Вирус на хуман херпес (HHV) ДНК тип 6 (крв, CSF) - Синево
Генерални информации
Хуман херпесвирус тип 6 - хуман херпесвирус 6 (HHV-6) - беше изолиран во 1986 година од Салахудин и сор. . Припаѓа на подфамилијата на β-херпесвирусите, родот Розеоловирус и е опишан во две варијанти: А и Б. ХХВ-6Б е главниот агенс вклучен во етиологијата на кожата - егзантема субитум (розеола инфантум или 6-та детска болест) - кај додека HHV-6A е откриен главно кај имунокомпромитирани домаќини 2 .
HHV-6 е ДНК вирус, неговиот геном е опкружен со липидна обвивка. Како и кај другите вируси на херпес, HHV-6 предизвикува и примарни инфекции и реактивирање на латентни инфекции. .
HHV-6 е секаде широко распространет, со 95% од популацијата има анти-HHV-6 антитела; Вирусот генерално се пренесува преку плунката на заразените лица.
In vivo, HHV-6 инфицира и реплицира во CD4-позитивни лимфоцити преку CD46 клеточниот рецептор, што е 52-57kDa трансмембрански гликопротеин, кој е во интеракција со вирусни гликопротеини: gH, gL, gQ1 или gQ2.
За време на акутна инфекција, репликацијата се јавува кај лимфоцитите (Б, Т, НК), макрофагите, хистиоцитите, ендотелните клетки, хепатоцитите, плунковните жлезди и централниот нервен систем. HHV-6A претежно ги инфицира нервните клетки, додека HHV-6B почесто се наоѓа во периферните крвни мононуклеарни клетки. Вирусот произведува директна цитолиза, овој ефект е одговорен за манифестации на кожата и слични на инфективна мононуклеоза. HHV-6 го зголемува изразот на CD4 на површината на Т-лимфоцитите што доведува до зголемена подложност на ХИВ инфекција.
Примарната инфекција се јавува, по период на инкубација од 1-2 недели, обично кај доенчиња (40 - 50% од децата заболуваат од првата година од животот, процентот на заразени достигнува 77 - 82% на возраст од 2 години)., со врв помеѓу 9 и 21 месец) и е одговорен за една третина од случаите на фебрилни напади кај деца на возраст од 6-24 месеци. Приближно 25% од HHV-6 инфекциите се манифестираат како егзантема субитум (розеола инфантум), се карактеризира со висока температура која трае 3-4 дена, проследена со осип на макулата или макулопапулата, кои се јавуваат кога температурата ќе се нормализира. Осипите започнуваат од трупот или вратот, се шират на лицето и екстремитетите и траат помеѓу неколку часа и 2 дена. Болеста исто така може да биде придружена со: кашлица, цервикална или окципитална лимфаденопатија, раздразливост, конјунктивитис, едем на очните капаци, издаденост на фонтана, ринореја или дијареја. Клиничките манифестации траат во просек 9 дена и ретко се комплицираат со менингитис или енцефалитис.
HHV-6 е ретка причина за менингитис; вирусот исто така може да предизвика енцефалитис кај навидум здрави деца со нарушена свест, напади, психоза или парализа на кранијалните нерви. Во повеќето случаи, паненцефалијата може да биде поврзана со постојани невролошки последици 2. HHV-6 ДНК е откриена кај ЦСФ кај 57% од децата 1 .
Акутната инфекција со HHV-6 е ретка кај имунокомпетентни возрасни лица и може да се манифестира како синдром сличен на инфективна мононуклеоза со треска, лимфаденопатија, генерализиран осип, фулминантен хепатитис, тромбоцитопенска пурпура, миокардитис или енцефалитис.
По примарната инфекција, вирусот останува латентен кај лимфоцитите и моноцитите, опстојува на ниско ниво во разни клетки или ткива и може повторно да се активира кога имунитетниот систем е компромитиран. Кај имунокомпетентни лица, оваа постојана инфекција нема никакви последици.
Реактивирање на HHV-6 е честа манифестација кај имуносупресивни лица (50% од пациентите со трансплантација на матични клетки во хематопоет и 33% од оние со трансплантација на цврсти органи), а вирусната ДНК може да се открие во периферната крв. Реактивациите се јавуваат во првиот месец по трансплантацијата и се почести кај пациенти третирани со анти-ЦД3 антитела или кортикостероиди или кај оние кои биле подложени на алогена трансплантација или матични клетки на папочна врвца. Пациентите често се манифестираат со треска и осип во раниот период по трансплантацијата. HHV-6 ги инфицира хематопоетските прогениторни клетки со инхибиција на формирање на колонија in vitro и е поврзан во некои студии со супресија на коскена срцевина и доцна калемење. 95% од вирусните реактивации кај пациенти со трансплантација на хематопоетски матични клетки се должат на HHV-6B.
