Мускулна дистрофија на DuchenneBecker (бришење на бришење на МЛПП) - Синево
Генерални информации
Дистрофинопатиите вклучуваат спектар на мускулни болести предизвикани од мутации на генот ДМД кој кодира дистрофин. Клиничките форми на болеста имаат променлива тежина и покажуваат пренос поврзан со Х хромозомот; најблаги фенотипови вклучуваат асимптоматско зголемување на активноста на серумскиот креатин киназа, грчеви во мускулите придружени со миоглобинурија и изолирана миопатија на квадрицепси; на спротивниот пол се наоѓаат прогресивни мускулни нарушувања класифицирани во две широки категории: Мускулна дистрофија на Душен/Бекер, кога главно се зафатени скелетните мускули и проширена кардиомиопатија поврзана со мутации на ДМД, кога срцевата штета е во првите редови 1 .
Во 1986 година Кункел го идентификуваше генот на мускулната дистрофија на Душен како локализиран во опсегот Xp21 и со тоа го потврди начинот на Х-поврзано пренесување на болеста.
Мускулната дистрофија на Бекер има преваленца од 24 случаи на 1 милион и исто така има пренос поврзан со хромозомот Х.Фенотипот е генериран од генетски мутации различни од оние кои се вклучени во Дученовата болест, но засегнатиот ген е чест (ДМД). Дистрофијата на Бекер започнува клинички на постара возраст и има побавен клинички тек. Имобилизација во инвалидска количка се јавува по 20-годишна возраст; Иако оштетувањето на скелетните мускули е помалку сериозно отколку кај Душен-овата болест, срцевата слабост предизвикана од проширена кардиомиопатија е главна причина за морбидитет и морталитет.
Како резултат на Х-поврзано пренесување, и болеста Душен и болеста Бекер се јавуваат скоро исклучиво кај момчињата. Многу ретко, жените со мутации на ДМД развиваат фенотип Душен/Бекер како резултат на случајно деактивирање на незасегнатиот Х-хромозом, асоцијација на Тарнеровиот синдром (X0) или еднопарентска дисомија. Така, во повеќето случаи жените се асимптоматски, а две третини од нив покажуваат зголемување на активноста на креатин киназата 4 .
Проширената кардиомиопатија поврзана со мутации на генот ДМД се карактеризира со дилатација на левата комора и конгестивна срцева слабост. Кај мажите, болеста започнува клинички на возраст од 20 до 40 години и има брза смртоносна еволуција, додека кај жените има подоцнежен почеток и побавна прогресија. Знаците и симптомите на оштетување на скелетните мускули обично се отсутни.
ДМД е единствениот ген поврзан со дистрофинопатии. Тестовите за молекуларна биологија кои откриваат мутации на ДМД можат да дијагностицираат дистрофија на Душен или Бекер во повеќето случаи без потреба од мускулна биопсија. Теоретски, сите машки пациенти со Душенова дистрофија и најмалку 85% од оние со Бетрова дистрофија имаат идентификувани мутации на ДМД. Бројот на пациенти со проширена кардиомиопатија и идентификувани ДМД мутации е непознат. Во останатите случаи, потврдата на клиничките податоци со семејната историја, нивото на серумскиот креатин киназа, мускулната биопсија и анализата на дистрофинот ја потврдуваат дијагнозата 1 .
ДМД е најголемиот ген идентификуван во човечкиот геном; се состои од 79 егзони и има висока стапка на мутација; се изразува главно во скелетните, мазните и срцевите мускули. Кодираниот протеин - дистрофин - е вклучен во механичката врска помеѓу екстрацелуларната матрица и клеточниот цитоскелет. Во отсуство на дистрофин, интегритетот на сарколемата е засегнат и стабилноста на мускулното влакно е нарушена. Како што се зголемува подложноста на механички повреди, мускулните влакна ќе бидат подложени на повторени циклуси на некроза и регенерација со евентуално исцрпување на регенеративниот капацитет. Мутациите на ДМД кои предизвикуваат или целосно отсуство на дистрофин или производство на скратен протеин се поврзани со фенотипот на Душен. Од друга страна, мутациите што влијаат на средниот регион на генот ќе генерираат пократок протеин кој ги зачувува неговите карбокси- и аминотерминални домени, а со тоа и неговата функционалност; тие се поврзани со бекотискиот фенотип 2; 4 .
Големите бришења кои вклучуваат еден или повеќе егзони се одговорни за приближно 59% од случаите на Душеновата болест и 65% од случаите на дистрофија на Бекер. Мутациите што предизвикуваат предвремено појавување на стоп кодон се наоѓаат во 15% од случаите, а дупликациите во 5% од случаите; во останатите случаи има мутации на рамката за читање, вметнувања/бришење, мутации на местото на спојување, како и мутации на промашување.
Иако скоро сите случаи на Душена или Бекерова дистрофија се пренесуваат Х-поврзани, во една третина од случаите нема семејна историја, де муто мутации. Гонадалниот мозаицизам е одговорен за приближно 20% од новите случаи на мускулна дистрофија на Душен 4 .
Ризикот од заболување од браќа и сестри на заболеното лице зависи од статусот на носител на мајката. Поради Х-поврзано пренесување на дистрофинопатии, жени со 50% ризик да пренесат мутација на ДМД при секоја бременост. Синовите кои ја наследуваат мутацијата секогаш ќе бидат засегнати, додека ќерките кои ја наследуваат мутацијата ќе бидат носители и може да развијат кардиомиопатија или не.
