Поглавје VII Патолошка деградација на ’рскавицата и’ рскавицата - PDF Бесплатно преземање
Поглавје VII: Патолошка деградација на 'рскавицата и' рскавицата - Што припаѓа на „ревматизмот“ - Како го дијагностицирате ревматизмот? - Како го замислувате механизмот? - Кои клетки се вклучени? Биофизичка хемија на 'рскавицата 197
Каква врска има „артритисот“? "Артритис": "Артс" = зглоб + "итис" = воспаление Артритис = воспаление на зглобовите Системски лупус еритематозус спондилоартроза (болести на пршлени/'рбет) Спондилитис од псоријаза (анкилозен спондилитис) Рајтеров синдром Артритис гихт ревматоиден (д) артритис остеоартритис повеќе сите други болести заедно! Биофизичка хемија на 'рскавицата 198
Воспалителни болести на зглобовите - артритис - 'рскавица на зглобовите (васкуларна бесплатна) Курс преку туника синовијалис (кожа на' рскавица) Артритис = синовијатитис Нарушување на лачењето и составот на синовијата Последици/карактеристики: Зглобни изливи Формирање гној Уништување/функционално ограничување на 'рскавицата Акутен ревматоиден артритис Траење на болеста) Гранулом на Ашоф: Мешавина на големи клетки на сврзното ткиво, леукоцити и плазма клетки Биофизичка хемија на 'рскавицата 199
Ревматоиден артритис (Хроничен полиартритис) Хронична болест со непозната подмолност со акутни релапси Околу 70% од пациентите се жени,
6% деца Етиологија Прво појавување на болеста помеѓу 40 и 60 години Автоимуна болест (многу веројатно!) А) Шема на уништување на зглобната 'рскавица кај ревматоиден артритис со напад на воспаление на коските и зглобниот простор. б) Коскена анкилоза на лакотниот зглоб Имиграција на гранулоцити во заедничкиот простор Многу често се јавува заедно со ревматизам на меките ткива Биофизичка хемија на 'рскавицата 200
Ревматоиден (а) Артритис (РА) Кој страда од тоа? Приближно 40 милиони Американци ги имаат првите знаци на РА; ова одговара на околу 15% од вкупното население и се зголемува! 2.6 милиони се акутно погодени Околу 75% од погодените се жени Екстремно високи трошоци за лекување Што предизвикува РА? Точната причина сè уште е нејасна! Веројатно: автоимуна болест! Претежно погодени зглобови (на пр. Лактите, колената, рамената) Болеста може да влијае и на меките ткива и органи (претежно срцето и белите дробови) Симптоми на РА и дијагноза? Симптомите варираат од пациент до пациент! "Симетрична" појава на болка во двете раце или колена; погодените зглобови се чувствуваат жешко! "Вкочанетост" во погодените зглобови (особено по станување) Општо: слабост, замор, треска и губење на тежината Болеста може брзо да исчезне (дури и без третман) и да се врати само по години Дијагностички критериуми: крв (ревматоидни фактори, Ц-реактивен протеин), Пункција (број на леукоцити); Х-зраци или МНР биофизичка хемија на 'рскавицата 203
Критериумите „АРА“ АРА = Американска асоцијација за ревматизам Следниве критериуми се користат за дијагностицирање. „Ревматизам“ се дијагностицира ако се дадат најмалку 7 од следниве критериуми (симптоми по најмалку 6 недели): Утринска вкочанетост најмалку 1 час Погодени се три или повеќе зглобови. Симптоми кај барем еден од големите зглобови (колено, лакт). „Симетричен“ артритис, односно поплаки во истите области на различни зглобови „ревматоидни нодули“ се препознаваат Доказ за ревматоидни фактори во серумот Радиолошки препознатливи промени во голем зглоб И во Германија, сега постојат големи ревматоидни центри за истражување и особено за статистичко снимање на болеста Биофизичка хемија на 'рскавицата 204
Ова се радиолошки критериуми. Фаза I (според Штајнброкер): радиологија во рана фаза: недостаток на деструктивни промени на зглобовите на рентген, но знаци на мала остеопороза Клинички: оток на зглобот и задебелување на зглобната капсула, но нема деформитет на зглобот Функција: целосно функционална Радиолошка фаза II: умерено напредна фаза Задолжително: радиолошки открива остеопороза со или без лесна 'рскавица и уништување на зглобот. Клинички: Нема деформитети на зглобовите, но почетно ограничување на подвижноста на зглобовите. Промени на мекото ткиво, како на пр Ревматоидни нодули Функција: Со исклучок на мал хендикеп на еден или повеќе зглобови, сепак добра подвижност. Радиолошка фаза III: Напредна фаза. Изразено уништување на 'рскавицата и коските. Клинички: деформации на зглобовите, изразена мускулна атрофија. Вообичаено се присутни екстра-артикуларни лезии на меките ткива и ревматски нодули Функција: Работливоста е строго ограничена. Самопомош честопати недоволна Радиолошка фаза IV: завршна фаза влакнеста или коскена анкилоза на зглобовите. Функција: Претежно целосно оневозможено, кревет или лифт. Самопомош без обука практично е исклучена Биофизичка хемија на 'рскавицата 205
