Електрофореза на протеински серум - Синево
Генерални информации
Серумските протеини вршат различни функции во телото:
• компоненти на тампон системи;
• имунолошки агенси (имуноглобулини);
• улога на носител, обезбедувајќи транспорт на одредени јони и молекули (хаптоглобин, преалбумин, трансферин);
• улога на регулирање на активноста на разни протеолитички ензими (антипротези: алфа1-антитрипсин, алфа2-макроглобулин);
• улога во регулирање на онкотскиот притисок 2 .
Тековниот метод за одделување на серумските протеини што се користат во лабораториите за медицинска биохемија е електрофореза. Се користат цврсти потпори и алкална pH вредност, при што сите протеински компоненти се негативно наелектризирани и мигрираат на позитивниот пол. На електрофореграмот, по боењето, протеините се појавуваат во форма на ленти чија оптичка густина се мери, а секоја лента има максимална апсорпција. Со електрофореза, под условите споменати погоре, се добиваат пет фракции: серумски албумин, a1, a2, b, g - глобулин 3. Некои системи за електрофореза можат да ја разликуваат зоната b во две различни ленти b1 и b2, со што резултираат во вкупно 6 протеински фракции.
Албумин, а1 и б се појавуваат во форма на хомогени, добро дефинирани ленти. a2, и g се појавуваат како дифузни ленти, а дропката g претставува во неговиот централен дел поинтензивно обоена област 2 .
Препораки за електрофореза во серумските протеини - откривање на моноклонални гамапатии; проценка на серумските протеини и нутритивниот статус 3 .
Обука на пациентот - пост (на празен стомак) или после јадење 1 .
Примерок собрани - крв 1 .
Контејнер за берба - правосмукалка без антикоагуланс со/без одвојување на гел 1 .
Потребна е обработка по бербата - одделете го серумот со центрифугирање 1 .
Волумен на тест - минимум 0,5 ml ser 1 .
Причини за одбивање на доказите - хемолизиран во серумот или не се чува на 2-8 ° C 1 .
Стабилност на примерокот (поврзано со лабораториите во земјата) - одделениот серум е стабилен 4 дена на собна температура или една недела на 2-8 ° C 1 .
Метод на работа (поврзан со лаборатории во земјата)- електрофоретик (во агар гел) проследено со дензитометриско скенирање на добиените фракции 1 .
Референтни вредности (поврзани со лабораториите во земјата) - зависат од 2 години
Во случај на системот што одделува 6 фракции, се користат следниве референтни вредности:
Причини за одбивање на примерокот (поврзано со Централната лабораторија): примерок хемолизиран или не се чува на 2-8 ° C
Стабилност на примерокот (поврзана со Централната лабораторија): 10 дена на 2-8 ° C, 2 месеци на -20 ° C
Метод на работа (поврзано со Централната лабораторија): Електрофореза на капиларите во слободен раствор
Референтни вредности (поврзани со Централната лабораторија):
| Албумин | 58,9- 73,4 | 57,4- 71,4 | 57.4- 69 | 57,5- 67,7 | 57,1- 67,2 | 55,8 - 66,1 |
| Алфа-1 глобулин | 3.2- 11.7 | 3- 5 | 3.2- 5.4 | 3.3- 5.4 | 3.2- 4.9 | 2,9 - 4,9 |
| Алфа-2 глобулин | 10,6- 14 | 10,2- 16,1 | 10,7- 15,5 | 10- 14,8 | 8.9-13 | 7.1- 11.8 |
| Бета-1 глобулин | 4,8- 7,9 | 5,3- 6,9 | 5,6 - 7 | 5,2-7 | 5.1- 6.9 | 4,7- 7,2 |
| Бета-2 глобулин | 2.1- 3.3 | 2.1- 3.6 | 2,3- 3,5 | 2.6- 4.2 | 2.9- 5.2 | 3.2- 6.5 |
| Гама глобулин | 3,50- 9,7 | 4.2- 11 | 5,8- 12,1 | 7,7- 14,8 | 9,8- 16,9 | 11,1- 18,8 |
Интерпретација на резултатите 3
За да се олесни толкувањето на резултатите, ќе се опише секој од 5-те фракции со компонентните протеини: (види слика 8.1.2) 2
Намален серумски албумин (хипоалбуминемија) се јавува во различни патолошки состојби и има различни значења (неухранетост, малапсорпција, нефротски синдром, неоплазми). Зголемувања на албумин се јавуваат по дехидрација. Во посебни случаи, дополнителна лента се наоѓа во областа на миграција на албумин, поради некои генетски варијации без клиничка важност (алоалбуминемија и бисалбуминемија).
