Лабораторија; Уринарен статус

Статусот на урина е рутинско испитување на составот на урината со квалитативни методи за откривање и, доколку е потребно, со дополнителни квантитативни определувања.

Нормални својства на урината

Хемискиот состав на урината варира во голема мера, во зависност од количината и видот на храната. Екскрецијата на некои супстанции е исто така предмет на дневен и ноќен ритам, така што определувањето на дневната екскреција мора да се изврши на 24-часовна колекција на урина.

боја: Светло жолта до темно жолта во зависност од концентрацијата на урината.

црвеникава (хемоглобин)
кафеаво-црвена боја (уробилиноген, порфирини)
кафеаво жолто - зеленикаво (биливердин, билирубин)

Промена на бојата на урината честопати е поврзана со болести на црниот дроб и билијарниот тракт, но може да биде предизвикана и од лекови или од одредена храна.

Свежата урина треба да биде чиста, може да се појави облачност

Врнежи од слабо растворливи соли (CaPO4 или CaCO3)
Клетки или бактерии (патолошки!)

Протеините никогаш не таложат во свежа урина (урична киселина!). Во постара урина, евентуално денатурирани, нерастворливи протеини може да резултираат во облачност или врнежи.

Волумен и специфична тежина:

Со вкупен внес на вода од 2 литри (1 литар пијалоци + 1 литар цврста храна што содржи вода), 1-1,5 литри се излачуваат преку бубрезите. 1 литар урина тежи 1002-1036 g, во зависност од неговата концентрација. Волуменот и специфичната тежина мора да се променат во спротивна смисла, односно малата специфична тежина укажува на голем волумен на урина и обратно. Затоа, специфична тежина од 1026 со дневен волумен од 2,5 литри не е нормална и сугерира излачување на супстанции кои вообичаено не се присутни во урината (осмотска диуреза!).
Мерењето се врши со аерометар.

Уринарна реакција (pH вредност):

Нормалната урина обично има малку кисела реакција (физиолошки опсег pH 4,5 - 8). Дури и во случај на метаболна ацидоза, pH вредноста нема да падне под 4,5, бидејќи зголемената количина на протони што се излачуваат се баферираат со NH3 и фосфат.

Уринарен талог:

Седиментите на урината се добиваат со центрифугирање на свежа урина. Нормален талог содржи 0-3 леукоцити и 0 еритроцити на визуелно поле, некои епителни клетки, често солени кристали или кристали на урична киселина и урати (талог обоен во црвена боја од порфирини и урохроми).
Од друга страна, седиментите на урината не треба да содржат никакви бактерии (инфекции на уринарниот тракт!) Или премногу клетки.

Уринарен состав:

Вода 95-99%, цврсти материи 1-5%
Органски супстанции: - уреа (20-40 g) - метаболизам на аминокиселини
- Урична киселина (1 g) - метаболизам на пурин
- Креатинин (1-2 g) - метаболизам на мускулите
- Креатин (трага)
- Аминокиселини (траги)
- Протеини (траги)
- Гликоза (трага)
- Галактоза (не се забележува)
- Лактоза (доцна во бременоста и за време на доење)
- Хеме претходници и производи за деградација

Неоргански супстанции: Електролити (Cl-, Na +, K +, Ca2 +, Mg2 +, NH3

Патолошки компоненти на урината

Најчестите патогени предизвикувачи на инфекции на уринарниот тракт, вклучувајќи E. coli, го намалуваат нитратот (NO3-) присутен во урината до нитрит (NO2-). Позитивен тест за нитрити е индикација за инфекција на уринарниот тракт.

Протеинуријата е чест, но неспецифичен симптом кај заболување на бубрезите. Кога механизмите со тубуларна реапсорпција се оштетени, малите протеини особено се појавуваат во урината. Од друга страна, капацитетот за реапсорпција на тубулите може да биде преоптоварен, на пример, ако се појават големи количини на миоглобин во плазмата по мускулна траума. Ако гломерулите се оштетени, една или повеќе од различните бариери за гломеруларна филтрација може да бидат оштетени.
Бенигна, покачена протеинурија кај здрави бубрези, која по можност се забележува на возраст до 30 години, сочинуваат до 90% од протеинурија во оваа возрасна група (на пр. При физички напор, емоционален стрес, хипотермија, прегревање или бременост).
Протеинот може да се открие во урината на различни начини: топлински врнежи, кисели врнежи, формирање комплекс на бои (биуретски реагенс) или сино Coomassie (Брадфорд).

