Крвна група ОАБ (Бет Винсент, Симонин); Централна воена универзитетска болница д-р
Крвна група ОАБ (Бет Винсент, Симонин)
Генерални информации
Кај луѓето, идентификувани се 26 системи на крвна група со 228 антигени; крвна група се состои од еден или повеќе антигени управувани од еден ген или комплекс од два или повеќе тесно поврзани гени.
Исто така, идентификувани се и други антигени кои не биле доделени на утврдените системи. Еритроцитните антигени можат да бидат протеини, гликопротеини или гликолипиди. Повеќето се синтетизираат од еритроцитите, сепак некои антигени, како што се оние кои припаѓаат на системот Луис, се апсорбираат од плазмата на еритроцитната мембрана. Некои антигени се специфични за еритроцитите, додека други се наоѓаат на други клетки во телото. Познавањето на крвните групи е од суштинско значење за трансфузиона терапија. Така, индивидуите кои немаат одредени еритроцитни антигени можат да произведат алоантитела кога се изложени на крв што ги содржи овие антигени при трансфузија на крв или за време на бременоста. Антителата кои комуницираат со еритроцитните антигени создаваат непосредни или одложени реакции на хемолитична трансфузија и хемолитичко заболување на новороденчето.
Системот АБО крвна група е најважниот систем на крвна група затоа што: кога антигените не се изразуваат на површината на еритроцитите, соодветните антитела се секогаш присутни во плазмата, стимулите за производство на антитела се претставени со различни фактори на животната средина, како на пр. бактерии (на пр. E. coli), кои изразуваат на површинските структури скоро идентични со АБО јаглехидратите; антителата формирани претставуваат мешавина од IgM (претежно) и IgG, активна на 37ºC и способна да активира комплемент, а големата густина на антигени места на еритроцитната мембрана овозможува врзување на голем број антитела што водат, во случај на некомпатибилна трансфузија на крв во системот АБО, кај акутни реакции на хемолитична трансфузија.
Сите имунокомпетентни индивидуи произведуваат природни антитела (изоаглутинини или изохемолизини) кон антигените на групата АБО (H) што недостасуваат. Анти-А и анти-Б обично се забележуваат 3-6 месеци по раѓањето, а на 5-годишна возраст титарот на антителата го достигнува својот максимум и се одржува во текот на целата зрелост. Титарот на IgM антитела може постепено да се намалува со напредната возраст. Анти-А и анти-Б антитела се исто така присутни кај оние со слаби варијанти на А или Б. Новороденчињата обично немаат значителна количина на анти-А и анти-Б во плазмата, освен оние родени од алоимунизирани мајки, кај кои може да бидат присутни IgG антитела од мајката кои ја преминале плацентата. Антителата АБО не се главна причина за хемолитичко заболување кај новороденото дете поради инхибиција на антитела на растворливи А и/или Б супстанции присутни во крвта, како и А или Б антигени присутни на други клетки освен еритроцити; исто така, врзувачкиот афинитет на антителата кон молекулите на шеќерот е послаб од оној на антителата кон протеинските молекули, како што е антигенот Д4. Хемолиза е поверојатно ако мајката е група О, со детска група А2.
Препораки за одредување на крвна група АБО2
• пред трансфузија;
• пред инвазивна или хируршка процедура потенцијално поврзана со компликации на крварење што може да бараат трансфузија;
• антепартален и постнатален имунохематолошки мониторинг на мајка и дете;
• на дарители на крв;
• за компатибилност на групата АБО при трансплантација на бубрези и срце.
колекција
Обука на пациентот - не е потребна претходна обука; корисни информации за третмани со инфузија со макромолекуларни раствори извршени пред утврдување, трансфузии во последните 120 дена, заразни болести со Грам-негативни микроби со/без сепса, малигни заболувања (карцином, лимфом, миелом).
Примерок собрани - а) капиларна крв од пулпата на прстот; б) крв ќе дојде.
Контејнер за берба - б) правосмукалка без додатоци или активирачки гел (црвена или безбојна капа).
Количината собрана - б) онолку колку што дозволува вакуумот.
Причини за одбивање на доказите - силно хемолизиран примерок.
Стабилност на тестот - тестот се изведува веднаш, ако тоа не е можно, примерокот се чува 48 часа на 2-8 ° C.
