Извештаи за дневните науки во Аурих DIfE (III)
Извештај за пракса
Стажирање во DIfE Потсдам-Рехрике
од 7-ми до 18-ти октомври 2019 година
Од Антје Сокен
Благодарение на Деновите на наука во Аурих, можев да направам двонеделна пракса во Германскиот институт за истражување на исхраната во Потсдам за време на есенската пауза. Сакав да направам стажирање во Германскиот институт за истражување на исхраната, затоа што сакам професионално да се ориентирам во областа на исхраната. На германскиот институт за истражување на исхраната бев назначен за областа дијабетологија под раководство на професорот Шурман. Лице за контакт ми беше д-р. Лигар, пост-доктор на мојот надзорник Тереза.
ден 1
Првиот ден ме примија секретарот, кој ми го покажа институтот и ми даде лабораториско палто и клучеви за шкафчето и лабораторијата.
Тогаш ми беше претставен д-р. Лижер и неговиот тим го претставија. Истражувањето се однесува на избегнување на дијабетес тип 2. Дијабетес тип 2. е кога органите стануваат отпорни на инсулин, што би требало да ги стимулира органите да апсорбираат гликоза. Меѓутоа, ако органите се отпорни на инсулин, малку или воопшто не се апсорбира глукоза. Ова предизвикува панкреасот да произведува повеќе инсулин, мислејќи дека има повеќе гликоза затоа што не се апсорбира. По некое време, панкреасот е сериозно оштетен и произведува помалку или повеќе инсулин.
Преку истражување на диети, тие откриле дека шеќерот во крвта кај дијабетичарите тип 2 не е толку висок на диета со малку протеини, како што е на другите диети. Ова го покрена прашањето „зошто?“. Зошто оние кои имаат диета со малку протеини ја апсорбираат гликозата од нивната крв, а оние кои се на различна диета не?
Се покажа дека протеинот FGF21 се произведува во црниот дроб со диета со малку протеини, што го прави телото да забележи дека му треба енергија и на тој начин ги стимулира органите да апсорбираат гликоза. FGF21, што се залага за „Фактор за раст на фибробласт 21“, ја презема улогата на инсулин. Сепак, целосно избегнување на протеини е многу тешко и скоро неподнослива диета. Тогаш беше разгледано дали не треба да се зема само одреден вид на есенцијален протеин, а тоа е метионин. Еден избегнува метионин следејќи диета со малку месо.
На состанокот на тимот, тогаш ме поздрави професорот и тие разговараа за задачите за следната недела.
Потоа ја гледав мојата супервизор Тереза како работи на западен заговор што може да се искористи за да се одреди големината на протеините. Подоцна подготвив јадења од Петри за идно истражување на островските клетки.
2 ден
Вториот ден започна со подготовка на јадења од Петри повторно. Потоа ми беше покажана клеточната лабораторија, каде што се одгледуваат клетки за разни експерименти. Подоцна направив тест рок со Тереза за експеримент за следниот ден во кој црниот дроб беше отстранет од глушец со цел да се добие материјал за понатамошно истражување.
По паузата за ручек, извршив определување протеини со друг практикант, во кој протеините се споредуваат со стандардите. Тоа траеше до крајот на работниот ден затоа што моравме многу да пипетираме, што се покажа како многу време.
3 ден
Утрото јас и мојот претпоставен ја подготвивме лабораторијата за предвидениот експеримент на глувчето. Станува збор за глушец Б7, тие се многу тенки и стари околу 10-18 недели во експериментот. Ние ги поставивме сите работи што ни требаа и ги измешавме решенијата за експериментот.
Откако сè беше подготвено, првиот глушец беше анестетизиран. По неколку минути беше извршен тест за да се утврди дали глушецот веќе не може да чувствува ништо. Потоа беше отворен на стомакот и стомакот со тенки и дебели црева беше внимателно изнесен од телото за да се открие шуплива вена. Игла беше вметната во шуплива вена, што пумпа пуфер 1 низ неа. Во меѓувреме, порталната вена се отвора, така што крвта може да избега од телото. Тампон 1 го прави црниот дроб полесен и малку поголем. По некое време, тампон 1 се разменува со тампон 2. Тампон 2 осигурува дека клетките на црниот дроб се раствораат во црниот дроб.
