ДНК на Епштајн-Бар-вирус (EBV) во крвта (квантитативна) - Синево
Генерални информации
Вирусот Епштајн-Бар (EBV) е поврзан со широк спектар на бенигни и малигни заболувања, вклучително: инфективна мононуклеоза, лимфом, пострансплантативен лимфопролиферативен синдром и назофарингеален карцином.
Определувањето на вирусниот геном EBV-DNA се повеќе се користи во клиничките лаборатории при дијагностицирање и следење на болести предизвикани од оваа инфекција 6 .
ЕБВ инфекциите се широко распространети така што до 35-40 години 95% од возрасните дошле во контакт со овој вирус. Многу деца ја добиваат инфекцијата рано во животот, но во повеќето случаи е асимптоматска или се развива како лесна инфекција на горниот респираторен тракт 7. Кај адолесценти и млади возрасни, примарната инфекција со ЕБВ може да предизвика, во 35-50% од случаите, инфективна мононуклеоза - бенигна лимфопролиферативна состојба која се карактеризира со треска, физичка астенија, фарингитис и полиаденопатија.
Примарните инфекции се карактеризираат со зголемена виремија што се намалува на неоткриени вредности, бидејќи имунолошкиот систем ја препознава и контролира инфекцијата. Како и другите вируси на херпес, EBV може да остане во организмот во мирна состојба со години (латентна инфекција). Периодичните реактивации се придружени со минлива виремија. Некои пациенти подоцна развиваат неоплазми поврзани со EBV инфекција и тие имаат многу високо ниво на виремија како карактеристична карактеристика. Така, квантитативното определување на EBV-DNA не само што открива активна инфекција, туку е и „маркер на тумор“ за одредени типови на малигни процеси 2; 3; 4; 9 .
Тумори поврзани со ЕБВ се пост-трансплантативни лимфопролиферативни синдроми, карцином на назофаринксот, лимфоми поврзани со синдром на стекната имунодефициенција (СИДА) и Буркитов лимфом. .
Целната клетка за инфекција со ЕБВ е лимфоцит Б. Имунокомпромитирани пациенти кои немаат анти-ЕБВ антитела (често деца) се изложени на ризик од развој на акутна инфекција со ЕБВ што може да предизвика лимфопролиферативни синдроми; овие вклучуваат пострансплантативни лимфопролиферативни синдроми и лимфоми поврзани со синдром на стекната имунодефициенција (СИДА) 5. Инциденцата на пострансплантативни лимфопролиферативни синдроми варира од 1% кај пациенти со трансплантација на бубрег до 9% кај пациенти со трансплантација на срце/бели дробови и 12% кај пациенти со трансплантација на панкреас 7 .
Препораки за квантитативно одредување на EBV-ДНК
Серолошката дијагноза е ретко корисна за проценка на инфекцијата кај имунокомпромитирани пациенти и за следење на тумори предизвикани од ЕБВ, особено после трансплантацијата. Бидејќи културата на вирусот не е достапна за клиничката лабораторија, се смета дека ЕБВ-ДНК може да послужи како „маркер на туморот“ при проценка на лимфопролиферативните болести и назофарингеалниот карцином 2. Нивото на ДНК во крвта (квантифицирано со квантитативно PCR) почнува да се зголемува неколку месеци пред почетокот на лимфопролиферативната болест и се намалува по започнувањето на терапијата. Поради оваа причина, определувањето на EBV-ДНК во крвта може да биде предиктивен маркер кај осетливи пациенти, со што е можно да се процени ризикот од развој на пост-трансплантативни лимфопролиферативни синдроми во следните 3-4 месеци во зависност од вредностите на виремија. Исто така, сериските одредувања на ЕБВ-ДНК се корисни при проценка на одговорот на третманот на пациенти со лимфопролиферативни заболувања 6 .
Кај назофарингеалниот карцином, виремијата е висока при почетокот, се намалува за време на радиотерапија, станува неоткриена по добивање на ремисија, но опстојува на релапси 1; 4 .
Обука на пациентот - не е потребно 6 .
Примерок собрани - крвта ќе дојде 6 .
Контејнер за берба - вакутаин кој содржи ЕДТА како антикоагуланс 6 .
Количината собрана - колку што дозволува вакуумот 6 .
Потребна е обработка по бербата - тест не ќе се центрифугира 6 .
Причини за одбивање на доказите - стари, коагулирани, хемолизирани примероци; употреба на хепарин како антикоагуланс 6 .
Стабилност на тестот - примероците од крв се стабилни 3 дена на 2-8 ° С. Примероците не замрзнуваат! 6 .
Метод - PCR во реално време: реакција на полимеризација со вериги со откривање на акумулираниот PCR производ во реално време, со мерење на емитираната флуоресценција 6 .
Граница за откривање - Границата за откривање на методот на работа во опсегот на линеарност (мерлива) е 2415 IU/mL. Аналитичката чувствителност е 1800 IU/mL. 1 IU/mL = 0,61 примерок/ml 6 .
Интерпретација на резултатите
Вредностите на виремија кои прогресивно се зголемуваат при сериски определувања се сугестивни за пострансплантативни лимфопролиферативни синдроми.
Имунокомпромитирани пациенти кои имаат реактивирање на инфекцијата, но не развиваат лимфопролиферативни синдроми, обично имаат ниско ниво на виремија.
Во некои ситуации, анализаторот може да наведе вредности под границата на откривање на методот. Овие ќе бидат соопштени со споменувањето: „Резултатот може да не се репродуцира поради малиот број копии на вирусниот геном“ 8 .
Граници и пречки
Сериските определувања на ЕБВ-ДНК се многу покорисни за проценка на ризикот од пострансплантатен лимфопролиферативен синдром отколку изолираната виремија 8 .
1. Чан АТ, Ло ЈМ, Зи Б, Чан ЛИ, Ма ББ, Леунг СФ, Мо Ф, Лаи М, Хо С, Хуанг ДП, Johnонсон П.Ј. ДНК на вирусот на плазма Епштајн-Бар и резидуална болест по радиотерапија за недиференциран карцином на назофаринксот. Во J Natl Cancer Inst, 2002; 94: 1614-1619 година.
2. Од Дејвид Х. Персинг, Томас Ф. Смит, Фред Ц. Теновер. PCR откривање и пишување на вирусот Епштајн-Бар. Во дијагностичка молекуларна микробиологија. 1993. 344-355
3. Фан Х, Гули М.Л. Мерење на вирусното оптоварување Епштејн-Бар како маркер на болест поврзана со ЕБВ. Во Мол Дијагн. 2001 година; 6: 279-289.
4. Gulley ML, Tang W. Лабораториски анализи за болест поврзана со вирусот Епштајн-Бар. Во Ј Молек Дијагн, 2008; 10: 279-292.
5. Гај Боивин. Дијагноза на инфекција со херпесвирус на Централниот нервен систем. Во херпес 11. Додаток 2004 година; 2, 49-54.
6. Лабораторија во Синево. Специфични препораки на користената технологија за работа. 2015. Ref Type: Каталог.
7. Лудерер Ријан и сор. Вирус Епштајн-Бар на реално време PCR за дијагностицирање на примарни инфекции на ЕБВ и реактивирање на ИО. Во молекуларна дијагноза, 2005 година; 9 (4): 195-200 година.
8. Клиника Мајо/Медицински лаборатории Мајо Тестови за каталози и упатства. Откривање на ДНК на вирусот Епштајн-Бар (EBV) со PCR, квантитативно, крв. www.mayomedicallaboratories.com. Тип на ref: Интернет комуникација.
9. Ryan JL, Fan H, Swinnen LJ, Schichman SA, Raab-Traub N, Covington M, Elmore S, Gulley ML. ДНК на вирусот Епштајн-Бар (ЕБВ) во плазмата не е капсидиран кај пациенти со малигни заболувања поврзани со ЕБВ. Во Дијагн Мол Патол. 2004; 13: 61-68.