Потрошувачката на мајки на програми за рибино масло ја намали дебелината кај бројлерите

  • предмети
  • апстрактен
  • вовед
  • Резултати
  • Производство на јајца и состав на масни киселини во ткивото на пиле
  • Тежина на телото и таложење на маснотии
  • QPCR
  • Протеомика на маснотии
  • дискусија
  • Методи
  • Диети и став
  • Собирање крв и ткива
  • Серумски метаболити
  • Анализа на масни киселини
  • Анализа на фосфолипиди
  • Големина на адипоцит
  • Анализа на PCR во реално време
  • Протеомика
  • Статистичка анализа
  • Достапност на податоците
  • Променете ја историјата
  • благодарноста
  • Дополнителен електронски материјал
  • Дополнителни информации и податоци
  • Забелешки

предмети

  • Метаболизам на маснотии
  • транскрипција
  • Авторската корекција на овој напис е објавена на 27 јули 2018 година
  • Овој напис е ажуриран

апстрактен

вовед

Птиците нудат уникатен модел за специфично манипулирање со базенот на масни киселини доставени до ембрионот и за тестирање на ефектите врз таложењето на маснотиите по излегувањето (т.е. раѓање). Yолчката од јајце обезбедува најголем дел од масните киселини на ткивото во развој во ембрионот и еден до два дена по изведувањето, сè додека не престане хранењето. Профилот на масни киселини на жолчката од јајце може да се промени со изворот на маснотии во исхраната, ставен на располагање на кокошката 22, 23. На пример, комерцијалните јајца збогатени со EPA и DHA се прават со додавање на морски масла во исхраната со пилешко. Ние ја искористивме оваа врска за да ја тестираме хипотезата дека збогатувањето на ембрионот во EPA и DHA најдено во рибино масло (FO) го намалува таложењето на маснотиите кај пилињата. Пченкарно масло (СО) се користеше како референца бидејќи содржи споредлива количина PUFA (

60%), но првенствено оние од семејството n-6. На сите пилиња им беше дадена диета базирана на СО по ведење со цел да се ограничи експерименталната манипулација до периодот на развој на ембрионот. Покажуваме дека хранењето со мајки со ФО значително ја намалува дебелината по ведење без да влијае на растот. Нашите резултати сугерираат дека масните киселини во исхраната на мајката придонесуваат за развој на масното ткиво.

Резултати

Производство на јајца и состав на масни киселини во ткивото на пиле

Подмиривоста, тежината на јајцето и тежината на пилето во моментот на изведување се користеа за да се процени влијанието на храната за пилешко врз квалитетот на јајцето. Ниту една од овие особини не се разликуваше значително помеѓу јајцата од кокошки СО и ФО (П> 0,05). Композициите на масни киселини на фосфолипидите содржани во мозокот и црниот дроб беа профилирани и квалитативно споредени за да се потврди дека EPA и DHA се збогатени во ткиво од FO пилиња во споредба со CO кокошки кога се изведуваат. Мозокот и црниот дроб се користеле за нивната релативна маса кога се извеле. Нивоата на акумулација на видовите фосфатидилхолин (ПЦ) кои содржат ЕПА и ДХА се прикажани во Табела 1. Зголемувањето на преклопувањето (FO/CO) беше во опсег од

1, 2 (18: 0/22: 6 во мозокот) до

130,4 (ПК 18: 4/22: 6 во црниот дроб) со повеќе од двојно збогатување за повеќето видови. Овие податоци потврдуваат дека диеталниот профил на масни киселини на мајката во моментот на изведување се рефлектирал во составот на ткивната масна киселина на добиените пилиња.

Ефектот на изворот на масни киселини кај мајката врз составот на масни киселини при развој на масно ткиво беше квантифициран со употреба на GC-FID. Составот на масни киселини на вкупниот липиден дел од абдоминалното масно ткиво беше анализиран на возраст од 7 и 14 дена (Табела 2). Изобилството на ткиво од пет масни киселини (палмитолеинска киселина, γ-линоленска киселина, еикозеноична киселина, еикосадиеноична киселина и докосадиеноична киселина) се зголеми со зголемување на возраста (P-возраст 0,05). Сепак, релативната тежина на двете депоа беше различна за FO пилињата во споредба со CO кокошки (П.