Потребна е обработка по бербата - по целосна коагулација на собна температура, серумот и тромбот се отстрануваат. Од преостанатите црвени крвни клетки, 10% суспензија се подготвува во сопствената плазма или во солена вода. За методот на аглутинација на картички, се подготвува суспензија од 5% црвени крвни клетки во специјален медиум за суспензија.
Метод
Метод на определување - во лабораториите во Синево се изведува директен/глобуларен метод (Бет-Винсент) за да се утврди крвната група АБО со употреба на анти-А, анти-Б и анти-АБ серуми, со следниве варијанти:
- хемаглутинација на плочата3. Се користат две контроли: контролна АБ (црвени крвни клетки на пациентот со АБ серум) и автоматска контрола (црвени крвни клетки и сопствен серум).
- да се утврди аглутинација и гел-филтрација на микротубени картички што содржат гел импрегниран со антиген специфичен реагенс за еритроцити (мурни или хумани моноклонални антитела) - директен тест за групирање АБО и одредување на Ag RH1 (D) и Ag RH 1, 2.3 (ДЦЕ).
Граници и пречки
Резултатот од утврдувањето на крвната група мора да го прочитаат две лица и на крајот мора да биде потврден на втор примерок од крв.
За методот на аглутинација на картичката, позитивната реакција се потврдува само ако контролната микротрева е негативна. Позитивната реакција се цени во зависност од големината на аглутинатите од + до ++++.
Грешки во читањето поради технички грешки:
- валкани стакларија; бактериска контаминација;
- присуство на микро-ознаки (лажна аглутинација);
- не е забележано: пропорции на еритроцити/серум, редослед на капење на серуми за испитување на крв (контрадикторна аглутинација), време на читање - доцна читање: суви рабови (лажна аглутинација), рано читање (недостаток на аглутинација или слаба аглутинација).
Грешки поради црвени крвни клетки
Лажни аглутинатори
а) Присуство на ролки (псевдоаглутинација): употреба на макромолекуларни раствори (Декстран, ХЕС), нарушувања на коагулацијата, нецелосно коагулирани примероци на крв, хиперфибриногенемија, производи за деградација на фибрин, фибринолитички агенси, диспротеинемија, парапротеинемија, криоглобулинемија, зголемен крвен притисок, високи нивоа на хепарин, протамин сулфат), ревматоидни фактори, зголемен холестерол, билирубин, леукоцитоза, леукоцитни ензими2. Контролата на AB е позитивна; миењето на еритроцитите овозможува правилно извршување на топчестиот примерок.
б) Самоаглутинација
• Присуство на ладни аглутинини (светлината на автомобилот е позитивна). Примерокот на крв и реагенсите се предикубираат на 37ºC, а тестот се изведува топло.
• Црвени крвни клетки опфатени со алоантитела: новороденче од некомпатибилна бременост (во Rh системот, ABO),
пациентот трансфузиран со некомпатибилна крв.
• Одредување на крвна група на крв собрана од папочната врвца: Wелатин од Вартон, макромолекуларна супстанца што ги опкружува еритроцитите, дава изглед на псевдоаглутинати. За да се отстрани, потребно е да се мијат еритроцитите најмалку 6 пати пред да се утврди.
• Присуство на имуни комплекси на лекови.
в) полиглутинација
Кај септикемии со Грам-негативни бацили, криптоантигените (Т) се изложени на ензимско дејство на бактериски агенси, препознаени од антитела (анти-Т) присутни во повеќето човечки серуми2. Сведокот АБ е позитивен.
Отсутна или слаба аглутинација или појава на двојно население: аглутинацијата не е тотална, со присуство на слободни црвени крвни клетки (аглутинатите се појавуваат на розова позадина):
• стара крв;
• слаби антигени: новороденчиња, предвремено родени;
• слаби подгрупи А или Б;
• слабеење на антигени (кај леукемии, лимфоми, Хочкинова болест);
• пациент со трансфузија на група А или Б со крв од група О, мајчино-фетално крварење;
• присуство на голема количина на супстанција А или Б во плазмата (карцином на желудник, панкреас) што ги неутрализира тестните антитела (црвените крвни клетки мора да се мијат за да се отстранат);
• присуство на химера или мозаик (исклучително, на пр. Постмедуларна алографт).