Тестирање на цревниот микробиом - Р.
Овој тест е дизајниран од Даниела заедно со д-р и научник Татјана Мијатовиќ од лабораториите Р.Е.Д. од Белгија. Целта е комплетна и комплексна анализа на состојбата на цревата и микроорганизмите што го населуваат.
Сè е во врска со цревата
- MSA (дисбиоза)
- Зонулин (пропустливо црево)
- sIgA (цревен имунитет/цревно воспаление)
- EDN/EPX (хронично цревно воспаление)
- Воспалителни маркери на цревата (ФОБ, Калпротектин, Трансферин, Лактоферин)
- Инфекции (тестови во 3-та колона од табелата)
- Во цената не се вклучени трошоците за испорака
- Тестовите се прават во Белгија
- Се препорачува како прв тест
Следење на цревата
- MSA (дисбиоза)
- sIgA (цревен имунитет/цревно воспаление)
- Воспалителни маркери на цревата (ФОБ, Калпротектин, Трансферин, Лактоферин)
- Додадете дали тие се подигнати при првата анализа:
- Зона (пропустливо црево): +100 €
- Инфекции: само позитивни при прва анализа (видете подолу за цените)
инфекции
- Криптоспоридиум/Giardia Ag: 42 €
- HPYL (Helicobacter Pylori Ag): 35 €
- SALMO (салмонела Spp. Ag): 35 €
- ЛИСТА (Listeria monocitog. Ag): 35 €
- АДЕНОВ (аденовирус Ag): 35 €
- ШИГ (Shigella spp. Ag): 35 €
- ЕНТЕРОВ (Enterovirus Ag): 40 €
- ХеПА (вирус на хепатитис А Аг): 40 €
- EntaHIST (Entamoeba histol Ag): 35 €
- CampBact (Campylobacter Ag): 35 €
- ЈЕРСИ (Yersinia enteroc. Ag): 42 €
- ClostCOMBO (Clostridium difficile Ag GDH, токсин А + Б): 60 €
Опис на анализите
НОРМАЛНА ФУНКЦИЈА НА Гастроинтестиналниот тракт
Гастроинтестиналниот тракт е едно од најголемите интерфејси помеѓу внатрешната средина на човекот и надворешниот свет. Неговата функција е да ги вари и апсорбира основните хранливи материи обезбедени од храната. Во исто време, тој обезбедува бариера што спречува опасни по здравјето молекули да поминат низ цревната лигавица и во системската циркулација.
Цревната дисфункција во моментов се смета за фактор што придонесува за многу хронични болести, како што се алергии, автоимуни нарушувања, воспалителни нарушувања и дегенеративни болести.
Цревната микрофлора е екосистем со висок степен на сложеност. Микрофлората не само што игра суштинска улога во варењето и апсорпцијата на хранливите материи, во синтезата на витамини и масни киселини, во детоксикацијата на проголтаните хемикалии, туку и во регулирањето на имунолошкиот систем. Промените во составот на микрофлората можат да имаат сериозни последици по здравјето на домаќинот. Често нарушување на функцијата на дебелото црево е дисбиозата. Ова е пролиферација на патогени бактерии во цревата. Цревниот човечки цревен тракт кај возрасните се проценува дека е домаќин на до 50 различни родови бактерии, што претставува над 500 различни видови.
ЦЕЛНА ПЕРЕНИЛНОСТ: ПЕРЕНТЕН ЦИНТЕН СИНДРОМ
Здравата цревна лигавица нормално апсорбира мали молекули кои произлегуваат од целосно варење. Цревните клетки содржат специјализирани транспортни протеини, кои пренесуваат хранливи материи низ цревниот wallид и во крвта. Поголемите молекули нема да бидат транспортирани од овие системи и нормално се чуваат во внатрешноста на цревата затоа што клетките на цревната лигавица се групирани заедно. Синдромот на пропустливо црево (LGS) е состојба во која се намалува способноста на цревниот wallид да држи настрана големи и несакани молекули. Кога ќе се прошират просторите помеѓу клетките на цревниот expandид, макромолекулите, антигените и токсините ќе стигнат до крвта.
Голем број на фактори може да доведат до пропустливо црево:
- Компоненти на храната: ферментација на одредени компоненти на храна (протеини, рафинирани јаглехидрати) доведува до потенцијално штетни готови производи: амонијак, амини, феноли, сулфиди ... овие соединенија го намалуваат животот на мукозните клетки. Адитиви во храната, алкохол, кофеин го иритираат цревниот wallид.