мајки

Волумен и број на адипоцити кај кокошки и FO пилиња на возраст од 7 и 14 дена. Застапена слика и сликање на масно ткиво во абдомен од H&E од CO ( А., Б. ) и ФО ( Ц., Д. ) се користи за одредување на волуменот на маснотиите на 7 ( А., Ц. ) и 14 ( Б., Д. ) d се прикажани. Скала лента = 40 μm. Два слајда и три независни полиња на секој слајд беа изброени во три пилиња во секоја група на диети. ( Е. ) просечен волумен на маснотии (μm 3 × 10 4), ± SD; ( Ф. ) значи број на адипоцити (X 10 6), ± SD. Главните ефекти на диетата, возраста и нивната интеракција (диета на возраст) врз волуменот и бројот на адипоцитите беа утврдени со ANOVA. Значајни Ф-тестови (стр

рибино

Распределби на фреквенцијата на адипоцитната област (μm 2) на CO и FO пилиња на возраст од 7 години ( А. ) и 14 ( Б. ) Денови. Областите на маснотиите беа измерени од насликани слики со H&E и поделени во контејнери според големината. Средните фреквенции на ќелиите во секоја бин ± SD се прикажани и споредувани со Т-тест. * Различен од CO, P # различен од CO, P 0, 05). Црниот дроб е примарно место на де ново липогенеза кај птиците (како кај луѓето) 24 и игра важна улога во таложењето маснотии кај бројлерите 25. Диетата немаше значително влијание врз изразот на CPT1, ACOX1 и FASN во црниот дроб (3C), што е во согласност со споредливите нивоа на триглицериди во црниот дроб кај пилињата FO и CO (податоците не се прикажани).

потрошувачката

16 пати) во FO наспроти CO масното ткиво намалено. Овој ензим е дел од координиран систем на ДЕМ-деметилаза кој преку епигенетска модификација, 46 ја регулира судбината на клетките во ембрионот во развој. Изразот на APOBEC2 е првенствено поврзан со скелетните мускули, каде што е поврзан со диференцијација на миобластите, но исто така е изразен и во масното ткиво на кокошките 47. Ако мајчиното хранење со ФО ја намалува дебелината преку епигенетски механизми, кои често се стабилни, тоа има важни импликации за новите средства за контрола на детската дебелина (а можеби и возрасните). Потребни се понатамошни студии кои ги карактеризираат моделите на метилација и другите епигеномски карактеристики на мајчината FO исхрана за да се испита оваа можност.

Сумирајќи, нашите податоци покажуваат дека потрошувачката на мајчино рибино масло го намалува таложењето на маснотии кај потомството. Нашата студија беше ограничена на првите две недели од животот и потребно е да се направи последователно тестирање за да се утврди колку трае овој ефект додека зреат пилињата. Овие резултати ги надополнуваат неодамнешните човечки студии кои ги поврзуваат LC n-3 PUFA во мајчините диети со намалената масна маса кај децата. Соодветно на тоа, тие го потенцираат потенцијалот за намалување на акумулацијата на маснотии и веројатно ризикот од дебелина кај децата преку диететски интервенции пред раѓањето.

Методи

Диети и став

Собирање крв и ткива

Пилињата беа еутаназирани со задушување со CO 2. Две пилиња од секоја група беа еутанизирани на отворот за да се соберат црн дроб и мозок за анализа на липидите. Примероците од секое ткиво беа замрзнати и се чуваа на -80 ° С. Останатите пилиња биле еутаназирани на возраст од 7 и 14 дена. Во времето на еутаназија, крвта се собирала со срцева венипунктура и се пренесувала на 10 ml серумски цевки за раздвојување (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA). Серумот беше одделен со центрифугирање и се чуваше на -80 ° C до анализа на циркулирачките метаболити. Абдоминалните и феморалните (поткожни) масни наслаги беа подготвени и измерени како индикатори на дебелина. Примероците од секое депо и црн дроб потоа беа замрзнати во течен азот и се чуваа на -80 ° С. Примероци на абдоминално масно ткиво беа фиксирани во параформалдехид (4%) 24 часа на 4 ° C за да се одреди големината на адипоцитите со хистологија.

