Универзитет за ветеринарна медицина во Хановер - PDF бесплатно преземање
1 Универзитет за ветеринарна медицина во Хановер Истражувања за содржината на растворлив фосфор во супернатантот на суспендирана, инкубирана храна за свињи - Пристапи кон порафинирана P-проценка - ИНВАГУРАЛНА ДИСЕРСТАЦИЈА за да се добие диплома доктор на ветеринарна медицина - докторски лекари ветеринари - (д-р лекар. Ветер.) претставена од Денис Марсел Пол Брауншвајг Хановер 2015 година
2 Научен надзор: Унив.-Проф. Д-р J. Kamphues Institute for Animal исхрана 1. Рецензент: Унив.-Проф. Д-р J. Kamphues 2-ри рецензент: Унив.-Проф. Д-р П.Стајнберг ден на устен испит: 12.05.2015 г.
6 СОДРИНА Содржина Содржина 1 Вовед Литература Важноста на одгледувањето свињи во Германија Фосфор при хранење свињи Важноста и регулацијата на метаболизмот Р барање, апсорпција и екскреција Посебни карактеристики на фитин Р и сопствени фитази Важноста на додадени фитази во хранењето свињи Сварлив или достапен фосфор? Недостаток на П и вишок на П Општи барања за исхрана на свињи Прасиња Гоење на свињи Маторици за размножување свињи одгледување Материјал и методи Цел на тестот/преглед Материјал за храна за храна Материјална храна Методи Лабораториски тестови Подготовка на примероци Анализи на хранливи материи Статиска евалуација Резултати Идентификација на методот. 39
7 СОДРИНА Прелиминарен експеримент Прелиминарен експеримент Прелиминарен експеримент Определување на методологијата за одредување на растворлив во вода фосфор H 2 O растворлив P во единечен FM на 90 мин. Време на инкубација H 2 O растворлив P во единечен FM по термички третман, т.е. по инактивација на какви било присутни фитази H 2 О-растворлив P во единечен FM на различни температури на инкубација и под влијание на фитаза H2O-растворлив фосфор во целосна храна за свињи, растворлив во HCl фосфор во добиточна храна (инкубација во 0,35% HCl) фосфор растворлив во HCl во фосфати за храна HCl- Фосфор растворлив или растворлив во H2O во сложена храна за свињи Дискусија Критика на методологијата Поставување тест и прелиминарни тестови Лабораториски тестови Број на примероци што се користат Дискусија за резултатите Споредба на резултатите од сопствената единечна храна на фосфорот растворлив во H 2 O и HCl со литературни податоци 2 О-и HCl растворлив фосфор за храна со свинско соединение со датум на литература n Заклучоци Резиме Резиме Библиографија
8 СОДРИНА 9 Додаток Табела Додаток
9 СПИСОК НА КРАТКИ Список на кратенки на стандардното отстапување на регистрираната трговска марка AF Complete feed AP alkaline phosphatase ATP adenosine triphosphate AfBN Комитет за стандарди BFS бактериска ферментирана супстанца BSE говеда спонгиформна енцефалопатија, на пример, или, соодветно, во однос на приближно. . ден (ден) DCP дикалциум фосфат DE германска благородна свиња DFP дефлуориран фосфат d. Х. тоа е DL Deutsche Landrasse Du Duroc ES Extraktionsschrot et al. et alii (и други) итн. и сл. евентуално ЕУ
10 СПИСОК НА АБРЕВИЈАЦИИ Фа. Компанија FM Futtermittel FTU Phytase Activity (Англиска единица за фитаза) GfE Друштво за нутриционистичка физиологија, доколку е потребно, доколку е потребно, нискочасовни часови HClsP растворливи во хлороводородна киселина P (растворлив во HCl P) hgr. високо уредуван Уредник i. д. вкл. ID ест (т.е.) вклучително вклучително k pf KM LM LMZ LWK MCP MDCP ME ME m MF MgP mgr. мин MW n Делумна ефикасност на МЕ за внесување на енергија во протеини плус маснотии Телесна маса Во живо маса Зголемување на масата во живо Земјоделска комора Монокалциум фосфат Монодикалциум фосфат engl. Енергија што може да се метаболизира (енергија што може да се конвертира) Барање за зачувување на МЕ соединение за храна магнезиум фосфат средна оценка на минута средна вредност број n. N. Не се забележува бр.