Обично мажјаците со Душенова дистрофија умираат пред репродуктивната возраст, додека мажите со фенотип Бекер можат да се размножуваат, така што сите нивни ќерки ќе ја наследат мутацијата што предизвикува болест и нивните синови нема да бидат погодени.
Тетките на мајката на заболеното лице, како и нивните деца, можат да бидат изложени на зголемен ризик да се разболат или да станат носители во зависност од полот, семејните односи и статусот носител на мајката.
Aената со заболен син и друг родено родени во мајка се бара да биде хетерозиготна за мутација на ДМД.
Aена со повеќе од еден заболен син и негативна семејна историја има или мутација на герминативната линија (мутација на ДМД што предизвикува болест е присутна во сите нејзини клетки) или гонадален мозаицизам (присутен е мозаицизам за мутација на ДМД што предизвикува болест). само во микробната линија).
Ако детето со состојба на Душен/Бекер е единствениот засегнат член на семејството, треба да се земат предвид неколку можности поврзани со статусот на носител на мајката:
а) погодениот син има де ново мутација што произлегла од:
б) мајката има де ново мутација; околу две третини од мајки на момчиња со дистрофија на Душен/Бекер и без семејна историја носат мутации на ДМД; механизмите со кои се појавуваат de novo мутации кај мајката се како што следува:
в) мајката наследила мутација од:
Генетското тестирање во комбинација со анализата на врската честопати може да го утврди потеклото на де ново мутација. Оваа анализа е важна за идентификување на семејната гранка која е изложена на зголемен ризик од дистрофинопатија 1 .
Развиени се неколку техники на молекуларна биологија за откривање на мутации на генот ДМД во примероци од периферна крв, вклучително:
-
мултиплекс PCR за откривање на бришење (стапка на откривање)
95%);
Техниката МЛПА за генот ДМД бара два различни типа на реакции поради големиот број на егзони. Една реакција вклучува мешавина од сонди наречени PO34 кои покриваат егзони 1-10, 21-30, 41-50 и 61-70. Втората реакција содржи мешавина од сонди наречена PO35 која опфаќа анализа на егзоните 11-20, 31-40, 51-60 и 71-79. Студиите покажуваат дека оваа техника што ги „скенира“ сите 79 егзони на генот ДМД истовремено за присуство на бришење/удвојување е корисна дијагностичка алатка и за погодените машки и за женски носители 2; 5 .
Препораки за генетско тестирање
- потврда за дијагнозата на дистрофијата на Душен/Бекер кај заболените лица;
- тестирање роднини со висок ризик за идентификување на жени превозници; идеално е да се идентификува однапред мутација што предизвикува болест во семејството;
- пренатална дијагноза кај високо ризични бремени жени за мутација на ДМД; се изведува со анализа на ДНК извлечена од фетални клетки добиена со амниоцентеза, обично изведена на околу 15-18 недели од бременоста или биопсија на хорионски ресички, на околу 10-12 недела од бременоста; мутациите што ја предизвикуваат болеста мора да се идентификуваат пред пренаталното тестирање 1, 3, 4 .
Примерок собрани - крвта ќе дојде 3 .
Контејнер за берба - вакутаин кој содржи ЕДТА како антикоагуланс 3 .
Количината собрана - 5 ml крв 3 .
Причини за одбивање да се обиде - употреба на хепарин како антикоагуланс; коагулирани или хемолизирани примероци 3 .
Стабилност на тестот - 7 дена на 2-8ºC 3 .
Начини - анализа на бришење/удвојување на МПЛП 3 .
Известување и толкување на резултатите
Бришењата/удвојувањата откриени во генот ДМД и нивната поврзаност со фенотипот Душен/Бекер ќе бидат соопштени според податоците од литературата 3 .
Идентификувањето на мутација која предизвикува болест кај маж со сугестивна клиничка слика и покачени нивоа на ЦК ја потврдува дијагнозата. Фенотипите на Душен/Бекер најдобро корелираат со степенот на експресија на дистрофин што се одредува според рамката на читање на гласникот РНК добиена од мутантниот алел. Така, многу големи бришења може да доведат до отсуство на експресија на дистрофин; исто така, некои бришења и удвојувања можат да ја променат рамката на читање и да предизвикаат производство на сериозно скратен протеин кој е поврзан со фенотипот на Душен. Фенотипот Бекер се развива кога се одржува одредено производство на дистрофин, што делумно ја зачувува неговата функција; во овие случаи станува збор за бришење или удвојување што споредува некои егзони на ниво на рамката за читање.
Во семејства каде засегнатиот маж има познато бришење или удвојување на ДМД, оваа промена се бара и кај роднини со висок ризик. Отсуството на промена го исклучува статусот на превозникот. Идентификацијата на мутација на ДМД го потврдува статусот на носител; Бидејќи жените се изложени на зголемен ризик од развој на кардиомиопатија, се препорачува целосна проценка на срцето најмалку еднаш на секои 5 години по возраст од 25-30 години 1 .
Граници и мешање
Негативен резултат за мутација на ДМД на тестот МЛПА не ја исклучува дијагнозата кај луѓе со сугестивна клиничка слика. Со оглед на тоа дека пунктиформните мутации се вклучени во 25-30% од случаите на мускулна дистрофија на Душен-Бекер, се препорачува комплетно секвенционирање на генот ДМД.
Во семејства каде што мутацијата на ДМД е непозната, да се добие негативен резултат на МЛПА тест за жени со висок ризик не исклучува статус на носител. Присуството на позитивна семејна историја бара секвенционирање на целиот ген 1, 3, 4 .