Имунолошка регулација со мукозни регулаторни Т-клетки Foxp3 позитивни кај деца и адолесценти
Имунолошка регулација преку мукозни регулаторни Т-клетки Foxp3 позитивни кај деца и адолесценти со целијачна болест Дисертација за академски степен Др. медицински на Медицинскиот факултет на Универзитетот во Лајпциг поднесено од: Мајкл Бауч роден на 24 април 1986 година во Карл-Маркс-Штад изработен на Клиниката и поликлиниката за деца и адолесценти на Универзитетот во Лајпциг Надзор: ПД Др. медицински хабил Holm H. Uhlig Одлука за доделување на докторска диплома од: 18.09.2012 година
Содржина Содржина Библиографски опис. 2 Содржина. 3 Список на кратенки. 5 1. Вовед. 6 1.1 Целијачна болест. 6 1.1.1 Епидемиологија. 6 1.1.2 Етиопатогенеза. 6 1.1.3 Дијагностика. 10 1.1.4 Терапија. 11 1.1.4.1 Диета без глутен. 11 1.1.4.2 Стратегии за експериментална терапија. 11 1.2 Регулаторни Т-клетки. 12 1.2.1 Видови регулаторни Т-клетки. 13 1.2.2 Механизми за сузбивање на Т-клетките на ЦД4 + ЦД25 + Фокс 3 +. 14 1.3 Цел на тезата. 17 2. Материјал и методи. 19 2.1 Етички глас. 19 2.2 Тек на студијата. 19 2.3 Регрутирање на популацијата од студијата. 20 2.3.1 Група пациенти со целијакија. 22 2.3.2 Контролна група. 22 2.4 Телефонско интервју Собирање анамнестички податоци. 23 2.5 Антропометриски податоци. 23 2.6 Клиничка хемија. 24 2.7 Целијачна болест - специфични антитела. 24 2.8 Боење на хистолошките делови. 25 2.8.1 Подготовка на примероци од ткиво. 25 2.8.2 Боење на хематоксилин-еозин (HE). 25 2.8.3 Имунохистохемиско боење. 26 2.8.4 Боење со имунофлуоресценција. 27 2.8.5 Микроскопија и фотографија. 28 2.9 Морфометриско мерење на хистолошките делови. 28 2.9.1 Мерење на ресички и крипти. 28 3
Листа на кратенки листа на кратенки БМИ индексот на телесна маса CD Кластер на диференцијација CTLA-4 цитотоксични Т лимфоцити поврзани антиген 4 Cy5 Cyanine 5 DAB 3,3-Diaminobenzidine DAPI 4,6-Diamidino-2-Phenylindole дихидрохлорид FITC Флуоресцеинската тиоцијанат Foxp3 Forkhead Сандаче Протеин 3 GAF3X глијадинот фузија на пептид HA хипо-алерген HE hematoxylin и еозин HLA човечки леукоцитите антиген HRP пероксидаза од рен пероксидаза од рен ИДО Indolamine-2,3-диоксигеназа IEL Интраепителните лимфоцити IgA/IgG имуноглобулин а или имуноглобулин G, IL IP интерлеукин-гама, interleukinopath, поли-глобулин G, IL-интерлеукин-ex, поли-глобулин-G, IL, поли-дис-dysopathulation ентеропатија Х-поврзан синдром ЛАГ-3 лимфоцитен антиген 3 MCV значи коркускуларен волумен (среден волумен на еритроцити) MHC Главен комплекс на хистокомпатибилност секвенца поврзана со полипептид MICA MHC класа I А рецептор на матрица на металопротеинази NKG2D рецептори на природни клетки убијци PBST фосфат со раствор на раствор на раствор Референтни единици SDS Standard Dev ција на оцена TBS Tris Buffered Saline TGF-β Transforming Growth Factor beta Th T helper cell (CD4 + CD3 + T клетки) TNFα фактор на некроза на туморот алфа 5
1. Вовед Оваа работа има за цел да ги испита следниве теми: 1. Група деца и адолесценти со целијачна болест треба да се карактеризираат клинички, параклинички, анамнестички и хистолошки. Особено, клеточните и хуморалните имунолошки маркери се споредуваат помеѓу групата пациенти со целијакија и група пациенти без целијачна болест. 2. Едниот фокус е на откривање и квантифицирање на Foxp3 + регулаторните Т-клетки во мукозата на тенкото црево кај деца и адолесценти со целијачна болест и контроли без атрофија на вили. 3. Целта е да се испита дали бројот на мукозни Foxp3 + регулаторни Т-клетки на местото на воспалението е во корелација со анамнестички, антропометриски, серолошки, хематолошки и хистолошки маркери кај пациенти со целијачна болест. Особено, треба да се испитаат зависноста од возраста и можните родови разлики во регулаторните Т-клетки. 18-ти
2. Материјал и методи Со цел да се соберат анамнестички податоци, беше извршено кратко интервју со родителите при првиот контакт. Веднаш штом ќе се добие писмена согласност, беа побарани архивирани примероци од тенкото црево од Институтот за патологија. Во исто време, ретроспективно беа снимени антропометриски, клинички, параклинички и серолошки податоци на секој пациент во времето на ендоскопија. Откако беа предадени примероците од ткивото, тие беа исечени, хистолошки обоени и оценети. Сите запишани параметри беа внесени во базата на податоци на Excel (Слика 2.1). Слика 2.1 Преглед на практичниот тек на студијата. 2.3 Вработување на популацијата од студијата Првично, контакт беше направен со родители на 195 деца и адолесценти. Целијачна болест е дијагностицирана кај 63 од овие пациенти. Целијакијата беше исклучена со биопсија кај 132 пациенти. Само 17 родители (8,7%) одбиле да учествуваат во студијата по првиот контакт. За конечно учество писмена согласност од 20-ти