РА и ОА се јасно различни болести Мускулна "Абразија на 'рскавица" Коска Бурса Синовијална мембрана Синовијална течност Тетива' рскавица Артикуларна капсула Простор на коските Намалување Отечена, воспалена синовијална мембрана Нормален зглоб Остеоартритис Ревматоиден артритис (полиартритис) Биофизичка хемија на 'рскавицата 206
Кај ревматски заболувања, нарушени се односите помеѓу метаболичките патишта што се градат и се распаѓаат. Anabol: Структура; Катаболна: Кратенки на деградација: IGF, инсулин-фактор на раст TGF, трансформирачки фактор на раст BMP, коскено морфогенетски протеин CDMP, морфогенетски протеин ИЛ-рскавица, интерлеукин TNF, фактор на некроза на тумор, фактор на инхибиција на леукемија, биофизичка хемија на 'рскавицата 207
Ревматизмот е дефинитивно „автоимуна болест“ Кратенки: АГ, антиген АК, антитело ИГ, имуноглобулин ПГ, простагландин Нормален зглоб Синовитис Уништен зглоб Биофизичка хемија на рскавицата 208
Кои клетки се наоѓаат во крвта на (здрави) луѓе? Ткиво и течност 92% крв 8% вкупна крв (волумен) крвни клетки 46% крвна плазма 54% клеточни компоненти (број/мл) плазма еритроцити
500 10 7 тромбоцити 25 до 30 10 7 леукоцити 0,5-1 1 10 7 леукоцити вода 92% ензими, липиди, анорг. Соли, витамини, хормони, итн. Протеини 7% Протеини Моноцити 2 до 8% Лимфоцити 20 до 40% Базофили G2, G4 IgG1, G3> G2, G4 IgA IgG-Опсонини LTB 4 C5a PAF хистамин fmlp Вол. Активност фагоцитоза АДЦВ активирање на специјални рецептори Биофизичка хемија на 'рскавицата 211
Важни компоненти на гранулите на неутрофилните гранулоцитни гранули: Микроскопски детектирани „гранули“ во клетките на пр. во „гранулоцитите“. Локации на складирање на различни протеини! Примарни гранули (azurophile, пероксидаза позитивни гранули) киселина хидролаза Лизозим катепсин B, D неутрален протеинази chloroacetate естераза катепсин G β-glucosaminidase еластаза β-галактозидаза протеиназа 3 β-glucoronidase бактериски пропустливост-α-mannosidase зголемување на протеиназа оксидаза α-mannosidase-defensic оксидаза Heloposidase !) Специфични гранули (секундарни гранули) колагеназа (ММП-8) аполактоферин лизозим кобаламин врзувачки протеин C5a-расцепувачки протеински плазминоген активатор цитохром б рецептори за fmlp CR3 ламинински терцијарни гранули (желатиназа позитивни гранули) желатиназа (MMP-9) CR рецептори за fml 1 CR 3 CR 45 секреторни везикули албумин цитохром b рецептори на алкална фосфатаза за fmlp CR 1 CR 2 биофизичка хемија на 'рскавицата 212
Изолација на неутрофилни гранулоцити од човечка крв кај здрави донатори 2 ml хепарин (100 IU/ml) на 20 ml крв донатор 2 ml декстран на 22 ml крв хепарин Седиментација на еритроцити 30-60 минути декстран што се врзува за гликокаликс на еритроцити Светло суперината (
2 ml) исклучена пипета со раствор на Ficoll (
2 ml) подлога за раствор на Ficoll-Hypaque. 3 Густина = 1,078 g/cm центрифугирање на градиент на густина на 15 C, 1000 вртежи во минута, 25 мин. Отфрлете го супернатантот додека плаките не бидат „бели“ (2 до 4 x). Исплакнете и инкубирајте 1 минута. Наполнете ги цевките со HBSS-1. Центрифугирање. Клеточна лиза на еритроцитите. Застанување на лизата на 15 C, 1000 вртежи во минута, 10 мин. Исплакнете бели плаки со 1 ml HBSS-1. Број на клетки на неутрофили. Се чува на 4 C. Биофизичка хемија на 'рскавицата 213
Можни нокси во изолацијата на неутрофилните гранулоцити Декстран (полисахарид) личи на липополисахариди Грам-негативни бактерии Контакт на клетки-клетки ++ Лепливост на површини +++. Хепарин како антикоагуланс. Стрес на смолкнување при пипетирање + осмотски стрес при лизирање на еритроцитите ++ Контакт на неутрофили со остатоци од клетки, мембрани, протеини, липиди Механички стрес при центрифугирање на градиент на густина Влијание на температура +++ ++ +++ Зголемување на рецепторите за интегрин и FcIII Зголемување на рецепторите за ЦН1 Неутрофилите се многу чувствителни клетки! Тие не можат да се одгледуваат во културата како и многу други клетки! Бидејќи тие треба постојано да бидат изолирани од крв од донатори, флуктуациите се многу големи! Биофизичка хемија на 'рскавицата 214