Серумски метаболити

Комерцијално достапни комплети со колориметриски анализи беа искористени за мерење на серумската глукоза (Кајман Хемикал, Ен Арбор, МИ) и нестерифицирани нивоа на масни киселини (НЕФА) (Вако Хемикалис, Нојс, Германија).

Анализа на масни киселини

Анализа на фосфолипиди

Големина на адипоцит

Примероци од стомачни маснотии од три птици по добиточна храна на секоја од двете возрасти беа вградени, пресечени и обоени со хематоксилин и еозин (H&E; два слајда/птица) за определување на големината на масните клетки, како што е претходно опишано во 53. Користени се трите птици со резултат на дебелина најблиску до просечната дебелина во рамките на секоја диета/возрасна група. Накратко, на секој слајд беа снимени слики од три независни полиња под слајд со зголемување од 20X со помош на микроскоп EVOS XL Core на Напредната група за микроскопија (Фишер Сајеншл, Питсбург, ПА). Истата личност ги презела сите мерења за постојаност. Слика J (верзија 1.48, Национален институт за здравство) беше искористена за да се одреди адипоцитната област (μm 2) со употреба на поставки на микроскоп од 2,8 μm/пиксел и со ограничување дека мерењата мора да надминат 500 μm 2. Распределбите на фреквенцијата беа генерирани со групирање на адипоцитите во корпи засновани врз областа и броење на фреквенцијата на клетките во секоја корпа за отпадоци. Користена е стандардна процедура за пресметување на волуменот на адипоцитите и бројот 68.

Анализа на PCR во реално време

Користејќи Инвитроген ™ ТРИзол ™ (Инвитроген, Карлсбад, Калифорнија), вкупната РНК беше изолирана од приближно 200 мг абдоминално масно ткиво и црн дроб на пет 14 дневни пилиња во секоја диетална група. Користени се петте птици со резултат на дебелина најблиску до просечната дебелина во рамките на секоја диета. ЦДНА е направена од 500 ng вкупна РНК во 20. l Реакции синтетизирани со помош на iScript cDNA Синтезички комплет (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA). Монтажни и валидирани прајмери ​​за квантитативно PCR во реално време (QPCR) се добиени од Qiagen (Quantitect; Germantown, MD). QPCR беше извршен во три примерока за секој примерок со употреба на iQ SYBR Green Master Mix (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) како што е претходно опишано 53. Нивото на изразување на гените од интерес беше нормализирано во изразување на семејството на доменот TBC1, член 8 (TBC1D8), кое се користеше како домаќинка.

Протеомика

Статистичка анализа

Статистичките проценки беа извршени со САС (V 9.4). Податоците беа проверени за нормалност пред статистичкиот тест со Шапиро-Вилкс. Тежини на тела и маснотии, метаболити во серумот, состав на масни киселини во ткивата, просечна големина на маснотии и број на адипоцити беа анализирани со помош на мешан модел ANOVA со термини за диета, возраст и нивна интеракција (диета X-возраст). На значајни Ф-тестови (Р 74 за нормализирање на дистрибуцијата на податоците. Функционална анализа на диференцијално изобилство на протеини беше извршена со користење на опциите за функционално прибележување и мапирање на патеки што се наоѓаат во базата на податоци за коментари, визуелизација и интегрирано откривање (DAVID, V 6.8) 75. Сите статистички беа извршени тестови со употреба на P-вредности ≤ 0,05 како критериум за статистичко значење.

Достапност на податоците

Групите на податоци генерирани за време на тековната студија се достапни од соодветниот автор по разумно барање

Променете ја историјата

благодарноста

Оваа работа беше поддржана со финансирање на BHV од Центарот за извонредност во болести на добиток и здравје на луѓето, колеџ за ветеринарна медицина на Универзитетот во Тенеси и од AgResearch, Земјоделски институт на Универзитетот во Тенеси. Авторите би сакале да ја признаат лабораторијата за истражување на метаболомиката Кек, Државниот универзитет во Ајова, за анализите на масни киселини и да му се заблагодарат на д-р Мајкл О.Смит и др. Ayеј Вилан за нивниот придонес во проектот.

Дополнителен електронски материјал

Дополнителни информации и податоци

Забелешки

Со поднесување коментар, вие се согласувате со нашите услови за користење и упатствата за заедницата. Ако најдете нешто навредливо или што не е во согласност со нашите услови или упатства, означете го како несоодветно.