11 СПИСОК НА АБРЕВИЈАЦИИ n. Погледнете статистички незначајни NSP не-скробни полисахариди n. И не е испитано погоре горенаведениот орган. Органски p Значење (веројатност за грешка) Pi Pietrain r Коефициент на корелација Ra Суров пепел ОИЕ Оброк од репка Rp Суров протеин S. Page Sc. Знак за јадење за екстракција на соја од стрептококус СЕС. значително т.н. т.н. Видови TS сува материја U Единица u. А. меѓу другото и од оригиналната супстанца под одредени околности а особено Здружението на VDLUFA на германски земјоделски испитувања и истражувачки институти различни различни vp сварлив фосфор наспроти WK пченични трици
12 СПИСОК НА АБРЕВИЈАЦИИ w.s.p engl. растворлив во вода P (растворлив во вода фосфор) на пр. B. на пример лимонска киселина z. Некои хемиски елементи се скратени според правилата на меѓународната номенклатура (IUPAC).
23 СКИПСТВИ влијанието врз коските (во споредба со изогенската пченка). HEMME (2004) објаснува дека додавањето на фитаза во добиточната храна ги намали комплексните својства на фитатот во однос на елементи во трагови, аминокиселини, скроб и липиди и со тоа ја зголеми сварливоста на овие компоненти. Преглед на вкупната активност на P, фитин-P и фитаза во различни компоненти на добиточната храна е даден од GODOY et al. (2005) во следнава табела: Табела 2: Содржина на вкупната активност на P, фитин-P и фитаза на избраните права гасови (n = 5; според GODOY et al. 2005). Вкупен компонента P [%] Фитин-P [%] Фитин-P% [v. Вкупно дејство на P] фитаза. [U/kg ДМ] Gито и нуспроизводи Wheито 0,33 0, пченка 0,25 0, ориз 0,12 0, сорго 0,26 0, пченични трици 0,92 0, грубо обезмастено садници од пченка и 0,66 0, кора Ситно обезмастено расад од пченка и 1,21 0, кора од пиварско жито 1,22 0, оризови трици 1,57 1, маслени семиња и нуспроизводи памучно семе 0,64 0, соја ES 0,57 0, памук ES 1,34 0, палмино масло ES 0,51 0, кокос ES 0,43 0,
35 SCHRIFTTUM прасиња Препораките на GfE (2006) за одгледување прасиња во врска со ME (MJ/d) и сварливиот фосфор (vp) се прикажани подолу. Следниве претпоставки се направени: ME m (MJ/d) = 0,55 LM kg 0,75, содржината на протеини во зголемувањето на LM е константна на 170 g/kg и содржината на маснотии во зголемувањето на LM се зголемува од 110 g/kg ( 10kg LM) до 170 g/kg (30 kg LM). Делумната ефикасност на МЕ за енергетски пристап во протеини плус маснотии (k pf) е дадена како 0,70. Препорачаните вредности за сварливиот фосфор (vp g/d) се дадени во загради под оние со конвертибилна енергија. Таб. 3: Препораки за снабдување со ME (MJ/d) и vp (g/d) во одгледување прасиња (според GfE 2006). LMZ [g/d] LM [kg], 9 1) (0,6) 4,1 (1,1) 5,2 (1,6) 4,3 (0,6) 5,5 (1,2 ) 6,7 (1,7) 7,9 (2,2) 9,1 (2,7) 8,0 (1,7) 9,3 (2,3) 10,6 (2,8) 11, 8 (3.3) 1) без загради = МЕ (МЈ/г); со загради = vp (g/d) 9,3 (1,8) 10,6 (2,3) 12,0 (2,8) 13,3 (3,4) 14,7 (3,9) 11, 9 (2,4) 13,4 (2,9) 14,8 (3,4) 16,2 (4,0) 17,7 (4,5) 13,2 (2,5) 14,7 (3,0) 16,2 (3,5) 17,7 (4,0) 19,3 (4,5) 23
39 SCHRIFTTUM Таб. 7: Препораки за нега на бремени маторици со ME (MJ/d) и vp (g/d) (според GfE 2006). Број на гестација Услов на UOM загуба на LM за време на лактацијата: 0 kg LM при покривање на [kg] UU вкупен [MJ/d] во мала тежина UOM вкупно [MJ/d] загуба на LM многу бремена за време на лактацијата: 10 kg LM при покривање [kg] Вкупно UOM [MJ/d] мала тежина Вкупно UOM [MJ/d] голема тежина LM загуба за време на лактацијата: 20 kg LM при парење [kg] UU вкупно [MJ/d] мала тежина UOM вкупно [MJ/d] голема тежина vp услов Фосфор за сварливост во фаза на бременост [g/d] Ниско носење 4,0 1,9 2,4 2,7 високо носење 6,2 6,6 6,9 6,9 период
