација на белите дробови е предуслов за оптимален хистопахолошки преглед. Во студиите за инхалација, целиот респираторен тракт, вклучително и носот, фаринксот и ларинксот, мора да се зачува.

Органите на сите животни кои умираат или убиваат за време на тестот, како и на сите животни од контролните групи и групите со високи дози се подложени на целосен хистопатолошки преглед;
сите тумори или сомнителни промени во сите групи;
Доколку постои значителна разлика во фреквенцијата на неопластични промени помеѓу групата со најголема доза и контролната група, засегнатиот орган или ткиво, исто така, треба да биде подложен на хистопатолошки преглед во другите групи на дози;
ако стапката на преживување во групата со најголема доза е значително помала отколку во контролната група, следната група со пониски дози мора да биде целосно испитана;
Ако може да се демонстрираат токсични ефекти во групата со највисоки дози, што може да има влијание врз развојот на туморот, следната група со пониски дози мора да биде целосно испитана.

Б.32. 2. Податоци

Податоците треба да се сумираат во табеларна форма. Ова мора да ги покаже следниве информации за секоја тест група: бројот на животни на почетокот на тестот, бројот на животни со откриени тумори за време на тестот, времето на откривање и бројот на животни во кои е откриен тумор по обдукцијата. Резултатите треба да се проценат со употреба на соодветен статистички метод. За ова може да се користи признаен статистички метод.

Б.32. 3. Конечен извештај

Б.32. 3.1. извештај

Доколку е можно, во извештајот од тестот мора да се наведе следново:

Speciesивотински видови, животински вид, потекло. Услови за домување, хранење.
Услови за тест:

Опис на апаратот за изложеност

вклучувајќи дизајн, вид, димензии, извор на воздух, систем за создавање честички и аеросол, систем за климатизација, третман на издувен воздух и вид на сместување на животните во тест комората за време на извршувањето на тестовите. Уредите за мерење на температурата, влажноста и доколку е потребно, стабилноста на концентрацијата на аеросолот или големината на честичките мора да бидат опишани.

Овие податоци треба да се сумираат во табеларна форма, со наведување на средните вредности и земајќи ги предвид флуктуациите (на пример, стандардно отстапување). Тие мора да ги содржат следниве информации:

Б.32. 3.2. толкување

Погледнете го генералниот воведен дел Б; Г.

Б.32. 4. Литература

Погледнете го генералниот воведен дел Б; Х.

средина-онлајн - демо верзија

Сите заврши Текстови во тековната верзија во годишната претплата
Надоместок за користење: 90.- € нето (основна лиценца)

(моментално приближно 7200 наслови видете преглед - нема поделба по предметни области)

Цени и нарачка

Кодот за пристап ќе биде испратен на кратко известување