Гликоза и други шеќери:

Граничната концентрација во крвната плазма, над која е надминат капацитетот на ресорпција, е помеѓу 10 и 12 mmol глукоза на литар. Во ретки случаи, глукозуријата може да се појави и како резултат на генетски дефект во еден од транспортерите на Na +/глукоза.
На крајот на бременоста и за време на доењето, лактозата може да се излачува преку урината.
Ако се појави галактоза или фруктоза во крвта, овие два шеќери се филтрираат во бубрезите, но само делумно се апсорбираат.

амино киселини:

Слободните аминокиселини се наоѓаат во сите телесни течности. Тие исто така се излачуваат во мали количини во урината. Само кај тешки заболувања на црниот дроб или метаболизмот, индивидуалните аминокиселини се појавуваат во големи количини во урината.

Реакциите за откривање можат да се поделат во две групи:

Општи тестови (нинхидрин тест)
Специфични тестови за индивидуални аминокиселини

Кетонски тела:

Кетонски тела (ацетон, ацетоацетат и б-хидроксибутират) се јавуваат во урината при продолжено гладување и кај дијабетес мелитус.

Билирубинот, како производ на распаѓање на хемоглобинот, нормално се излачува во жолчката како диглукуронид. Бидејќи не само некоњугираниот, туку и конјугираниот билирубин лесно се врзува за албуминот, билирубинот не се излачува преку бубрезите. Билирубин диглукуронид се дислоцира од албуминот само преку жолчните киселини и се излачува во урината ако голема количина на билирубин диглукуронид и жолчни киселини влезат во крвните капилари поради болест. Позитивно откривање на билирубин во урината е секогаш знак на заболување на црниот дроб.

Уробилиноген:

Билирубинот што влегува во цревата со жолчката се намалува во уробилиноген и стрекобилиноген од бактериите. Повеќето од овие жолчни пигменти влегуваат во фецесот, мал дел се апсорбира и се враќа во црниот дроб преку порталната вена, што - сè додека клетките на црниот дроб се здрави и функционални - уништува поголем дел од апсорбираниот уробилиноген или стеркобилиноген или повторно влегува во жолчката исклучен. Малиот остаток на уро- и стеркобилиноген кој е дозволен да помине покрај црниот дроб стигнува до бубрегот и се излачува преку урината.

Уробилиногенот се повеќе се излачува преку урината доколку е ограничен функционалниот капацитет на црниот дроб (на пр. Цироза на црниот дроб) или преоптоварен (на пр. Кај хемолитична анемија) или ако се заобиколи порталната циркулација на црниот дроб. Меѓутоа, со целосна опструкција на жолчните канали, повеќе билирубин не стигнува до цревата, уробилиногенот повеќе не може да се формира и со тоа ниту еден уробилиноген не се излачува во урината.

Експерименти

Откривање на редуцирачки шеќери со реагенс Бенедикт

Внимание: Дисахаридите од типот трехалоза (на пр. Сахароза) не реагираат со реагенсот Бенедикт бидејќи ги изгубиле својствата на редукција.

Откривање на протеини со примерок од готвење и откривање на CaPO4 или CaCO3

Принцип на мерење:

Вриењето на урината ги денатурира протеините. Доколку се присутни протеини, треба да се појави заматеност. Овој примерок не е доволно чувствителен за да даде позитивна реакција со нормална содржина на протеини во урината. Ако урината се закисели по вриење, сите кристали на CaPO4 или CaCO3 ќе се растворат.

Сува хемија

Со помош на тест ленти, не само квалитативните, туку и квантитативните анализи сега можат да се вршат на едноставен начин. Соодветните реагенси се во сува форма на тест лентата (зона на реакција!).
Овие тест ленти се користат редовно, особено за статусот на урина.

Експеримент 1: статус на урина со употреба на тест лента
Експеримент 2: Квантитативно откривање на глукоза и АЛАТ (ГПТ) во крвта (рефлектометрија!)

