Clostridium difficile-toxin AB - Синево
Општи информации и препораки
Клостридиум дифицил - спориран анаеробен грам-позитивен бацил - е одговорен за производство на псевдомембранозен колитис и дијареја предизвикана од антибиотици.
И покрај тоа што отровите од Ц.Дифицијл долго време беа потенцирани од истражувачите, дури во 1970 година беше потврдена нивната улога во развојот на псевдомембранозен колитис. .
C. դժվարторен произведува најмалку 2 токсини наречени А и Б. Токсинот А, ентеротоксин, предизвикува зголемено лачење на течности и воспаление во цревната лигавица. Токсинот Б, кој има цитотоксично дејство ин витро, околу 1000 пати посилен од токсинот А, дејствува синергистички со него. Додека токсинот А се произведува од скоро сите соеви на Ц. Дифцили вклучени во болеста, неодамна се покажа дека некои соеви лачат само токсин Б 4. .
Колитисот предизвикан од C.difficile е резултат на нерамнотежа на бактериската флора на дебелото црево, колонизација со C.difficile и производство на токсини. Третманот со антибиотици е одговорен за промена на флората и главната цел на инфекцијата се хоспитализирани лица. Колонизацијата се јавува по фекално-орален пат. C. difficile формира и спори отпорни на топлина кои можат да опстојуваат на околината од неколку месеци до неколку години. Кога преовладува контаминација, може да се појават епидемии на дијареја во болниците и другите единици за нега. Нормалната цревна флора се спротивставува на колонизацијата, но антибиотскиот третман, потиснувајќи ја флората, го олеснува размножувањето на C.difficile 1 .
Болеста првично беше опишана кај пациенти кои примаа третман со клиндамицин, но во моментов се верува дека секој антибиотик може да предизвика псевдомембранозен колитис. Во студиите кои вклучуваат голем број пациенти, повеќе од 70% од случаите биле поврзани со администрација на цефалоспорини (особено втора и трета генерација) 3. Ампицилин и амоксицилин следат по редослед на фреквенција. Помалку вклучени се макролидите и другите пеницилини. Аминогликозидите, флорокинолоните, триметоприм-котримоксазол, имипенем и меропенем може повремено да предизвикаат болест. Дури и кратка администрација на антибиотик може да предизвика колитис. Ризикот е поголем во случај на продолжени третмани и комбинации на антибиотици 1 .
Постари лица и имунокомпромитирани пациенти имаат најголема веројатност да развијат колитис предизвикан од C.difficile. Иако малите деца се често носители на соеви на Клостридиум дифицил кои лачат токсини, клинички манифестираната инфекција кај оваа возрасна група е невообичаена.
Колонизацијата со C.difficile генерира широк спектар на клинички состојби, од асимптоматски носител на статус, лесна само-ограничувачка дијареја до псевдомембранозен колитис и фулминантен колитис. Најсериозни компликации се токсичен мегаколон, перфорација на дебелото црево и перитонитис. Повеќето пациенти развиваат дијареја за време или веднаш по започнувањето на третманот со антибиотици. Сепак, 25-40% од пациентите не стануваат симптоматски порано од 10 недели по завршувањето на антибиотската терапија. Некои случаи на спонтана болест се опишани и кај пациенти без историја на третман со антибиотици; 1; 3; 4 .
Најчесто, клиничката слика вклучува:
-лесна или умерена дијареја, ретко крвава;
-колика абдоминална болка;
Дијагнозата на колитис предизвикан од C.difficile треба да се сомнева кај секој пациент со дијареја кој добил антибиотски третман во последните 2 месеци и/или дијарејата започнала 72 часа (или повеќе) по хоспитализацијата.
Откривањето на токсините на C. რთული е важно за воспоставување соодветна терапија. Доколку клиничките манифестации не се повлечат со прекинување на инкриминираниот третман со антибиотици, се препорачува орална администрација на ванкомицин, метронидазол или бацитрацин.
Рутинска култура на бактерија не се препорачува поради честата изолација на соевите кои не лачат токсини 3 .
Тестот извршен во нашата лабораторија открива токсин А и/или Б кај измет со помош на имунохроматографска техника 2 .
Примерок собрани - свежо емитирани измет; препорачаната количина е 1-2 g формирани измет или 1-2 ml течни измет; примероците собрани на ректален брис 3 не се прифаќаат .
Контејнер за берба - контејнер за еднократна употреба за измет; забрането е додавање на конзерванси 2 .
Потребна е обработка по бербата - анализата се изведува на свежо емитиран измет во максимум 3 часа од бербата (по можност). Доколку тоа не е можно, примерокот ќе се чува на 2-8 ° C максимум 3 дена. За обработка, одредена количина на хомогенизиран примерок се третира со специјален разредувач за растворање на токсини и се центрифугира за одвојување на супернатантот 2. .
Стабилност на тестот - по бербата, примерокот мора да се транспортира во лабораторијата што е можно поскоро; примерокот е стабилен 3 дена на 2-8 ° 2 .
Метод - имунохроматографски. Количина од разредениот примерок се меша со конјугат раствор 1 (содржи специфични моноклонални антитела на токсинот А и токсинот Б на Клостридиум дифицил конјугиран со обоени микрочестички) и со конјугат раствор 2 (содржи специфични антитела на биотинилирани анти-токсини А и анти-токсини Б ) Одреден волумен на оваа смеса се пренесува во наменски прозорец за тест кутија; кутијата содржи стрептавидин имобилизиран во тест лентата и анти-имуноглобулински антитела на кози во контролната лента. Специфичните антитела ќе се врзат за антигенот во примерокот и ќе формираат комплекс „антиген-сендвич“. Комплексите мигрираат низ капиларите, достигнуваат до областа што ја содржи тест лентата, се врзуваат за стрептавидин присутен во цврстата фаза и може да се гледаат како лента во црна боја од кој било интензитет во прозорецот за резултати. Во отсуство на токсин А и/или Б во примерокот, нема лента да се визуелизира. Тестот се потврдува само ако се добие црна боја лента од кој било интензитет во контролниот прозорец 2 .
Референтни вредности
Токсин Клостридиум дифицил А/Б - Негативен.
Резултатите се изразени квалитативно: позитивни/негативни 2 .
Граници и пречки
Негативен резултат не го исклучува присуството на состојба поврзана со C. რთული. Лажно-негативен резултат може да ги има следниве причини:
-неправилно собирање, транспорт или складирање на примерокот;
-ниски нивоа на А/Б токсини, под границата на откривање на методот;
1. М-р Крег А Грончевски, д-р Jonонатан П Кац. Клостридиум Тежок колитис. е-медицинска гастроентерологија (ажурирање август 2006 година). Тип на ref: Интернет комуникација.
2. Лабораторија во Синево. Специфични препораки на употребената технологија за работа во 2010 година. Ref Type: Каталог.