Две убави слики за неутрофилите: површина на неутрофилите амеобиди движење на неутрофил (во позадина еритроцит) биофизичка хемија на 'рскавицата 215
Препознавање и деградација на микроорганизмите од страна на PMNs in vivo неактивни PMNs кои вршат PMNs маргинација приврзана PMNs посткапиларна венула диапедеза неактивен ендотел АКТИВИРАЕ PMNs дополнуваат системска специфична имунолошка одбрана ендотелијална пропустливост активна опсонизација CHEMOTAXIS PRIMING позитивни повратни информации медијатори
Неутрофили Granuloyzten и други клетки плурипотентни матични клетки миелоидни матични клетки лимфоидни матични клетки мегакариоцити прогенитор еритроидни претходници миелобласт Mono Blast мегакариоцити еритробласти промиелоцитични промоноцити претходник Т-клетки претходници Б клетки тромбоцити лимфоцити микроакцифили ламфоцити ламцитрофити басцитрофили микромалични клетки на 'рскавицата 217
Процеси на оштетување на 'рскавицата кај ревматски заболувања Иако голем број на различни клетки (на пример, хондроцити, Т-клетки, фибробласти) можат да бидат одговорни за оштетување на' рскавицата, ние сме на мислење дека неутрофилите играат огромна улога! Неактивна клетка стимулирана неутрафилна дегранулација јадро на Ca 2+ Ca 2+ NADPH оксидаза ROS NADPH оксидаза ROS ROS гранули NADPH оксидаза O 2 _ MPO ОХ ензими MPO H 2 O 2 1 O 2 HOCl миелопероксидаза матрикс металопротеинази еластаза сиосилазема инсуластична инсулазива инсуластична инсулазива инсуластична инсулазива Активирање на 'рскавицата О 2 преку рецептори врзани за мембрана Фаголизозом Оксидативна активност Супероксид анјонски радикали Водород пероксид Хидроксилни радикали Пероксинитрит Единствен кислород Хипохлорна киселина Биофизичка хемија на' рскавицата
Важни својства на металопротеиназите на матрицата (на пр. Колагеназа, желатиназа) Металопротеинази на матрицата ММП (сличности) исто семејство на гени (12 претставници, 4 класи) голема сличност во секвенцата на аминокиселини Zn 2+ (содржи), Ca 2+ (зависни) ендопептидази градат најмалку компонента на ECM (вонклеточна матрица) се лачи во латентна форма (зимоген, проензим) Активирање за протеолитичка активност: HOCl, ATG, APMA, серински протеази Механизмот за активирање се нарекува „цистеин прекинувач“ дискутирани Задачи: миграција на клетки, развој, ремоделирање на коските, Регулирање на патолошки протеини: оштетување на ткивото, раст на тумор, метастази Биофизичка хемија на 'рскавицата 219
SDS-PAGE и зимографија за утврдување на ММП-активности.Биофизичка хемија на 'рскавицата 220
Формирање на реактивни видови кислород (ROS) и хипохлорна киселина (HOCl) O 2 NADPH оксидаза O 2 _ SOD Fe/Cu H 2 O 2 MPO HOCl NADPH NADP 1 OH O 2 миелопероксидаза (MPO) реакции природен MPO (Fe 3+) HOCl _ HO O 2 _ „Каталаза“ Cl _ комплекс _ III (Fe 3+ O 2) „Оксипероксидаза“ (нестабилна) Намалување за O 2 _, аскорбинска киселина, малку уреа H 2 O 2 многу комплекс I (Fe 3+ H 2 O 2) “ хлорирачки пероксид "(многу нестабилна) аеробна оксидација на NADH комплекс II (Fe 2+ H 2 O 2)" неактивна форма "_ (без оксидација на Cl) MPO е релативно тежок" ензим "! Биофизичка хемија на 'рскавицата 221
Еден можен пристап во терапијата со ревматизам: Инхибиција на TNF-α: TNF-α TNF-α TNF-α активирање на неутрофили во синовијалната течност Ензими на хипохлорна киселина Распаѓање на синовијалната течност Миграција на гранулоцити на неутрофили од крвотокот во заеднички простор „Со посредство на неутрофили“ Разградување на 'рскавицата TNF-α TNF-α "Адхезија" на клетките на површината на' рскавицата Ензими на хипохлорна киселина Уништување на зглобната 'рскавица TNF-α Блокирање на TNF-α значително го ослабува воспалението Првите лекови се во клиничко тестирање (на пр. Енбрел) Но: Овој третман е исклучително скап (
20 000 ДМ по пациент!) Биофизичка хемија на 'рскавицата 222