Мерење на урична киселина во урината

Теоретски основи

Метаболизам

Кога ДНК и РНК се распаѓаат, се формираат пурини и пиримидини. Вториот може да се рециклира или воведе во Кребсовиот циклус преку ацетат. Телото на тој начин може да добие енергија од распаѓањето на пиримидините во мала мера преку оксидација во Кребсовиот циклус. Пурините не можат да се метаболизираат на ист начин. Тие се хидроксилирани и се излачуваат во урината како урична киселина.
Пурините се содржани во форма на ДНК во секоја клетка (освен еритроцитите!) И така се ослободуваат кога клетката умира. Исто така, внесуваме повеќе пурини секој ден со нашата храна (на пр. Преку консумирање месо, риба, чај, кафуле и сл.!). Трет извор на пурин е синтезата на ендогени пурини.
Со нормална исхрана, поголемиот дел од дневните пурини се рециклираат и се користат во новата синтеза на нуклеотиди. Концентрацијата на урична киселина во серумот зависи од стапката на производство или елиминација. Урична киселина се филтрира, се апсорбира и се лачи во бубрезите. Односот помеѓу лачењето и реапсорпцијата, како резултат, ја одредува ефикасноста на екскрецијата.

Растворливост на урична киселина

Кај многу цицачи (но не и кај луѓето) уриказата ја претвора уричната киселина во многу растворлив алантоин. Урична киселина таложи од вредност на сатурација од 400 mmol/L. Хиперурикемија може да доведе до гихт, што се манифестира со таложење на кристали на урична киселина во зглобовите, бубрезите и другите ткива.

Практичен експеримент

Принцип на мерење:

Ензимско дозирање според методот ПАП (пероксидаза/пара-амино-феназон).
Урична киселина се претвора во алантоин, H2O2 и CO2 од уриказата додека се трошат O2 и 2 H2O.
Урична киселина + O2 + 2 H2O ® алантоин + H2O2 + CO2 (уриказа)
Количината на формиран H2O2 е пропорционална на концентрацијата на подлогата. Намалувањето на H2O2 на 2 H2O со помош на пероксидаза е поврзано со оксидација на безбојна мешавина, која станува црвена. Фотометриски измерената концентрација на боја е пропорционална на концентрацијата на урична киселина во серумот.

Забелешки:

Womanена 90 - 360 mmol/L
Човек 150 - 480 mmol/L
Вредностите варираат со возраста; пристап на
Postените во пост-менопауза вредностите на мажите.

1,8 - 3,6 mmol/L/ден (на диета со низок пурин)
Со диета богата со пурини или болести со голема клеточна смрт (леукемија, ревматизам), екскрецијата на урична киселина може нагло да се зголеми.

Хиперурикемија се наоѓа кај 20% од возрасната популација. Сепак, само 5% од нив, исто така, покажуваат симптоми на гихт. Ова значи дека хиперурикемијата доведува само до гихт во ограничена мерка.
Разликуваме два вида хиперурикемија:

Примарна хиперурикемија како резултат на наследни нарушувања на пуринскиот метаболизам (биосинтеза или елиминација).
Секундарна хиперурикемија поради зголемено производство на пурин (леукемија, тумор), намалена екскреција на урична киселина (ренална инсуфициенција, интоксикација или лекови) или прекумерно внесување на пурини со храна.

Мерење на α-амилаза во серумот и урината

Теоретски основи

Резервирајте полисахариди

Во растителното царство, скробот е најважниот резервен полисахарид, во животинското гликоген. Двете се состојат од долги, разгранети ланци на глукоза. Скроб постои во форма на амилоза (растворлив во вода, не многу разгранет) или во форма на амилопектин (слабо растворлив, разгранет).
Кај луѓето, гликогенот се јавува првенствено во црниот дроб и мускулите. Неговата концентрација зависи директно од енергетската состојба во организмот.