Зона 1 главно ја рефлектира серумската концентрација на алфа1-антитрипсин, така што намалувањето на оваа фракција се наоѓа во дефицит на алфа1-антитрипсин поврзан со одредени белодробни заболувања (емфизем со ран почеток) и црн дроб (неонатален хепатитис). Зголемувањата се бележат кај сите воспалителни реакции („реактант во акутна фаза“). Во ретки случаи, добивањето дополнителен широк опсег во оваа област може да сугерира присуство на алфа-фетопротеин.
Зона 2 се состои од 2 протеински компоненти: алфа2 макроглобулин и хаптоглобин.
Зголемен а2 се јавува кај акутни инфекции, акутен ревматоиден артритис, артеритис, нефротски синдром, дијабетес, неоплазми; намалувањето на оваа фракција може да се најде кај тежок акутен панкреатит, хепатоцелуларни лезии, дисеминирани синдроми на интраваскуларна коагулација, хемолитични анемии, мегалобластна анемија.
Зоната b се состои од 2 различни ленти: b1 што одговара на трансферин и b2 што ги вклучува фракциите на комплементите C3 и C4. Третата компонента на оваа зона е бета-липопротеин, чија лента може да се преклопи со онаа на трансферин или C3 или може да се наоѓа во зоната на бета-гама.
Нивото на глобулин во серумот се зголемува во анемија од дефицит на железо и билијарна цироза и се намалува кај автоимуни заболувања (СЛЕ), нефроза, заболување на црн дроб, неоплазми, акутни и хронични инфекции. Во некои случаи на мултипен миелом од типот IgA, може да се најде присуство на моноклонална компонента во оваа област.
Зона g Гама-глобулините се најважните глобулини. Оваа категорија вклучува имуноглобулини (IgG, IgA, IgM, IgD и IgE). Аномалиите претрпени од нив се преведени или со разни дефицити или со поликлонална или моноклонална хипергамаглобулинемија.
Процентот на г глобулини се намалува во агамаглобулинемија, хипогамаглобулинемија и нефротски синдроми. Хипогамаглобулинемијата може да биде вродена или стекната и лесно може да се открие со електрофореза во серумскиот протеин кога концентрациите на главните 3 класи на имуноглобулини се ниски (IgG, IgA и IgM). Присуството на хипогамаглобулинемија кај возрасни бара понатамошни испитувања со цел да се открие можна лимфопролиферативна болест (миелом со лесни ланци, хронична лимфоцитна леукемија, лимфоми).
Поликлонското зголемување на гамаглобулините укажува на хроничен имунолошки процес поврзан со заболување на црниот дроб (хроничен активен хепатитис, цироза), колагенска болест (СЛЕ, ревматоиден артритис), неоплазми (на пр. Хочкиновата болест), хронична миело-моноцитна леукемија. Во овие случаи, хипергамаглобулинемијата се должи на активирање на голем број клонови на плазма клетки кои ослободуваат имуноглобулини. Треба да се спомене карактеристичниот изглед на бета-гама "мост" алкохолна цироза, визуелизирана на гелот како интензивно обоена област помеѓу бета и гама зоните.
Понекогаш, во областа на гама, можете да видите некои мали, тесни ленти, наречени олигоклонални, кои се наоѓаат кај пациенти со хепатитис, болести на имунолошкиот комплекс, синдром на стекната имунодефициенција, ангиоимунобластичен лимфом.
Моноклоналните гамапатии вклучуваат голем број клинички и биолошки состојби кои обично се поврзани со малигни заболувања (мултипен миелом, болест на Валденструм, амилоидоза, лимфоми), но исто така и со некои бенигни состојби или дури и отсуство на патолошка промена (моноклонални гамапатии од неодредено значење). Во овие случаи, моноклоналната компонента (М-лента) е откриена на протеинска електрофореза, што резултира од пролиферација на еден клон на плазма клетки. На гелот, моноклоналните компоненти се појавуваат во форма на тесни, јасно дефинирани ленти, а по дензитометриското скенирање се добиваат карактеристични „врвови“, што може да се најдат насекаде помеѓу алфа и гама зоните, поради променливата електрофоретичка подвижност, најмногу но често во гама зоната.
Моноклоналните имуноглобулини се структурно и биохемиски хомогени, составени од еден вид лесен ланец (капа или ламбда). Комплетни имуноглобулини или само нивни под-единици (на пр. Лесни моноклонални ланци, наречени протеини Бенс-onesонс) може да се ослободат во циркулацијата. Присуството на моноклонална компонента ќе биде специфицирано на билтенот за финална анализа на пациентот, со препорака да се изврши електрофореза на протеински серум со имунофиксација 1-3 .
Табелата подолу ги сумира презентираните информации: