Детска лабораториска дијагностика
1 Детска лабораториска дијагностика Т. Туласеј
2 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во периодот на постнатална адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
3 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во периодот на постнатална адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
4 крвни серуми, плазма крвни клетки супстанции за лабораториска дијагностика еритроцити, (Hb) леукоцити и други нуклеарни клетки (мембрански маркери, ДНК) ретикулоцити коскена срцевина столица на урина CSF ткиво на амнионска течност, (со биопсија, итн. (Земање примерок од хорионски ресички)
5 Клиничко-хемиска анализа со употреба на различни методи (фотометрија, ензимско одредување, хроматографија, масена спектрометрија и сл.) Микробиолошки прегледи, класичен метод, масена спектрометрија, молекуларно-биолошки методи
6 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во периодот на постнатална адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Туморски маркери 10. Генетски дијагностички можности
7 Пренатална дијагностика и превенција Општи услови каде што е неопходен скрининг Генетски заболувања, стекнати ензимопатии Метаболни заболувања Хромозомски абнормалности Болести на мајката кои влијаат на фетусот (дијабетес, хипертензија, итн.)
8 Пренатална дијагноза и превенција Медицински средства Ултрасонографија (анатомски аномалии) Инвазивните прегледи на пренаталната дијагноза вклучуваат: амниоцентеза, земање примероци од хорионски ресички и хордоцентетеза (пункција на папочната врвца), абнормалност на хромозомите, биохемиски заболувања и ДНК, клетки на матката од прстенот на матката, матката од матката, матката на матката, матка, матката, матката, матката, матката и матката мајчинска крв (слободна ДНК на фетусот). Мајките може да имаат странски клетки од претходната бременост)
10 Нормална слика на хромозомот
13 α-фетопротеин, некоњугиран естриол, вкупен хуман хорионски гонадотропин (HCG), слободна β-поддиница на HCG, инхибин А и плазматски протеин поврзан со бременост А. AFP, некоњугиран естриол, HCG, инхибин-слободна β-под-единица на HCG, PAPP-A, HCG, мерење на густината на вратот Tr. + Инхибираат А AFP, некоњугиран естриол, HCG
14 Практични информации Скринингот на првиот триместар се изведува на крајот на првото трето тримесечје од бременоста, во период помеѓу 11 недели +0 дена до и вклучително 13 недели +6 дена. PAPP-A е значително позначајно во 10 недели и порано (8-9 недели) отколку во 13 недела. Спротивно на тоа, бесплатниот β-hcg во 11 недела има помала информативна вредност, што се зголемува само во следните недели од бременоста, со оптимал во 2-ри триместар (од 14 недели).
15 причини за употреба на инвазивни методи за пренатална дијагноза се: абнормални наоди од мерење на густината на вратот и/или комбиниран тест, абнормални откритија во ултразвучни нарушувања на растот (особено во вториот триместар од бременоста) хромозомски промени во семејството или, во претходната бременост, генетски болести или предиспозиции кај крвни сродници Семејно високо ниво на антитела во крвта кај резус-негативна бремена жена
16 Важен протеин - AFP Alpha-1-Fetoprotein (AFP), исто така Alphafoetoprotein или α 1 - Foetoprotein, е гликопротеин кај цицачи, кој за време на развојот на човечкиот ембрион за време на бременоста од ендодермалното ткиво и феталниот црн дроб, или кај возрасните особено се формира во туморските клетки на црниот дроб. Физиолошки, алфа-1 фетопротеинот има функција на фетален транспортен протеин, кој особено пренесува бакар, никел, масни киселини и билирубин во крвната плазма на фетусот.
17 Многу високи концентрации на AFP во мајчината крв или во амнионската течност се индикација за оклузивни дефекти кај нероденото дете. Овие вклучуваат дефекти на абдоминалниот wallид како што се омфалоцелата и гастрошизата и дефекти на невралната туба, како што се спина бифида и аненцефалија. Кај мажи и небремени жени, високата концентрација на AFP може да укаже на активен хепатитис, цироза на црниот дроб и карцином на клетките на црниот дроб. Ниските вредности на AFP помеѓу 14-та и 20-та недела од бременоста се показател на Даунов синдром (трисомија-21) кај нероденото дете.
18 Трисомија 18, синдром на Едвардс Преваленце: 1/6,000 Ниска родилна тежина Затворена тупаница Мал колк, со ограничен абдомен Кратка градната коска Микроцефалија Истакнато тилот Микрогнација Срце, малформации на бубрезите Ментална ретардација Долниот ѓон на ногата 95% умира
20 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во периодот на постнатална адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
21 Проценка на кардио-пулмоналната адаптација на кислородниот притисок (po 2) наспроти заситеноста на кислород киселинско-базната рамнотежа Ht
22 Фетална и неонатална циркулација
23 Физиолошка регулатива за запомнување на Хипоксија, ЕТ, ЛТ, НЕ, ПГИ 2, белодробната циркулација кај фетусот е мала, постепено зголемување до 25% од срцевиот излез (СО) се случува околу 40-тата недела од бременоста. На белодробниот отпор влијае влијанието на соработката на мазните мускули на ендотелот (автокрино-паракрино регулирање).
25 Алвеоларна хипоксија и пулмонална циркулација: алвеоларна po 2 контракција на малите артериоли. Опструкција на дишните патишта. Шантирање Ако> 20%, пулмонална хипертензија. Циркулус витизус. Паулев-Зубиета: Нова човечка физиологија
26 Однос на алвеоларна вентилација (V A) и перфузија (П) Физиолошка = 1,0 Паулев-Зубиета: Нова човечка физиологија
27 Киселинско-базна рамнотежа (SBH) ph: 7,35-7,40 При pH = 7,40 H + концентрација, 40 nmol/l Na + = 140 mmol/l (1,0 милиони x поголема концентрација) ph = 6, 1 + дневник HCO 3/CO 2 Хендерсон-Хаселбалч
30 Баланс преку три одбранбени механизми Прва линија: Хемиски тампон системи Втора линија: Респираторен механизам (промени во уметноста. CO 2) Трета линија: Бубрежна компензација (промени во HCO 3 - екскреција)
31 Дистрибуција на вкупниот тампон систем Небикарбонаттен тампон систем 47% Бикарбонат пуфер 53% Hb и OxyHb 35% плазма бикарбонат 35% органски фосфати 3% еритроцитен бикарбонат 18% неоргански фосфати 2% плазма протеини 7%
33 катјони анјони Натриум Калиум калциум хлорид хлорид бикарбонат фосфат сулфат плазма интерстицијален флуид интрацелуларен флуид плазма интерстицијален флуид интрацелуларен течен органски киселини протеини 100% 80% 60% 40% 20% 0% катјонски анјони
34 Регулирање на течниот простор ICV ECV PV ISV волумен
35 Регулирање на волуменот на клетката преку транспорт на јони ECF осм H 2 O Na K H 2 O ECF осм NaCl H 2 O KCl H 2 O
36 Ракување со бубрежен бикарбонат
38 Опции за компензација во различни киселинско-базни промени Промена Очекувана компензација Метаболна ацидоза Pco 2 = 1,5 [HCO 3] + 8 ± 2 Метаболна алкалоза Респираторна ацидоза Акутна хронична респираторна алкалоза Акутна хронична Pco 2 се зголемува за 7 mm Hg за секои 10 meq/l зголемување на серумот [HCO 3] [HCO 3] се зголемува за 1 за секои 10 mmhg зголемување на Pco 2 [HCO 3] се зголемува за 3,5 за секои 10 mmhg зголемување на Pco 2 [HCO 3] се намалува за 2 ме/l за секои 10 mmHg намалување на Pco 2 [HCO 3] се намалува за 4 за секои 10 mmHg намалување на Pco 2
39 Понатамошни лабораториски параметри во постнаталниот период на адаптација Ht: 0,60-0,65 полиглобулија (синдроми на хипервискозитет) HbF наспроти HbA хипербилирубинемија гликоза - хипогликемија
41 Интензивна спектрометрија на маса Што е тоа? Јонизациски молекули во кондензирана фаза + + анализа на маса на маса на полнеж Јони во фаза на гас Јони во маса/полнеж на гасна фаза
42 Интензитет Масениот спектар Молекуларен јон со едно полнење + Молекуларен јон со две полнења Адукција со еден полнеж Концентрација! Молекуларна маса! Маса/полнење
43 43 Тандем масовен спектрометриски скрининг според вашите податоци, Профил на аминокиселина cps + NL (102,00): Истек 2, до минута од примерокот 90 (примерок279) на DataSET4.wiff (турбо спреј) e4 8,0e4 7,5e4 7,0e4 6,5e4 6,0 e4 5.5e4 5.0e4 4.5e4 4.0e4 3.5e4 3.0e4 2.5e Макс.8.4e4 cps. Дефект на метаболизмот на аминокиселини, фенилкетонурија бетогесие (MSUD) тирозинемија I и II аргининосукцината синтаза и недостаток на лага, хомоцистинурија, некетотична хиперглицинемија, дефект на микрокондријален циклус на уреа, во делот на микрокондријална маана, cps 2.0eeem/z. мин од примерок 90 (примерок279) на DataSET4.wiff (турбо спреј) Макс.2.1e4 cps e4 2.0e4 1.9e4 1.8e4 1.7e4 1.6e4 1.5e4 1.4e e4 1.2e4 1.1e4 1.0em/z, дефект на оксидација на масни киселини во амбиент szénláncú (SCAD) közép sézénláncú (mcad) hosszú szénláncú hidroxi-acil (lchad) nagyon hosszú sézénláncú (VLCAD) többszörös (MADD нејасен GAII) КАРИТИН ПАЛИТИ ) Органска ацидурија б-котиотилаза на глутарсав ацидемија (GA-I) izovaleriánsav acidémia (IVA) metilmalonsav acidémia (MMA) propionsav acidémia (PA) 3-хидрокси-3-метил-глутарил-CoA. 3-хи-хил-хил-хилати -CoA karboxiláz hiány (ССК)
44 галактоземија, хипотироидизам, недостаток на биотинидаза, фенилкетонурија, + 22 ретки болести на метаболизам на аминокиселини, оксидација на масни киселини и органска ацидурија (МС-МС)
45 PKU. Вродени дефекти на ензимите
46 Основни прегледи во случај на сомневање за неврометаболна болест 1. Материјален преглед/параметри Откриено нарушување во случај на абнормални откритија Гликоза во крвта, електролити Хипогликемија, нарушувања на електролитите Лактат, BGA AST, ALT, гамагт, амонијак креатинин, уреа, урична киселина аминокиселини, хомоцитистин, хомокаститин Размаска на крв (вакуолизирани лимфоцити, акантоцити) енергетски нарушувања, ацидоза, алкалоза хепатопатија, дефект на нефропатија на уреа циклус, нарушувања на метаболизмот на пурини нарушувања на метаболизмот на протеините, Органоацидопатии Нарушувања на оксидација на масни киселини Мускулни нарушувања по напад Нарушувања на гликозилација Ерозија на складирање,
47 Основни прегледи во случај на сомневање за неврометаболна болест 2. Испитување на материјал/параметри Докажано нарушување во случај на абнормални откритија Тела на кетонски тела Урина зголемена оксидација на масни киселини (на пр. За време на гладување), нарушување на распаѓање на кетонски тела Органски киселини Мукополисахариди, олигосахариди, сијална киселина, сулфатиди, органопатија, органопатија Количник на алкохол/плазма) Аминокиселини (Пијалок/количина на плазма) Невротрансмитер Метитетрахидрофолат Дефект на транспорт на глукоза (GLUT1) Специфик. Аминоацидопатии Невротрансмисие нарушување
48 Хемоксигеназа 1. Зголемено формирање на Хб хем Биливердин билирубин-албумин Слободен билирубин Глукуронил трансфер Биливердин редуктаза Не-конјугиран билирубин + лигандин БДГ Новороденчиња: умол/кг/24 ч Возрасни умол/кг/24 ч 2. Недоволна апсорпција БМГ 3. BMG BDG Не-конјугиран билирубин 4. Зголемена ентеро-хепатална циркулација
49 Неонатална холестаза Интрахепатична болест Оштетување на хепатоцитите Оштетување на билијарен тракт Екстрахепатично заболување: оштетување на билијарен тракт или опструкција Билјарна атрезија Метаболна болест Вирусна инфекција Интрахепатична билијарна штета. Опструкција.
50 Мекониум Привремено движење на дебелото црево
51 Дефекација во мајчино млеко Ахолични движења на дебелото црево
53 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во периодот на постнатална адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции (неопходна е клиничка слика + дијагностичка опрема) 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
54 Сомнителна инфекција. Клинички симптоми Треска Циркулаторни промени Тахипнеа, апнеа Цијаноза ЦНС Симптоми летаргија апатија бесвест Кома напад Jaолтица анемија Крварење Тромбоцитопенија Олигурија, анурија
55 Дијагностика на инфекции Статус на урина Крвна слика со диференцијална крвна слика CRP, Прокалцитонин Брис од грло Крвни култури Лумбална пункција Примерок од ацетон во урина УТИ, нефритис Леукоцитоза, леукопенија, лева смена,> 15,000/ul, 56 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагностика во постнаталниот адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
57 ЕНЗИМЕ ОРГАНСКО БОЛЕСТ Полувреме на алфа-амилаза панкреас, плунка Акутен панкреатит 9-18 ч Аланин аминотрансфераза (АЛТ или ГПТ) Црн дроб Уништен паренхим на црн дроб 50 ч Аспартат аминотрансфераза (АСТ или ГОТ) Црн дроб, мускули, срцеви нарушувања на црниот дроб панкреас -Болести h Алкална фосфатаза (АЛП) црн дроб, коски, бубрези, параметри на цревната коска, холестаза, опструкција на билијарниот тракт, хепатобилијарни заболувања 3-7 дена црн дроб холинестераза (CHE) Уништен паренхим на црн дроб 10 дена глутамат дехидрогеназа (ГЛД) црн дроб Тешка болест на паренхим на црниот дроб h Гама глутамил трансфераза (GGT) холестаза на црниот дроб, опструкција на билијарниот тракт, хепато-билијарни заболувања 3-4 дена Лактат дехидрогеназа (LDH) црн дроб, срце, мускули, еритроцити, тромбоцити, лимфни јазли, паренхима на црниот дроб, миокарден инфаркт, хемолиза, неефикасен ерит 4-10 ч
58 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во периодот на постнатална адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
59 Креатинин во крвта или серумот Уринарен креатинин, електролити на глукоза, протеински билирубин, UBG, крв Дисасоцијацијата помеѓу двата параметри може да значи катаболизам Транспортни механизми FE Na = U Na * P Cr P Na * U Cr x100 Микроскопски преглед на урина
60 еритроцити фрлаат хемоглобин леукоцитурија, бактериурија леукоцити
61 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во периодот на постнатална адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
62 Број на еритроцити Hb Ht MCV MCH MCHC Најчести прегледи Ретикулоцити Серумско железо, феритин, трансферин Број на леукоцити, крвна мачка Размаска на коскена срж Hb електрофореза
63 Лабораториска дијагностика на микроцитна анемија Размаска од крв (внимавајте на целните клетки, инфективните клетки) Серумско железо; ако нема дијагноза, тогаш феритин (трансферин); ако нема дијагноза, тогаш електрофореза на Hb; ако нема дијагноза, тогаш намачкајте коскена срцевина
64 Диференцијална дијагноза на микроцитна анемија Болест/критериум инфекција со дефицит на железо/тумор Сидеробластична анемија целни клетки не не не да Да MCV/RBZ> 13> 13> 13 65 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во постнаталниот период на адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
