Лексикон за биологија на електрофореза на СДС; Форум за биологија
билуфи
рептил
Здраво!
Морам да напишам извештај за мојата електрофореза на СДС и треба да вклучам краток теоретски дел. Напишав нешто сега, но не сум сигурен дали можеш така. Дали некој има искуство и може да прочита за тоа?
Електрофорезата на СДС е метод на одвојување на протеините што се базира на нивните различни моларни маси.
SDS значи натриум додецил сулфат (натриум дудецил сулфат) и е анјонски детергентен молекул со голема не-поларна и мала поларна група.
Во случај на протеин, неполарниот калкул е насочен навнатре, а поларната област е нанадвор. СДС се врзува за протеинот така што протеините во примерокот се негативно наелектризирани поради ремоделирање. Сдс-протеинските комплекси потоа мигрираат на позитивниот пол во електричното поле.
Електрофорезата се одвива во гел од полиакриламид. Ова содржи пори поради што се одвојува протеините. Поголемите протеини прво треба да ги оттргнат порите за да се дифузираат низ гелот. Ова трае подолго, така што ќе се појави поделба на големината на честичките.
По одвојувањето, протеините може да се обојат со сино Coomassie директно во гелот.
Јас би бил благодарен за конструктивната критика,
Модератор
билуфи
рептил
Да во ред. Значи, работата за „формирање“ е навистина глупава. „Надворешниот“ беше всушност поврзан со „негативно наполнетиот“.
Но, тогаш ќе го сменам тоа.
Дали „односот на полнење“ е фиксен термин?
Подобро е на овој начин:
Во случај на протеин, неполарниот калкул е насочен навнатре, а поларната област нанадвор. Протеините се денатурираат и СДС се врзува за нив, така што протеините во примерокот се негативно наелектризирани во иста мера.
Модератор
билуфи
рептил
Торстен 1978 година
рептил
Имав објаснување на темата „формирање“, „денатурација“ и „сооднос маса/полнеж“, што според мене е сосема разбирливо. Можев да го сумирам со свои зборови, но објаснувањето во книгата на Фридрих Лотспејх „Биоаналитик“ го наоѓам многу добро. Затоа, во овој момент целата работа како цитат:
"SDS е анјонски детергент и го покрива внатрешниот полнеж на протеините толку ефикасно што мицелите со постојан негативен полнеж по единица маса се создаваат со приближно 1,4 g SDS на g протеин. За време на подготовката на примерокот, примероците со вишок на SDS се загреваат до 95 ° C се загрева и терцијарните и секундарните структури се раствораат со разделување на водородните врски и истегнување на молекулите.Сулфурните мостови помеѓу цистеините се разделуваат со додавање на редуцирачко соединение на тиол, на пример ß-меркаптоетанол или дитиотреитол.Истегнатите аминокиселински ланци натоварени со СДС формираат елипсоиди. "