- Цревна дисбиоза: производството на токсични соединенија со ферментација зависи и од видот на бактериите присутни во цревата. Во случај на дисбиоза, преголемите патогени бактерии произведуваат токсини и соединенија кои се многу штетни за цревните клетки. На пример, намалувањето на сулфатните бактерии произведува токсичен водород сулфид.
- Алергии и нетолеранција на храна: нетолеранција кон одредена храна (лактоза can) може да доведе до штетно воспаление на цревата.
- Хроничен стрес: покрај промовирањето на дисбиозата, стресот го намалува протокот на крв во цревата, оставајќи го невозможно да се поправи. Стресот, исто така, предизвикува контракција на клетките на дебелото црево, што доведува до поголеми простори помеѓу клетките.
Последиците од пропустливото црево
Изменетата пропустливост на цревниот wallид може да има многу штетни ефекти, вклучително:
ИНРИТИБИРАЧКИ СИНДРОМ ОД КОЛОН (SCI)
Меѓу патологиите кои се развиваат како резултат на цревна дисбиоза и пропустливо црево, најчеста е веројатно синдромот на нервозно дебело црево (IBS). SCI се карактеризира со абдоминална болка или непријатност, заедно со знаци на дисфункција на цревата, најчесто дијареја и/или запек. Тековните бројки сугерираат дека 10-20% од населението може да страдаат од оваа болест. SCI се смета за резултат на неправилно и хронично активирање на мукозниот имунолошки систем. Причините за оваа активација не се јасни, болеста е веројатно мултифакториелна. Факторите што можат да играат улога во SCI вклучуваат:
Регулирање на имунолошката функција во цревата:
- 80% од нашите имунолошки клетки се наоѓаат во цревата
- Лимфоидното ткиво поврзано со гастроинтестиналниот тракт (ГАЛТ) се шири долж цревната лигавица (плакети на Пејер во тенкото црево, лимфоидни фоликули во дебелото црево) и содржи 80% од имуните клетки на организмот.
- Овие имуни клетки постојано комуницираат со микроорганизмите поврзани со слузницата (бактерии, вируси…)
- Одржана е деликатна рамнотежа помеѓу толеранцијата кон цревни антигени (намалување на воспалението,…) и одбрана од патогени (производство на дефенсини,…).
Нерамнотежата на цревниот имунитет влијае на целото тело:
- Интегритетот на интестиналната бариера е од суштинско значење: зголемената мукозна пропустливост предизвикува системска ендотоксемија (ниско хронично воспаление) и абнормални имунолошки реакции на цревни антигени.
- Интеракции на флората домаќин/црево: микробната флора на цревата игра голема улога во одржувањето на здравјето на домаќинот, но може да биде под влијание на абнормалното функционирање на имунитетот на домаќинот.
Промените во флората на цревата во моментов се сметаат дека придонесуваат за многу хронични болести, како што се алергии, автоимуни и воспалителни нарушувања или дегенеративни болести.
Голем број фактори, како што се употребата на антибиотици, стрес, одредени диететски компоненти, можат да имаат штетно влијание врз цревната микрофлора. Вишокот патогени бактерии доведува до производство на токсични бактериски соединенија (како што се ендотоксини) кои се апсорбираат во крвта и предизвикуваат абнормално активирање на имунитетот.
Воспалението на цревата, што може да биде резултат на нетолеранција на храна или алергии, доведува до зголемена пропустливост на цревниот wallид („пропустливо црево“), олеснувајќи го преминувањето на бактериските соединенија во крвта.
Аутизам и гастроинтестинално воспаление:
- Неколку извештаи укажуваат на голема преваленца на гастроинтестинални симптоми, воспаленија и дисфункција кај деца со аутизам (прегледано од Хорват и Перман, Curr Gastroenterol Rep 2002).
- Лесни до умерени степени на воспаление се забележани и во горниот и во долниот цревен тракт. Кај деца со нарушувања на аутистичниот спектар, присуството на дисфункција на ГИ честопати се поврзува со зголемена раздразливост, напади на бес, агресивно однесување и нарушувања на спиењето (прегледано од Критфилд и сор., Гастроентерол Рес практика. 2011).
Клучната функција на sIgA е да се поврзе со микроорганизмите што напаѓаат и токсините и да ги зароби во мукозниот слој или епителните клетки, со што се инхибира подвижноста на микробите, аглутинираат организмите и се неутрализираат нивните егзотоксини и потоа се помага да се отстранат безопасно од телото во изметот. SIgA исто така ја „обележува“ храната како прифатлива, така што ниската sIgA доведува до зголемена чувствителност на храната.
