Прочистување на моноклонални антитела SpringerLink

Резиме

Имуноглобулин од серумот на глувчето што носи асцит, влегол во асцит на тумор, може да симулира реактивност на mAb со антиген против кој глушецот претходно бил имунизиран природно. Во пракса, ова е од особено значење кога mAb е присутен во течноста асцит во мала концентрација или има само мал афинитет за неговиот антиген и затоа не може да се користи при големи разредувања. Серумски примерок од глувчето, кој е добиен пред инјектирање на клетките на хибридома, може да се користи како контрола во вакви случаи.

Во случај на директно обележување (на пример, со биотин, пероксидаза или флуорохром) на недоволно чист препарат на mAb, дополнителни протеини (на пример, инсулин или трансферин, итн.) Исто така може да бидат обележани. Ако сега се користи антитело, на пр., За да се испитаат клетките за изразување на антигенот што го препознава моноклоналното антитело, клетките што имаат рецептори за контаминирачки протеин (на пр. Рецептори за трансферин) исто така може да бидат обележани.

Посебни потешкотии се јавуваат при користење на подготовка на mAbs во системите за биолошко тестирање. Очекуваната активност на антителото може да се промени со контаминирање на имунолошкиот медијатор. Бидејќи многу од овие имунолошки медијатори сè уште не се доволно добро дефинирани, не може да се исклучи дека тие се уште се присутни во препаратот дури и откако антителото е внимателно прочистено. Во такви случаи, антитело од истата подкласа на имуноглобулин, кое не реагира со предметниот антиген, но потекнува од истата фузија и е подготвено и прочистено под исти услови, може да послужи како контролно антитело.

---