Крвна група ОАБ - Синево

ИнформирајÞii генерален

група

Кај луѓето, идентификувани се 26 системи на крвна група со 228 антигени; системот на крвни групи се состои од еден или повеќе антигени управувани од еден ген или комплекс од два или повеќе тесно поврзани гени. Исто така, идентификувани се и други антигени кои не биле доделени на воспоставените системи. Еритроцитните антигени можат да бидат протеини, гликопротеини или гликолипиди. Повеќето се синтетизираат од еритроцитите, сепак некои антигени, како што се оние кои припаѓаат на системот Луис, се апсорбираат од плазмата на еритроцитната мембрана. Некои антигени се специфични за еритроцитите, додека други се наоѓаат на други клетки во телото. Познавањето на крвните групи е од суштинско значење за трансфузиона терапија. Така, индивидуите кои немаат одредени еритроцитни антигени можат да произведат алоантитела кога се изложени на крв што ги содржи овие антигени при трансфузија на крв или за време на бременоста. Антителата кои комуницираат со еритроцитните антигени создаваат непосредни или одложени реакции на хемолитична трансфузија и хемолитичко заболување на новороденчето 4 .

Системот АБО крвна група е најважниот систем на крвна група затоа што: кога антигените не се изразуваат на површината на еритроцитите, соодветните антитела се секогаш присутни во плазмата, стимулите за производство на антитела се претставени со различни фактори на животната средина, како на пр. бактерии (на пр. E. coli), кои изразуваат на површинските структури скоро идентични со АБО јаглехидратите; антителата формирани се мешавина од IgM (претежно) и IgG, активна на 37ºC и способна да активира комплемент, а високата густина на антигени места на еритроцитната мембрана овозможува врзување на голем број антитела што водат, во случај на некомпатибилна трансфузија на крв во системот АБО, при реакции на акутна хемолитична трансфузија 2; 4 .

Сите имунокомпетентни индивидуи произведуваат природни антитела (изоаглутинини или изохемолизини) кон антигените на групата АБО (H) што недостасуваат. Анти-А и анти-Б обично се забележуваат 3-6 месеци по раѓањето, а на 5-годишна возраст титарот на антитела го достигнува својот максимум и се одржува во текот на целата зрелост. Титарот на IgM антитела може постепено да се намалува со напредната возраст. Анти-А и анти-Б антитела се исто така присутни кај оние со слаби варијанти на А или Б. Новороденчињата обично немаат значителна количина на анти-А и анти-Б во плазмата, освен оние родени во алоимунизирани мајки, кај кои може да се присутни IgG антитела од мајката кои ја преминале плацентата. Антителата АБО не се главна причина за хемолитично заболување кај новороденото дете поради инхибиција на антителата од растворливи А и/или Б супстанции присутни во крвта, како и А или Б антигени присутни на други клетки освен еритроцити; исто така, афинитетот за врзување на антителата кон молекулите на шеќерот е послаб од оној на антителата кон протеинските молекули, како што е антигенот Д 4. Хемолиза е поверојатно ако мајката е група О, со детска група А 2 .

Препораки за одредување на крвна група АБО 2

  • пред трансфузија;
  • пред инвазивна или хируршка процедура потенцијално поврзана со компликации на крварење за кои може да биде потребна трансфузија;
  • антепартален и постнатален имунохематолошки мониторинг на мајка и дете;
  • на крводарители;
  • за компатибилност на групата АБО при трансплантација на бубрези и срце.

Обука на пациентот - не е потребна претходна обука; корисни информации за третмани со инфузија со макромолекуларни раствори извршени пред утврдување, трансфузии во последните 120 дена, заразни болести со Грам-негативни микроби со/без сепса, малигни заболувања (карцином, лимфом, миелом) се корисни 3 .

Примерок собрани - а) капиларна крв од пулпата на прстот; б) венска крв 3 .

Контејнер за берба - б) правосмукалка без додатоци или активирачки гел (црвена или безбојна капа); за автоматска метода: 4 ml прочистувач што содржи EDTA (темно-виолетов капак) 3 .

Количината собрана - б) колку што дозволува вакуумот 3 .

Причини за одбивање на доказите - силно хемолизиран примерок 3 .

Стабилност на примерокот - тестот се изведува веднаш, ако тоа не е можно, примерокот се чува 48 часа на 2-8 ° C; за автоматскиот метод, примерокот на крв има стабилност од 7 дена на 2-8 ° C 3 .

Потребна е обработка по бербата - по целосна коагулација на собна температура, серумот и тромбот се отстрануваат. Од преостанатите црвени крвни клетки се подготвува 10% суспензија во сопствената плазма или во солен раствор 1; 3. За методот на аглутинација на картички, се подготвува суспензија од 5% црвени крвни клетки во специјален медиум за суспензија. За автоматска метода, примерокот на крв ќе се центрифугира за да се добие плазма и ќе се вметне во анализаторот (плазмата ќе остане над црвените крвни клетки) 3 .

Методи на определување - Лабораториите во Синево спроведуваат:

а. Директен/топчест метод (Бет-Винсент) за одредување на крвна група АБО со употреба на анти-А, анти-Б и анти-АБ серуми, со следниве варијанти:

- хемаглутинација на плочата 3 Се користат две контроли: контролна АБ (црвени крвни клетки на пациентот со АБ серум) и контрола на автомобил (црвени крвни клетки и сопствен серум) 1 .