Најдобра документирана манифестација кај имуносупресивни пациенти е енцефалитис. Тие се јавуваат во интервал од 2-6 недели по трансплантацијата со главоболка, конфузија, конвулзии, психози или недостатоци на кранијалните нерви. Додека КТ испитувањето обично е нормално во почетната фаза, МНР укажува на абнормалности во сивата материја во темпоралните лобуси кај 75% од пациентите. Позитивната дијагноза е утврдена врз основа на присуството на вирусот во цереброспиналната течност.
Исто така, се забележани случаи на пациенти со џиновски клетки поврзани со HHV-6, колитис и гастродуоденитис кај пациенти со трансплантација.
HHV-6 е поретко вмешан во енцефалитис и пневмонија кај пациенти со СИДА и не се смета дека влијае на стапката на прогресија на ХИВ инфекцијата до фазата на СИДА.
HHV-6 е поврзан со мултиплекс склероза заснована на откривање на ДНК и вирусни антигени во CSF и мозокот. Така, ХХВ-6 е пронајден во јадрата на олигодендроцитите кај лезиите на пациенти со мултиплекс склероза, а истражувачите откриле силна поврзаност помеѓу присуството на анти-ХХВ-6 IgM антитела во цереброспиналната течност и раните фази на мултиплекс склерозата. Некои тврдат дека вирусната инфекција игра важна улога во патогенезата на болеста, преку молекуларна мимикрија, при што вирусните протеини реагираат напречно со основниот протеин на миелинот. Сепак, потребни се дополнителни истражувања за целосно да се дефинира улогата на HHV-6 кај мултиплекс склерозата 2. .
Позитивната дијагноза на примарна инфекција може да се демонстрира со сероконверзија на IgG антитела од негативно на позитивно или со присуство на IgM антитела. Зголемувањето на титарот на IgG антитела 4 пати укажува на активна болест. Сепак, серолошката дијагноза не може да разликува примарна инфекција од реактивирање. Алтернативен метод за дијагностицирање е откривање на вирусна ДНК во серумот или плазмата пред да се појават антитела, но овој метод е помалку специфичен од сероконверзијата.
Кај имунокомпромитирани лица, важно е да се направи разлика помеѓу латентна инфекција (без клинички манифестации) и реактивирање, што може да се постигне со утврдување на вирусна ДНК во плазмата 2. .
Препораки за одредување на HHV-6 - ДНК - корисно при брза дијагностика на HHV-6 инфекции 4 .
Обука на пациентот - не е потребно 3 .
Примерок собрани - а) крв ќе дојде; б) цереброспинална течност собрана со лумбална пункција 3 .
Контејнер за берба - а) правосмукалка што содржи ЕДТА како антикоагуланс; б) стерилен контејнер со CSF 3 .
Количината собрана - а) онолку колку што дозволува вакуумот; б) минимум 2 mL 3 .
Потребна е обработка по бербата - а), б) доказите не ќе се центрифугира 3 .
Причини за одбивање на доказите - а) стари, коагулирани, хемолизирани примероци; употреба на хепарин како антикоагуланс 3 .
Стабилност на тестот - примероците од крв или CSF се стабилни 1 недела на 2-4 ° C 3 .
Метод - PCR Light-Cycler во реално време: реакција на полимеризација со синџири со откривање на акумулираниот PCR производ во реално време, со мерење на емитираната флуоресценција (тестот ќе се изврши од плазма или CSF) 3 .
Референтни вредности - HHV-6 незабележлива ДНК 3 .
Граница за откривање - 10 деца/примерок 3 .
Интерпретација на резултатите
Добивањето позитивен резултат за HHV-6 плазма ДНК, во присуство на клиничка слика, е индикатор за активна инфекција.
Откривањето на HHV-6 ДНК во цереброспиналната течност сугерира на инфекција во централниот нервен систем, но нема апсолутна дијагностичка вредност (може да има HHV-6 ДНК во CSF и други состојби на ЦНС кои не се поврзани со овој вирус; исто така може да се открие и кај пациенти без невролошки синдроми) 1; 2; 4 .
Граници и пречки
Негативен резултат не ја исклучува инфекцијата со HHV-6 4 .
Корисноста на PCR-тестот за дијагностицирање на инфекции со HHV-6 е комплицирана од фактот дека HHV-6 е интегриран во хромозомската ДНК кај 0,7-1,5% од луѓето. Матичните клетки кои содржат вградени копии на HHV-6 пренесуваат вирусна ДНК до примателите на трансплантација. Поради оваа причина, ако анализираниот примерок содржи леукоцити, можно е да се добие позитивен резултат во отсуство на активна инфекција 2 .
1. Гај Боивин. Дијагноза на инфекции со херпесвирус на централниот нервен систем. Во ХЕРПЕС 11, Додаток, 2004 година.
2. ffефри И. Коен, хумани херпеси со типови 6 и 7. Во Мандел, Даглас и Бенет, принципи и практика на заразни болести, 7-то издание, Черчил Ливингстон, Елзевиер, 2010, 2011-2014.
3. Лабораторија во Синево. Специфични препораки на користената технологија за работа 2015 година. Ref Type: Каталог.