Кога црниот дроб станува сунѓерест, тој се сече од телото. Црниот дроб се става на текстилен пресек и се намалува со пар пинцети. Црниот дроб станува течен. Потоа, клетките на црниот дроб се доведени во контакт со пуфер 3 и центрифугирани. Како резултат, посакуваните клетки се таложат на подот и „отпадот“ плови во тампон 3. Буферот 3 внимателно се отстранува, свежиот пуфер 3 се додава во клетките на црниот дроб и клетките внимателно се отстрануваат од подот со помош на пипета. Повторно е центрифугиран и тампон 3 повторно се отстранува. Потоа се брои мал дел од протеините, кој потоа се пресметува врз основа на димензиите и потоа се пресметува колку микролитри се наоѓаат во една област. Друга супстанција се додава во клетките, што е како храна за клетките. Клетките можат да преживеат околу три дена.
6 ден
Утрото подготвив совети за пипета за автоклав, а потоа ги подготвив садовите Петри. Потоа го продолживме експериментот од 3 ден. Ние ги третиравме добиените клетки со антитела со цел да ги одделиме протеините од нив. Ние ги броевме овие протеини со помош на машина, т.е. направивме определување на протеини. FGF21 исто така се брои со цел да се открие зависноста или поврзаноста помеѓу FGF21 и протеините.
7 ден
Утрото повторно подготвив совети за пипета за автоклав. Потоа, мојот претпоставен и јас сакавме да го повториме експериментот од 3-ти ден. За жал, сепак, не можевме да го завршиме експериментот, бидејќи тој не работеше заради проблемите што се појавија. Во попладневните часови и помогнав на друга докторантка со нејзината подготвителна работа за експеримент. Таа ги отстрани органите од осум глувци, кои потоа ги измерив и документирав. Исто така, ги измерив нивото на шеќер во крвта кај глувците. Потоа ги замрзнав органите користејќи течен азот.
Ден 8
Осмиот ден, прво гледав како убиваме глувци за да стигнеме до панкреасот. Кога панкреасот бил изложен, колагеназата била инјектирана во соседниот крвен сад, предизвикувајќи панкреас да отече и да стане маса слична на гел. Панкреасот потоа беше спасен од телото на глувчето со што помалку контакт за да се спречи протекување на островските клетки. Ние го повторивме процесот на уште седум глувци. Тогаш мојот претпоставен ги броеше островските клетки во рамките на индивидуалниот панкреас. Во попладневните часови, со цел да вежбам пипетирање, извршив уште едно утврдување на протеини со лабораторискиот техничар, бидејќи пипетирањето е важна вештина од областа на истражувањето во лабораторијата.
9 ден
На тој ден направивме вестерн бот. Протеините се пренесуваат во носачката мембрана. За да го направите ова, прво направивме гел кој мораше да мирува некое време. Потоа додадовме многу мали пигменти во боја. Гелот потоа се ставаше во уред кој беше исполнет со течност и електрифициран, така што протеините ќе течеа низ гелот.
По околу еден час и половина, пигментите во боја го достигнаа самото дно и во гелот се појавија изолирани марки во боја. Потоа гелот се става на мембранска хартија и се завиткува во филтер-хартија и сунѓери во друг уред, што обезбедува протеините од гелот да се пренесат во мембранската хартија. Подоцна, мембранската хартија се мие неколку пати со раствор и потоа се потенцира со супстанца слична на млеко. По околу 30 минути, тој дополнително се потенцира во студена средина.
Ден 10
На последниот ден подготвив одредени супстанции за понатамошни експерименти. Исто така, ја измив и исушив мембранската хартија неколку пати. Потоа го проценивме во машина. На ручек го започнав заминувањето.
Заклучок
Навистина уживав во стажирањето на DIfE затоа што бев срдечно пречекан и беше многу поучно за мене. Беше многу забавно и многу интересно да се види како работи во лабораторија. Особено уживав во лабораториската работа.
Исто така, добив увид во истражувањето и дури сега навистина можам да замислам како работи. Има многу врска со канцелариска работа и треба да направите многу истражување и барање пред да започнете. Исто така, сфатив дека многу истражувања не функционираат и вистинско прашање на трпеливост е да се напредува во истражувањето. Тоа беше убав увид во професионалниот свет. Запознав многу луѓе кои сите студираа на различни области и добија многу совети.