Развој на метод LCMSMS за анализа на агенси за заштита на поларните култури и нивни

Вајенстефан научен центар за исхрана, употреба на земјиште и животна средина Факултет за биолошки науки Оддел за еколошка хемија и анализа на животната средина Технички универзитет во Минхен Развој на метод LC/MS/MS за анализа на поларни активни состојки во пестициди и нивни метаболити во собрани култури Моника Елена Пантиру Комплетна копија од Центарот за наука Факултет Вајенстефан за исхрана, употреба на земјиште и животна средина на Техничкиот универзитет во Минхен за да се добие академска диплома на доктор по природни науки одобрена дисертација. Претседавач-испитувач на дисертацијата Унив.-Проф. Д-р рер. нат хабил В. Хубер 1. Унив.-Проф. Д-р рер. нат Д-р Х. в (РО) А. Кетруп 2 унив.-Проф. Д-р рер. нат Д-р агр. Хабил. Дисертацијата е доставена до Техничкиот универзитет во Минхен на 4 мај 2004 година и прифатена од Вајенстефан научен центар за исхрана, употреба на земјиште и животна средина на 21 јули 2004 година.

развој

Признанија Оваа работа е создадена помеѓу октомври 2001 година и јули 2004 година на Институтот за еколошка хемија, Центар за истражување на ГСФ за животна средина и здравје. Би сакал да се заблагодарам на германската служба за академска размена за финансирање. Проф. Д-р Х. в Антониус Кетруп Ви благодарам многу за интересната тема, добрите можности за работа во институтот, како и за неговата добронамерна поддршка во секој поглед. Д-р Мојата посебна благодарност упатувам на Дитер Мартенс за добриот надзор над работата, научната дискусија, постојаната подготвеност за помош, различните подржувања, внимателната корекција на ова дело и неговата радост во наставата. Д-р Би сакал да му се заблагодарам на Патрик Бон за советот, тековните дискусии и многу добрата соработка. Особено, би сакал да им се заблагодарам на г-ѓа Вера Мејер и г-дин Стефан Форстер за нивната активна поддршка во обработката на примероците и добрата соработка. Карин Фишер, д-р. Јута Линтелман, д-р. Георг Матушек, д-р. Особено би сакал да им се заблагодарам на Вилибалд Кам, Агнес Фекете и Дариуш Антковијак за одличната работна атмосфера.

Содржина 1 Вовед. 1 2 Цели на работата. 5 3 Тековна состојба на истражување и теоретски принципи. 6 3.1 Развој на мулти-методи. 6 3.2 Чекори во низа во класичниот мулти-метод за анализа на пестициди. 7 3.2.1 Подготовка на примерок. 7 3.2.2 Екстракција. 7 3.2.3 Прочистување. 10 3.2.4 Инструментална анализа. 16 3.2.4.1 Хроматографски методи. 16 3.2.4.2 други методи на определување. 21 3.3 Масена спектрометрија. 23 3.3.1 Техники на спојување. 23 3.3.1.1 ESI. 24 3.3.1.2 APCI. 24 3.3.1.3 APPI. 25 3.3.2 Системи за анализатор на маси. 26 3.3.2.1 Забрзување. 27 3.3.2.2 Спектрометар на маса. 27 3.3.2.3 Растворање. 30 3.3.3 MS/MS. 31 3.4 Матрични ефекти кај ЛК/МС. 33 4 Материјали и методи. 36 4.1 Користени уреди. 36 4.2 Користени материјали. 38 4.3 Статистички и математички методи. 43 4.3.1 Статистички методи. 43 4.3.2 Математички методи. 44 4.4 Дополнителни информации. 45 5 резултати. 46 5.1 Раздвојување и откривање. 46 5.1.1 Оптимизирање на јонизацијата. 47

5.1.2 Определување на најинтензивни јони на родители и ќерки и оптимизација на параметрите за откривање зависни од супстанции. 48 5.1.3 Избор на извор на јонизација (споредба ESI-APCI). 52 5.1.4 HPLC метод. 59 5.1.4.1 Прелиминарни тестови со HPLC-DAD. 59 5.1.4.2 Елуенти. 60 5.1.4.3 Колони за одделување. 61 5.1.4.4 градиенти на HPLC. 62 5.1.4.5 Прозорец за скенирање. 66 5.1.5 Зголемување на чувствителноста. 67 5.1.5.1 Споредба на модификаторите. 67 5.1.5.2 Волумени на инјекции. 68 5.1.6 Карактеристики на инструменталната анализа. 68 5.1.6.1 Одредување на границата на откривање и границата на квантификација. 68 5.1.6.2 Функции за калибрација. 70 5.1.6.3 Прецизен тест на методот LC/MS/MS. 72 5.2 Оптимизирање на екстракцијата. 73 5.2.1 Прелиминарни тестови. 73 5.2.2 Влијание на вредноста на ph. 73 5.2.3 Растворувачи. 74 5.2.4 Извлекување матрици со многу маснотии. 77 5.2.5 Извлекување на суви матрици. 82 5.3 Прочистување на екстрактите. 84 5.3.1 Прочистување на екстрактите од ацетон. 85 5.3.1.1 Прочистување на GPC. 85 5.3.1.2 Тестирање на различни цврсти фази за прочистување на екстрактот. 87 5.3.1.3 Влијание на матрицата. 90 5.3.2 Прочистување на екстрактите од метанол. 93 5.3.2.1 ChemElut (хидроматрикс). 93 5.3.2.2 Оаза ХЛБ. 96 5.3.2.3 EnviCarb. 97 5.3.2.4 Chromabond-HRP. 98 5.3.2.5 Ефикасност на HRP цврстата фаза за прочистување на екстракти од примероци. 99 5.3.2.6 Споредба на ChemElut и HRP. 105

5.3.3 Прочистување на екстракти од ацетонитрил. 109 5.3.3.1 C18. 109 5.3.4 Експерименти со Oasis MCX. 112 5.4 Истражувања за намалување или избегнување на ефектите од матрицата. 114 5.4.1 Влијанија на матрицата. 114 5.4.2 Чистење на екстракт. 116 5.4.2.1 Споредба на GPC, Hydromatrix и SPE. 116 5.4.2.2 Споредба на растворувачи за екстракција. 118 5.4.2.3 матрици со многу маснотии. 119 5.4.3 Квантификација со употреба на надворешни стандарди. 120 5.4.4 Квантификација со употреба на стандарди означени како изотопи. 121 5.4.5 Квантификација со употреба на матрични стандарди. 123 5.5 Валидација на методот. 125 5.5.1 Спецификација на методот. 125 5.5.2 Аналитички параметри и статистичка проценка. 128 5.5.2.1 Ограничувања на определување и празни вредности. 128 5.5.2.2 Стапки на обновување и повторливост. 130 6 Резиме. 141 7 Изгледи. 143 8 Библиографија. 144 9 Додаток. 157