Концентрацијата на sIgA ни дава информации за цревната имунолошка одбрана:
Недостаток на sIgA укажува на намалување на активноста на цревниот имунолошки систем
Зголемените нивоа на sIgA укажуваат на воспаление на цревата.
Хемоглобин: евакуирани со измет кај гастроинтестинални хеморагични заболувања
трансферин: компонента добиена од крв; добар маркер за гастроинтестинално крварење
калпротектин: неутрофилен цитозолен протеин со антимикробни својства, кој е присутен во високи концентрации во изметот за време на воспаление на цревата
лактоферин: гликопротеинска компонента на секундарни гранули на неутрофили ослободени од фекални леукоцити; може да послужи како маркер на воспаление во цревата.
Овој имунохроматографски тест се изведува на измет и дава квалитативен одговор (позитивен/негативен).
Зоната е „портал“ за пропустливо црево. Зонинот ги отвора просторите помеѓу клетките на цревната обвивка. Ова нормално се случува за хранливи материи и други молекули да влезат и да излезат од цревата. Меѓутоа, кога е присутно пропустливото црево, просторите помеѓу клетките се отвораат премногу, дозволувајќи им на поголемите протеински молекули да влезат во крвотокот, каде што може да се појави имунолошка реакција. Исто така, може да предизвика цревна содржина, како што се бактериите, да истекува во имунолошкиот систем, предизвикувајќи воспаление. Како што се зголемува нивото на зоулин, заптивката помеѓу цревните клетки се намалува, отворајќи простори помеѓу клетките што им овозможуваат на сите видови работи да навлезат внатре. Ова се нарекува "пропустливо црево". Зонулин е единствениот физиолошки модулатор на досега опишаните тесни меѓуклеточни крстосници, кој е вклучен во трговијата со макромолекули, а со тоа и во рамнотежата на толеранција/имунолошки одговор.
Анализа на EPX/EDN ELISA во примероци на измет (EPX/EDN)
Акумулацијата на невротоксинот (ЕДН) добиен од еозинофил е поврзана со воспаление и оштетување на ткивото. Мерењето на фецесот ЕДН може да послужи како објективен параметар за хронично клиничко или субклиничко воспаление присутно во областа на гастроинтестиналниот тракт.
Фекалната ЕДН се смета за најдобра од цитотоксичните грануларни протеини за проценка на воспаление на цревата, бидејќи најдобро ги рефлектира клиничките, ендоскопските и хистолошките резултати на активноста на болеста и мукозните лезии.
Зголемените нивоа на ЕДН на фецесот се поврзани со неколку воспалителни состојби, како што се алергија/чувствителност на храна, патогени инфекции (Ц. дифицил и Х. пилори), ИБС, еозинофилни гастроинтестинални нарушувања.
Евалуација на инфекции кај примероци од измет
Имунохроматографските тестови се засноваат на имунолошкиот навлегување на обоен колоид кога тој поминува низ мембраната. Антитело или антиген беше имобилизиран на оваа мембрана. Откривањето на можна инфекција е брзо и лесно, бидејќи не вклучува култивирање на столицата. Следниве анализи се достапни:
- C/PARAS Cryptosporidium/Giardia Ag
- HPYL Helicobacter Pylori Ag
- SHIG Shigella spp
- АДЕНОВ Аденовирус Аг
- ПСАЛМ Салмонела Спп. Аг
- ЛИСТА Listeria monocytogenes Ag
- ЕНТЕРОВ Ентеровирус Аг
- ХеПА вирус на хепатитис А, Ag
- EntaHIST Entamoeba histolytica
- CampBact Campylobacter Ag
- ЈЕРСИ Јерсинија ентероколитика
- Токсини CLOSTRICombo Clostridium difficile
- ТУЛАРНА Туларемија (Францисела туларенсис)
Цревната микрофлора (интестинален микробиом) може да се смета за постнатален стекнат орган. Составен од широк спектар на бактериски клетки, има различни функции за домаќинот. Микрофлората има значајна улога во созревањето на цревата, интегритетот на цревата, спречување на патогена и опортунистичка бактериска колонизација,… Исто така, го модулира имунолошкиот систем. Микрофлората е исто така вклучена во синтезата на витамини, производството на масни киселини со краток ланец и метаболизмот на канцерогените.