40 СКИРФТТУМ Беа направени следниве претпоставки: - ME m: 0,44 MJ/kg LM 0,75 и ден (просечен LM во соодветната фаза) - дневен пристап за раст што сè уште се одвива кај бремени маторици: 2,4 g P - зголемување на мајката рамномерно распоредено во целото време - енергија во производи за зачнување: 1 (ниско-носечки) или 2,5 MJ/d (високи) - задржување на енергијата во млечната жлезда: 1 MJ/d (само високо-носечки) - искористување на ME за идејни производи: 50% - Енергетска содржина во добивката на мајката: 12 MJ/kg - искористување на ME за добивка на мајката: 70%. VFT (2009) покажува два целосна храна за бремени маторици (специјална храна за бремени маторици со 0,41 g P/MJ ME и стандардна храна за бремени маторици со 0,45 g P/MJ ME), обете со максимум Содржина од 12,4 MJ ME/kg (белешка за намалувањето на бруто содржината на P: околу 1 g/kg или 0,08 g/mJ ME кога се додава фитаза, како кај прасињата и свињите гоење, видете погоре). Препораките на GfE (2006) за лаички маторици во врска со МЕ (МЈ/г) се прикажани подолу: 28
41 СКИРФТТУМ Таб. 8: Препораки за набавка на лаички маторици со ME MJ/d (времетраење на цицање 25 d; според GfE 2006). Зголемување на легло [kg/d] 1,5 2.0 1,5 2,02,0,0,0,0,0,0 LM загуба [kg] LM на почетокот на лактацијата [kg] Следното јазиче 9 од GfE (2006) во врска со препораките за сварлив фосфор (g/d) за време на лактацијата. Таб. 9: Препораки за хранење лаички маторици со vp (g/d; според GfE 2006). LM [kg] Зголемување на легло [kg/d] 1,5 2,0 2,5 3, 3 15,8 19,1 22, 5 16,0 19,3 22, 7 16,2 19,5 22, 9 16,4 19,8 23, 1 16,6 20,0 23, 4 16,8 20,2 23,5 Изнесени се следниве претпоставки: - МЕ М: 0,44 МЈ/кг ЛМ 0, 75 и ден - производство на млеко на 1 кг добивка на маса од прасе: 4,1 кг 29
43 SCHRIFTTUM WEBER (2011) посочува во врска со ова дека свињите имаат 8-10% пониска дневна потреба за МЕ од Бурген и им треба 34,15 ME MJ/kg добивка (Börge во споредба: 37,31 ME MJ/кг зголемување). Според КЕМП (1989) и РОТ (2008), свињите треба да се хранат за време на размножувањето на таков начин што ќе бидат соодветно снабдени со внес на енергија од МJ МЕ/ден (во зависност од тежината на животното и ако треба да се избегне дебелината). GfE (2006) се однесува на вкупно 12,0 g или 7 g сварлив фосфор на ден кај свињите што се размножуваат. 31
50 МАТЕРИЈАЛ И МЕТОДИ - Пресметка на аритметичката средина (Ø) при комбинирање на неколку индивидуални вредности - Пресметка на стандардната девијација (±) како мерка за дисперзија на индивидуалните вредности Се претпоставува дека распределбата на вредностите на случајните променливи е нормално распределена поради малата големина на примерокот. 38
52 РЕЗУЛТАТИ - Хлороводородна киселина 0,35% - Лимонска киселина 2% - Температура на инкубација: 41 C, во ормар за греење - Време на инкубација: 2 часа, со постојано мешање - Посипување на супернатантот по центрифугирање и P определување со употреба на ванадатен молибдат Во прилог на ултрачиста вода, 0,35% хлороводородна киселина (HCl) беше искористена како наједноставен медиум за употребениот медиум раствор. Вредноста се заснова на KOLB (1989), кој ја одредува концентрацијата на HCl во содржината на стомакот кај свињите како 0,3-0,4%, како и пресметките на BODMANN (2010), што покажува просечна концентрација на HCl во содржината на мисиркините стомаци од 0,33%. Употребата на 2% лимонска киселина е добро позната метода во истрагата на ѓубрива што содржат Р со кои се определува растителниот фосфор (т.е. не вкупниот Р како критериум за квалитет, туку растворлив во лимонска киселина Р). Бидејќи со овој прв пристап (а делумно и подоцнежните пристапи) требаше да се соберат основни податоци и за храната за свињи и за бројлери, првично беше избрана температура на инкубација од 41 C (внатрешна телесна температура на бројлери). 40