α-амилаза

α-амилаза хидролизира а1,4 врски, ослободувајќи малтоза, малтотриоза или подолги олигосахариди. Α-амилазата е ендо-гликозидаза затоа што може да го нападне и исече гликогенот не само на крајните парчиња како егзо-гликозидазата, туку и помеѓу нив. Главно се синтетизира во егзокрините жлезди на панкреасот и во плунковните жлезди. Амилазата се создава и од црниот дроб, тенкото црево, бубрезите и разни карциноми.
Ниската концентрација на α-амилаза пронајдена во крвта е 40% од панкреасот. Нивното присуство е поврзано со погрешна базолатерална секреција на клетките на панкреатичната жлезда. Разликуваме два изоензими: панкреатичен и егзо-панкреатичен α-амилаза (инхибиција од моноклонални антитела!)
α-амилазата се филтрира во бубрезите (мала молекуларна тежина!), но дел од нив повторно се апсорбира.

Практичен експеримент

Принцип на мерење:

Како супстрат се користат синтетички олигосахариди кои претходно биле обележани со паранитрофенол. За да се заштити супстратот од α-глукозидаза, терминалниот шеќер се заменува со хидроксилните групи C4 и C6. Откако а-амилазата ќе го пресече подлогата за прв пат, вишокот на α-глукозидаза може потоа да го распадне подлогата понатаму и со тоа да го ослободи паранитрофенолот, кој може да се мери фотометриски.
Брзината со која се ослободува паранитрофенолот е директно пропорционална на концентрацијата на α-амилаза, бидејќи и подлогата и α-глукозидазата се присутни во вишок.

Мерење на апсорпција за 5 мин во интервали од 1 мин.
ΔE/min = просечно зголемување на концентрацијата во линеарниот опсег
U (mmol/min) = DE/min x 1135 (на литар серум)

Граници на мерење:

Стабилноста на подлогата и ензимите е ограничена. Мерењето е само линеарно помеѓу 5 и 2000 U/l.

Референтни вредности:

Референтните вредности зависат од употребената подлога, видот на маскирање на терминалниот шеќер и температурата на реакцијата. Затоа нема апсолутни стандардни вредности.

Серумски вредности: до 50 U/l
Вредности на урина: до 290 U/l

Мерењето на концентрацијата на α-амилаза во серумот, како и во урината служи за откривање на нарушување на панкреасот. Панкреатитис е акутно воспаление на панкреасот предизвикано од злоупотреба на алкохол или билијарна опструкција.

Во акутен панкреатит (лезија на клеточна мембрана) епителната бариера на клетките на жлездата се намалува. Тесните крстосници стануваат порозни. Α-амилазата влегува во крвта и се повеќе се излачува преку урината. Сепак, само 75% од пациентите со акутен панкреатит покажуваат зголемена концентрација на α-амилаза во крвта. Од друга страна, екскрецијата на урина е (скоро) секогаш зголемена, бидејќи тубуларната реапсорпција е инхибирана во панкреатитис и се излачува повеќе α-амилаза (зголемен клиренс на α-амилаза!).
Пост-акутно намалување на концентрацијата на α-амилаза во крвта може да укаже на некроза на панкреасот или излечен панкреатит.

Ако плунковните жлезди се воспалени (на пример, заушки), концентрацијата на α-амилаза во крвта е исто така зголемена. Или панкреасната или егзопанкреатичната α-амилаза може да бидат инхибирани за диференцијална дијагноза. Покрај тоа, други панкреасни ензими, исто така, се наоѓаат во високи концентрации во крвта кај панкреатитис.

Нови написи

Цитрат циклус: Скоро сите катаболни метаболизами-
процесите доведуваат до активирана оцетна киселина, ацетил-CoA. Потекнува од пируватот, кој доаѓа од гликолизата, за време на б-оксидацијата на масните киселини, како и при распаѓањето на многу аминокиселини. [продолжи]

Активности на серумски ензими: Мерењето на ензимската активност е важна алатка за откривање и следење на бројни болести-
Услови. Кај болести на црниот дроб, срцето и панкреасот се резултатите од ензимот-
прописите честопати се неопходни. [продолжи]

црн дроб: Фаза на апсорпција: апсорпција на храна-
супстанции, витамини и електролити.
(Предупредување: липидите влегуваат во телото преку торакалниот канал - хиломикрони!). Фаза на глад: исправена-
одржување на постојана внатрешна средина. [продолжи]