66 Постојат малку лабораториски маркери специфични за болести за гастроинтестинални заболувања. Кај синдромите на малапсорпција, се јавува дефект на реапсорпција (на пример, недостаток на железо). Хронично воспаление на цревата во Hb и Fe се намали, IgG и CRP се зголемија, леукоцитоза со поместување налево, тромбоцитоза во столицата: калпротектин специфично, доаѓа од леукоцити) Кај имунолошки заболувања како што се целијачна болест ИгА антитела против глијадин ИгА антитела против трансглутаминаза
67 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во периодот на постнатална адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
68 Најчести хемато-онколошки заболувања кај деца 0-4 години 5-9 години години Леукемија Леукемија Ретинобластом Ретинобластом Невробластом Неуробластом Вилмов тумор ЦНС тумори Хепатобластом ХЦЦ ХЦЦ Тератома ЦНС тумори Остеосарком Рабдомиосарком Јуинг сарком СНС тумори Лаксемија на сандом СНС тумори
69 Најчести haemato-онколошки заболувања кај деца 0-4 години 5-9 години години Тумор маркери тумор леукемија леукемија Ретинобластом Ретинобластом неуробластом неуробластом NSE Wilm-ов Хоџкинов лимфом хепатобластома HCC HCC АФП тератома рабдомиосаркома Ewing сарком CNS тумори на ЦНС тумори на ЦНС тумори на ЦНС
70 Содржина 1. Општи забелешки 2. Пренатална дијагноза 3. Лабораториска дијагноза во периодот на постнатална адаптација. Новороденчиња 4. ЦНС и дијагностика на инфекции 5. Хепатологија 6. Нефрологија 7. Хематологија 8. Гастроинтестинални заболувања 9. Тумор маркери 10. Генетски дијагностички можности
72 Нормална слика на хромозомот
75 Различна големина (kb) Алел: варијација на генот на одредено место на хромозомот Диплоид: ген на хомологниот хромозом има две копии во соматските клетки. Мутацијата на анелот Ензимдефек поврзана со фенотипот може да биде или доминантна или рецесивна. Доминантен алел работи кога има само еден алел. Рецесивните алели можат да работат само во парови.
76 SNP: променета низа на базни парови. На пр.: AAGCCTA наспроти AAGCTTA Оваа варијација може да ја разгледа СНП само ако се појави кај 1% од популацијата. СНП се појавува 1 пат во 300 нуклеотиди. Како резултат, 10 милиони СНП можат да бидат присутни во човечкиот геном. За што служат тие? 1. Биолошки маркери (истражување на гени). 2. Ако СНП се појави во генот или во регулаторниот регион близу до генот, може да ги промени генските производи (протеини).
78 Вообичаени генетски мутации идентификувани преку GWAS. Извор: Каталог на објавени GWAS на NHGRI
79 Егзоните се поврзани со непреведени региони, (UTR). Во геномот на човекот, cc. 180 000 егзони да се најдат. Тие претставуваат 1% од ДНК, 30 мега-бази.
80 Редоследување на егзомот (насочено фаќање на егзомот, секвенционирање на новата генерација (НГС)). Ефективна стратегија само за да се одреди редоследот на гените за кодирање. Алтернатива на GWAS
81 2 елементи на епигенетскиот код ДНК метил азион. Метил групите инхибираат активирање на генот за модификација на хистонот.