Микробиомот придонесува за обработка и метаболизам на храната:
- варење и апсорпција на хранливи материи
- синтеза на масни киселини со краток ланец (на пр. синтеза на Фаекалибактериум бутират, Роузурија… е важна за здравјето на дебелото црево… но дава многу енергија -> дебелина)
- синтеза на аминокиселини и витамини (витамин Б12, витамин Б9, витамин К)
- детоксикација на загадувачи и токсични молекули присутни во храната
Иако цревната флора е стабилна со текот на времето, голем број фактори можат да ја нарушат нормалната рамнотежа и на тој начин да доведат до цревна дисбиоза. Цревната микрофлора може да се менува со имунолошки механизми на домаќинот, статус на редокс, адренална функција, цревна pH, исхрана на домаќинот, возраст на домаќин, лекови, егзогени организми и емоционален стрес.
Цревната дисбиоза може да се забележи кај голем број хронични заболувања, како што се Кронова болест, SCI, CFS и може да биде поврзана со атопични и развојни нарушувања како што се аутизам и АДХД.
До неодамна, истражувањето за составот на микробиотата се засноваше скоро исклучиво на културата, и покрај фактот дека:
- 40-80% од цревните бактерии не можат да се култивираат
- Идентификувањето колонии може да биде тешко
- Бактериите мора да бидат живи: проучувањето на анаеробни патогени е многу тешко, големи загуби при собирање и обработка на примероци
- Пристапот кон културата може да анализира само мал дел од сите видови бактерии (10%?)
- коли за кој се сметаше дека е доминантен вид, е малолетен член
Цревната флора и гастроинтестиналниот статус кај деца со аутизам се во корелација со сериозноста на аутизмот:
- Адамс и сор. (BMC Gastroenterology 2011) објави дека симптомите на гастроинтестиналниот тракт се силно поврзани со сериозноста на аутизмот. Од четирите типа на корисни бактерии кои биле испитани, децата со аутизам имале многу пониско ниво на бифидобактериум (-45%), малку пониско ниво на ентерококус (-16%) и многу поголемо ниво на лактобацил (+ 100%).
- Фајнголд и сор. (Anaerobe 2010) објави дека кај фецесот кај контролните деца, Firmicutes е присутен кај 63,6% од вкупната флора, но само 38-39% од фекалната флора кај деца со аутизам. Бактероидите сочинуваат 30% од контролната фелорна флора и 51% од фекалната флора кај деца со аутизам. Актинобактериите сочинуваат 1,8% од фекалната флора кај контролните деца и помеѓу 0,4 и 0,7% од флората кај децата со аутизам. Протеобактериите сочинуваат 0,5% од флората кај контролните деца и помеѓу 2,3 и 3,1% од флората кај децата со аутизам. Како заклучок, фекалната флора кај деца со аутизам беше статистички значително различна од онаа на здравите деца.
Дисбиоза кај синдром на хроничен замор (CFS):
- Често нарушување на цревната функција е дисбиоза, односно размножување на патогени бактерии во цревата.
- Неколку објавени студии сугерираат дека CFS е поврзан со дисбиоза
- Анализите базирани на култура открија покачени нивоа на Streptococcus и Enterococcus spp.Во примероци од фецес кај пациенти со ME/CFS [Sheedy et al., In Vivo 2009]
- Додаток на пробиотик (L. casei во една студија, L. paracasei + L. acidophilus + B. lactis во друга студија) доведе до подобрување на емоционалните симптоми и неврокогнитивните функции [Rao et al., Gut Pathog 2009; Саливан и сор., Нутр Ј 2009].
Во лабораториите R.E.D., развивме нова постапка за анализа на културите на бактериите во примерок од столицата (објавено од Фремонт и сор., Anaerobe 2013). Оваа најсовремена постапка се базира на 16-секундно засилување на PCR, проследено со брза секвенца. Дава сеопфатен преглед на сите видови бактерии, вклучувајќи ги и оние кои не можат да се анализираат со традиционалните техники на култура.
Нашата фетална метагеномска анализа обезбедува целосна слика за популацијата на бактериите во примерокот на столицата, вклучувајќи аероби, анаероби и бактериски видови кои не можат да се анализираат со традиционалните техники на култура.
Интерес и можни апликации:
- Лесна постапка за собирање, примероците можат да се стабилизираат: лесен пристап до пациентите
- Голем број на апликации: аутизам, хронични инфекции, CFS, разни цревни заболувања, дебелина, алергии, рак
- Може да следи терапевтски интервенции: пре- или пробиотици, антибиотици, растителни екстракти, промени во исхраната