56 РЕЗУЛТАТИ Прелиминарен експеримент 3 Во третиот експеримент за собирање основни податоци, комплетна храна за мисирки исто така беше испитана повнимателно за растворлив P со помош на систематски тест во три под-чекори. Следниве услови применети во првиот чекор (степен на мелење) со употреба на P2 од производителот 3: - Степен на мелење: неизбришан, грубо мелен, ситно мелен (0,5 mm) - Користен раствор: ултрачиста вода - Температура на инкубација: 20 C (собна температура) - Време на инкубација: 90 мин (со постојано мешање) - согорување на остатокот и супернатантот и определување на P содржан во него со употреба на ванадат-молибдат метод. Слика 2 покажува дека со зголемување на интензитетот на мелење, процентот на фосфор што се растворувал постојано се зголемувал (со 28,7 мг фосфор во серијата). Во неизбришаниот примерок, просечно се наоѓале 17,6 мг фосфор во задниот дел и 12,8 мг во супернатантот; со грубо мелени примероци 16,9 мг фосфор во задниот дел и 13,6 мг во супернатантот и со ситно мелени примероци 15,3 мг фосфор во задниот дел и 15,7 мг во супернатантот. Треба да се напомене дека поради високото разредување и конверзија, вредностите се малку над вкупниот Р (28,7 mg во пристапот). 44
57 РЕЗУЛТАТИ Сл. 2: Инкубација на AF за пилиња од мисирка во воден раствор во зависност од интензитетот на мелење. Во вториот чекор (т.е. за да се провери можното влијание на времето на инкубација), повторно се избрани следниве услови со MF P2 од производителот 3: - Степен на мелење: ситно мелено (0,5 mm) - Користен раствор: ултрачиста вода - Температура на инкубација: 20 C (собна температура) - Време на инкубација: 20 мин., 60 мин., 90 мин., 120 мин., 180 мин. (Со постојано мешање) - Посипување на остатокот и супернатантот и одредување на фосфорот содржан во секој случај со употреба на ванадат-молибдат метод. Слика 3 покажува како, со зголемување на времето на инкубација, има континуирано зголемување на фосфорот во задниот дел на фосфорот во супернатантот (со 28,7 mg фосфор во препаратот); По 20 минути, просечно се наоѓале 18,3 мг фосфор во задниот дел и 13,3 мг во супернатантот; по 60 мин. 18,0 mg фосфор во задниот дел и 14,4 mg во супернатантот; по 90 мин. 17,5 mg фосфор во задниот дел и 16,0 mg во супернатантот; по 120 мин. 16,3 мг фосфор во грбот и 15,5 мг во супернатантот и по 180 мин. 16,6 мг фосфор во грбот и 16,2 мг во супернатантот. И овде, 45
58 РЕЗУЛТАТИ дека поради високото разредување и претворање, вредностите се малку над вкупниот Р (на 28,7 мг во пристапот). Сл. 3: Споредба на нивоата на P во остатокот и супернатантот на AF за пилиња од мисирка со различно време на инкубација. Во третиот чекор (т.е. за да се провери можното влијание на температурата на инкубацијата по суспензија во вода), се користеше P2 од производителот 2, со следниве услови: - Степен на мелење: ситно мелен (0,5 mm) - Користен раствор: вода - Температури на инкубација: 20 C (собна температура), 30 C, 40 C, во кабинет за греење - време на инкубација: 90 мин (со постојано мешање) - согорување на остатокот и супернатантот и определување на P содржан во секој случај со употреба на ванадат-молибдат метод. Слика 4 ја покажува количината на растворлив фосфор со зголемување на температурите на инкубација (со 26,8 mg фосфор во серијата), со максимална вредност од 30 C. На 20 C, просечно 13,1 mg фосфор е пронајден обратно и 11,6 mg во Преболи; на 30 C 14,6 mg фосфор во задниот дел и 11,9 mg во супернатантот и на 40 C 13,4 mg 46
59 РЕЗУЛТАТИ Фосфор во задниот дел и 11,4 мг во супернатантот. Ако се инкубира 90 минути, т.е. Х. Кога се суспендира во вода, температурата во медиумот за инкубација не игра значајна улога. Во споредба на 20, 30 и 40 C, разликата во растворливоста во P е само 3,5%. Наспроти ова, изборот падна на 20 C (собна температура) за сите последователни истраги. Сл. 4: Споредба на нивото на P во остатокот и супернатантот на AF за пилиња од мисирка на различни температури на инкубација. Од претходните резултати (чекори од 1 до 3) беа донесени следниве одлуки за подготовка и услови на инкубација: 1. Степен на мелење: 0,5 mm. 2. Растворувач за единечни и MF компоненти: ултрачиста вода и HCl (0,35%). 3. Температура на инкубација: 20 C (собна температура). 4. Време на инкубација: 90 мин. За да се тестира репродуктивноста на резултатите, П-определување беше спроведено пет пати и со примерок од пченица и со SES; соодветните резултати се прикажани во Табела 11. Овде може да се види дека за пченицата, и H 2 O и HCl во просек се многу слични 47