- аглутинација и гел-филтрација на картички со микротреќи кои содржат гел импрегниран со антиген специфичен реагенс за еритроцити (што се утврдува морски или хумани моноклонални антитела) - директен тест на групата АБО и одредување на Ag RH1 (D) и Ag RH 1,2,3 (DCE).

За методот на аглутинација на картичката, позитивната реакција се потврдува само ако контролната микротрепка е негативна. Позитивната реакција се проценува во зависност од големината на аглутинатите од + до ++++.

Позната група и контролна крв на Rh се користи при секое испитување на примероците 3 .

б) автоматскиот метод на хемаглутинација на плочи за бунари (во Централната лабораторија во Синево)

Работните плочи (Erytype S) содржат 12 тест ленти со по 8 бунари (1 лента = комплетен ABO тест и Rh фактор).

Крвната група ќе се одреди и со директен, глобуларен метод (Бет - Винсент) кој ги нагласува еритроцитните антигени со употреба на тест серуми (суви моноклонални серуми, кои се поставени на дел од бунарите на реакцијата), и со индиректен метод на плазма (Симонин Винсент). ), што ги потенцира антителата во плазмата анализирана со помош на тест еритроцити, аглутинацијата се одвива во неизвлечените бунари на работната лента. Бунар на лентата вклучува негативна контрола на реакцијата.

Реакцијата на аглутинација на еритроцитите во директен метод е потенцирана со употреба на бромелаин (протеолитички ензим кој раскинува полипептидни ланци на површината на црвените крвни клетки, со што се намалува негативниот товар на клетките; затоа ќе се зголеми силата на привлекување помеѓу црвените крвни клетки во присуство на соодветно антитело).

Во последната фаза, секој бунар од работната лента се проценува и фотографира автоматски од анализаторот, резултатите се толкуваат на следниов начин:

  • Позитивна реакција - присуство на аглутинација (интензитетот се проценува од 1+ - 4+)
  • Негативна реакција - нема аглутинација
  • Неубедлива реакција - реакцијата +/- ќе ја толкува лекарот

Сите добиени слики и резултати ги проверува и потврдува лекарот 3 .

Граници и мешање

Резултатот од утврдувањето на крвната група треба да го прочитаат две лица и на крајот треба да биде потврден на втор примерок од крв 1; .

Грешки во читањето поради технички грешки:

- валкани стакларија; бактериска контаминација;

- присуство на микротагови (лажна аглутинација);

- не е забележано: пропорции на црвени крвни клетки/серум, редослед на капење на крвни тестови (контрадикторни аглутинации), време на читање - доцна читање: суви рабови (лажна аглутинација), рано читање (недостаток на аглутинација или слаба аглутинација).

Грешки поради црвени крвни клетки

а) Присуство на ролни (псевдоаглутинација): употреба на макромолекуларни раствори (Декстран, ХЕС), нарушувања на коагулацијата, нецелосно коагулирани примероци на крв, хиперфибриногенемија, производи за деградација на фибрин, фибринолитички агенси, диспротеинемија, парапротеинемија, крезоглобин, фазеог, лекови (високи дози на хепарин, протамин сулфат), ревматоидни фактори, зголемен холестерол, билирубин, леукоцитоза, леукоцитни ензими 2. Контролата на AB е позитивна; искоренувањето на црвените крвни клетки овозможува правилно извршување на топчестиот примерок 1 .

  • Присуство на ладни аглутинини (светлината на автомобилот е позитивна). Примерокот на крв и реагенсите се предикубираат на 37ºC и тестот се спроведува топло 2 .
  • Црвени крвни клетки опфатени со алоантитела: новороденче од некомпатибилна бременост (во системот Rh, ABO), трансфузија на пациент со некомпатибилна крв.
  • Одредување на крвна група на крв собрана од папочната врвца: Вартон желатин, макромолекуларна супстанца што ги опкружува еритроцитите, дава изглед на псевдоаглутинати. За да се отстрани, потребно е да се мијат еритроцитите најмалку 6 пати пред да се утврди 1 .
  • Присуство на имуни комплекси на лекови.

Кај септикемиите со Грам-негативни бацили, криптоантигените (Т) се изложени на ензимско дејство на бактериски агенси, препознаени од антитела (анти-Т) присутни во повеќето човечки серуми 2. Контролата на AB е позитивна 1 .

Отсутни или слаби аглутинации или двојно појавување на популација: аглутинацијата не е тотална, со присуство на слободни црвени крвни клетки (аглутинатите се појавуваат на розова позадина) 1; 2:

  • стара крв;
  • слаби антигени: новороденчиња, предвремено родени;
  • слаби подгрупи А или Б;
  • слабеење на антигенот (кај леукемии, лимфоми, Хочкинова болест);
  • пациент од група А или Б трансфузиран со крв од група О, мајчино-фетално крварење;
  • присуство на голема количина на супстанција А или Б во плазмата (карцином на желудник, панкреас) што ги неутрализира тест антителата (црвените крвни клетки мора да се мијат за да се отстранат);
  • присуство на химера или мозаик (исклучителна, на пр. постмедуларна трансплантација).