Фактор на некроза на тумор TNF-алфа - Синево
Информиранii општи и препораки за одредување на TNF-α
TNF (фактор на некроза на тумор) е проинфламаторно цитокин чие име произлегува од неговата способност да ги уништи клетките на туморот и да предизвика хеморагична некроза кај пресадените тумори на глувци. .
TNF-α (касектин) и TNF-β (лимфотоксин) првично беа опишани како цитотоксични фактори произведени од макрофаги и лимфоцити, соодветно; Последователно беше откриено дека TNF-α и TNF-β се два протеини кои покажуваат хомологија на 34% од аминокиселинските низи 3; 5. Двата медијатори дејствуваат на целните клетки преку истите рецептори и затоа имаат слични, но не и идентични биолошки ефекти.
Генот TNF-α се наоѓа на хромозомот 6. Под услови на денатурација, TNF-α е негликолизиран протеин од 17 kDa. Биолошки активната форма на TNF-α е тример. Покрај оваа растворлива форма, постои форма поврзана со мембрана (28 kDa), лоцирана на површината на клетките што произведуваат TNF-α и служи како базен за растворлива форма, генерирана од протеолитичко расцепување 3 .
TNF-α се произведува не само од макрофаги и моноцити, туку и од лимфоцити, мастоцити, неутрофили, кератиноцити, астроцити, микроглија, мазни мускулни клетки и некои туморски клеточни линии 5. Големи количини на TNF се ослободуваат при контакт на макрофаги, ЦД4 + Т лимфоцити и природни клетки убијци (НК) со липополисахариди, бактериски производи и интерлеукин 1 3 .
TNF-α делува директно преку два различни површински рецептори, наречени TNFR I и TNFR II, со различни молекуларни тежини 3; 4; 5. Овие рецептори можат да се идентификуваат на сите типови на клетки, освен на еритроцитите. Делови од овие рецептори се расцепуваат од протеази и достигнуваат до екстрацелуларниот медиум, формирајќи растворливи рецептори; тие дејствуваат како ендогени инхибитори на TNF-α и со тоа го регулираат нивото на екстрацелуларниот TNF-α 4 .
Врзувањето на TNF-α со рецепторот резултира со конформациони промени во структурата на рецепторот, што доведува до каскадна активација на транскрипција на други протеини вклучени во клеточната пролиферација, воспалителен одговор и клеточна апоптоза. TNF-α може да има локално паракрино дејство (локално зголемување на концентрацијата на TNF може да предизвика кардинални знаци на воспаление: црвенило, болка, топлина и оток) или може да дејствува од далечина, како ендокрини хормони 5. Поради присуството на неговите рецептори во повеќето ткива, TNF-α врши широк спектар на биолошки ефекти:
- цитолитички и цитостатски ефекти врз клетките на туморот;
- хемотактички ефект врз неутрофилите 3;
- ја зголемува пропустливоста на ендотелните клетки во регионот со воспаление; тие не само што предизвикуваат акумулација на имунолошки клетки, туку имаат влијание и врз процесот на коагулација;
- активира различни метаболички процеси во мускулните клетки и адипоцитите за да обезбеди енергија потребна за воспалителната реакција 1;
- кај макрофагите ја стимулира производството на фагоцитоза и простагландин Е2;
- инсулинска резистенција се зголемува во другите ткива;
- активира остеокласти, со што се стимулира ресорпција на коските;
- е фактор на раст кај фибробластите и ја стимулира синтезата на колагеназа;
- ја интензивира пролиферацијата на Т-лимфоцитите по стимулација со интерлеукин 2 3;
- предизвикува анорексија и треска, дејствувајќи како ендоген пироген 1;
- е одговорен за синдромот на кахексија поврзан со малигни процеси и повеќето паразитски наезда 5 .
Одредување на серумскиот TNF-α е маркер за системски инфламаторен одговор (SIRS) поврзан со сепса, траума и срцева слабост. Некои студии покажаа поврзаност на концентрацијата на TNF-α во цереброспиналната течност со степенот на активност кај мултиплекс склерозата; од друга страна, определувањето на TNF-α може да биде корисно во разликувањето на бактерискиот менингитис од другите причини за менингитис 1 .
Студии на животни покажаа дека TNF-α е вклучен во патогенезата на ревматоиден артритис и воспалително заболување на цревата поради неговиот проинфламаторно дејство со активирање на ендотелијалните клетки и индуцирање на неутрофилна хемотакса. Поради оваа причина, третманот на овие состојби исто така вклучува и инхибитори на TNF-α: или анти-TNF-α моноклонални антитела (инфликсимаб, адалимубаб) или фузиони протеини на рецептори на антитела, соодветно TNFRII-IgG1 (етанерцепт) 5 .
Нивоата на TNF-α може да се користат при дијагностицирање на имунолошки нарушувања и во следење на третманите, само во корелација со комплементарни клинички и параклинички податоци 2 .
Обука на пациентот - пост (на празен стомак) или после јадење 2 .
Примерок собрани - венска крв 2 .
Контејнер за берба - правосмукалка без антикоагуланс, со/без одвојувачки гел 2 .
Количината собрана - минимум 0,5 mL ser 2 .
Причини за одбивање на доказите - интензивно хемолизиран, жолтичен, липемичен или бактериски контаминиран примерок; примероци кои не пристигнале во лабораторијата замрзнати 2 .
Потребна е обработка по бербата - серумот се одделува со центрифугирање што е можно поскоро по целосното формирање на урдата, а примерокот веднаш се замрзнува на -20 ° C; примероците собрани надвор од лабораториските точки ќе бидат транспортирани до контејнерот наменет за замрзнати примероци 2 .
Стабилност на примерокот - серумот е стабилен 1 месец на -20 ° C; не одмрзнувајте/замрзнувајте 2 .
Метод Имунохемиски метод со детекција на хемилуминисценција (CLIA) 2 .
Референтни вредности 1 - 2 .
Интерпретација на резултатите
Зголемено ниво на TNF-α е забележано кај сепса, траума, автоимуни и хронични воспалителни болести (ревматоиден артритис, анкилозен спондилитис, Кронова болест, псоријаза), заразни болести и отфрлање на графтот 2 .