Експертиза за тестирање на антитела САРС-CoV-2 од локалните универзитети МедУни Виена
(Виена, 22-09-2020) Со цел да се процени ширењето на САРС-КоВ-2 и инфекциите што веќе се случиле со новиот коронавирус, покрај тековните достапни тестови за ПЦР, потребни се сигурни и анализирани методи на масовен пазар со кои САРС- CoV-2 антитела може да се детектираат. Тим експерти од три австриски универзитети - БОКУ, Ветмедуни Виена и МедУни Виена - сега го развија првиот квантитативен тест за антитела SARS-CoV-2. Со индустрискиот партнер Техноклон беше можно што побрзо да се комерцијализира овој тест за антитела.
Додека заедничкиот PCR-тест се користи за „пребарување“ на генетскиот материјал на САРС-CoV-2, тестот за антитела обезбедува информации за тоа дали некој веќе бил заразен со новиот тип на коронавирус и дали имунолошкиот систем реагира на оваа инфекција со производство на антитела. SARS-COV-2 одговори. Сигурни и масовно произведени тестови на антитела се важни алатки за добивање информации за ширење на вирусот САРС-КоВ-2 и информации за бројот на непријавени случаи на заразени лица. Тестирањето на антитела може да се користи и за идентификување на луѓе за кои болеста била асимптоматска - т.е. без никакви симптоми. Тестовите на антитела можат да помогнат да се направат подобри прогнози за нивото на имунитет кај населението и да се користат мерки попрецизно за ширење. Во однос на очекуваното одобрување на вакцините, тестовите со антитела се важна алатка за проверка на успехот на вакцинациите.
Заедничка основа за системот за тестирање
Австрискиот вируолог Флоријан Крамер (Медицински факултет Икан на планината Синај, Newујорк/САД) неодамна успеа да развие серолошки тест за откривање на SARS-CoV-2 антитела во крвта. Врз основа на ова, три австриски универзитети - БОКУ, Ветмедуни Виена и МедУни Виена - ги здружија силите во пролетта 2020 година за да генерираат серолошки тест што овозможува специфично и чувствително откривање на САРС-ЦОВ-2 антитела во крвта, а исто така и во мали лаборатории е применливо.
Заедно со научници од Универзитетот за природни ресурси и животни науки Виена (БОКУ), Универзитетот за ветеринарна медицина во Виена ја разви основата за овие тестови за антитела. Истражени се технички и клинички аспекти во врска со утврдување на тест за антитела. Тесната соработка помеѓу имунолозите и биохемичарите од Ветмедуни Виена со експерти од БОКУ и МедУни Виена, како и поддршката на спонзор од локалната економија, значително ја забрзаа развојната работа на системот за тестирање. „Силата и брзиот успех на конзорциумот се должи на фактот дека секој партнер придонесе за својата специјална експертиза, која е неопходна за поставување, тестирање и валидирање на овој тест систем“, вели Вилхелм Гернер од Институтот за имунологија при Ветмедуни Виена. Значи, за кратко време беше можно да се развие постапка за тест со висок квалитет.
Протеини за тестови на антитела низ цела Австрија
Меѓународен конзорциум составен од научници од одделенијата за биотехнологија (ДБТ) и применета генетика и биологија на клетките (ДАГЗ) е формиран на Универзитетот за природни ресурси и животни науки со цел брзо производство на висококвалитетни SARS CoV-2 протеини (антигени) за развој на тестови да обезбеди. ДБТ има широка експертиза и потребната инфраструктура за изразување (производство) и прочистување на рекомбинантните протеини во различни системи за производство, како што се клетки на цицачи и инсекти или микробиолошки организми, како што се бактерии и квасеци, во мали и големи размери. DAGZ ја проширува оваа експертиза да вклучува производство на рекомбинантни протеини во растенијата и насочена модификација на нивните структури на шеќер.
„Научната curубопитност и потребата да ни помогне да не поттикнеме во последните месеци да развиеме различни верзии на овие антигени, како и дополнителни кандидати за антиген и да ги тестираме за нивната соодветност за употреба во тест за антитела“, нагласува Реингард Граберр од Одделот за биотехнологија БОКУ. БОКУ воспостави сложени процеси на чистење и методи на анализа кои гарантираат дека антигените можат да се произведуваат репродуктивно и со особено високо ниво на чистота. Високиот квалитет на антигените произведени во БОКУ е многу пофален од многу надворешни партнери, бидејќи ги прави сите тестови засновани на нив многу попрецизни и значајни.
ЕЛИСА експертиза во Ветмедуни Виена
Универзитетот за ветеринарна медицина, Виена ја вклучи својата широка експертиза во дизајнирањето и првичното воспоставување на нови системи за тестирање ЕЛИСА. „Ензимски поврзани имуносорбентни анализи“ (ЕЛИСА) се методи со кои може да се детектираат високо специфични протеини како антитела. Развиената ЕЛИСА може да открие антитела против САРС-КоВ-2 од примероци од заразени пациенти и е достапна во две верзии. Варијанта на тестот го испитува присуството на антитела против доменот на врзување на рецепторот (RBD) на САРС-CoV-2 шилестиот протеин. Втората варијанта открива антитела против нуклеопротеинот (НП). Тестот насочен против НП реагира почувствително во раната фаза на имунолошкиот одговор, но во главната и доцната фаза на имунолошкиот одговор комплетот за тестирање насочен против РБД корелира подобро со имунитетот на пациентот.
Биобанка како важен ресурс
Со цел да се тестираат квалитетот и робусноста на двата теста во клиничка дијагностичка лабораторија, MedUni Виена, под раководство на Клиничкиот институт за лабораториска медицина, придонесе за својата голема експертиза во валидацијата на дијагностичките тестови. Со цел да се утврди специфичноста и чувствителноста на тестот за антитела, т.е. колку примероци се идентификувани како лажно позитивни или лажно негативни, голем број на добро карактеризирани примероци од серум се собрани пред пандемијата или од пациенти со потврден Covid-19 -Дијагнозата потекнува да се тестира. MedUni Виена беше во можност да ја искористи својата широка колекција примероци во биобанката и на мрежата на целата територија на Австрија во областа на медицинската лабораторија.
Висококвалитетен и разноврсен систем за тестирање
На крајот на краиштата, тесната соработка помеѓу академските партнери и индустрискиот партнер Техноклон овозможи да се комерцијализираат тестовите со антитела што е можно побрзо. Во споредба со тестовите за антитела кои се веќе достапни, ново воспоставениот тест-систем покажува важни предности, како што објаснува Вилхелм Гернер: „Секоја овластена лабораторија со стандарден читач на ELISA може да изврши тест за антитела. Тест системот, исто така, дозволува да се измери количината на антитела во примероците. Ова овозможува прецизни студии за временски курс на титри на антитела. “Друга апликација може да биде во идното тестирање на вакцините.
Во моментов, повеќето вакцини во развој содржат само области од шилестиот протеин на САРС-КоВ-2. Со воспоставување на два посебни системи за откривање на антитела против РББ од протеинот на шила и против нуклеопротеинот, идните студии за вакцини може да испитаат дали вакцинираните лица развиваат само антитела против РБД (реакција на вакцината) или, во позадина, имунолошка реакција против циркулацијата САРС-CoV-2 се одвива. Во овој случај, антитела би биле формирани и против нуклеопротеинот. Ова овозможува да се добијат важни информации за заштитниот ефект на вакцините.