Фамилијарна аденоматозна полипоза-АПЦ мутации - Синево
Генерални информации
Семејна аденоматозна полипоза (FAP), иако ретка состојба, е најчестиот синдром на аденоматозна полипоза. Има автосомно доминантно пренесување и се карактеризира со рана појава на стотици или дури илјадници аденоматозни полипи дисеминирани низ дебелото црево и ректумот. Во отсуство на третман со PAF, тој постојано преминува во рак на дебелото црево на возраст од 35-40 години. Покрај тоа, постои зголемен ризик за други малигни заболувања.
Инциденцата на ПАФ е постојана ширум светот и варира од 1: 6000 до 1: 12000 раѓања, а и двата пола се подеднакво вклучени.
Генетскиот дефект во PAF е претставен со мутација на микробната линија во генот APC (аденоматоза полипоза коли), ген за супресија на туморот лоциран на долгата рака на хромозомот 5, лента q21. Се состои од 15 егзони и кодира протеин со висока молекуларна тежина (309 kDa). АПЦ протеинот има неколку домени кои ја посредуваат олигомеризацијата, но исто така и интеракцијата со различни интрацелуларни протеини, кои играат важна улога во клеточната адхезија, трансдукцијата на сигналот и активирањето на транскрипцијата. Студиите извршени и ин витро и кај животински модели (со употреба на глувци) покажаа дека АПЦ е исто така вклучен во усогласувањето на хромозомите во метафазата, клеточната миграција и промовирањето на апоптозата во клетките на дебелото црево .
АПЦ е класичен протеин супресор во туморот кој игра централна улога во патеката за сигнализација Wnt, делумно со регулирање на деградацијата на β-катенин. Сигналите пренесени преку патеката Wnt влијаат на стабилноста на протеинскиот комплекс, кој содржи β-катенин, спроводник и GSK3 (гликоген синтетаза киназа). Во отсуство на Wnt или во присуство на диви тип АПЦ протеин β-катенинот се деградира во протеазомот со процес посредуван од убиквитин. Во присуство на Wnt или недостаток на APC (како и во повеќето форми на рак на дебелото црево), се изразуваат таргените гени на β-катенин, вклучувајќи го и c-MYC. Експресијата на генот MYC ја зголемува експресијата на полиамин-орнитин декарбоксилаза (ODC), што е протоонкоген. Така, генскиот производ АПЦ индиректно ја регулира транскрипцијата на голем број критични гени вклучени во пролиферацијата на клетките преку интеракција со факторот на транскрипција на β-катенин.
Повеќе од 300 различни видови на мутации денес се препознаваат како причина за семејна аденоматозна полипоза. Тие се претставени со мали бришења - 46%; мали инсерти - 10% и глупости мутации - 28%. Исто така, пријавени се и големи генски промени (13%), со неодамнешните податоци кои сугерираат дека тие можат да бидат одговорни за до 20% од случаите со ПАФ 1. .
Најчестата мутација, која се јавува кај приближно 10% од пациентите со PAF, е бришење во кодон 1309, а следната по фреквенција (што се јавува кај 5% од пациентите) е исто така бришење, но во кодон 1061. Повеќе од 60% од мутациите на АПЦ се наоѓаат во централниот регион наречен МЦР („регион на мутации на мутации“), лоциран помеѓу кодоните 1284 и 1580; овој регион е одговорен за деградацијата на β-катенинот.
Анализата на мутациите на APC генот покажува дека повеќето генетски аномалии доведуваат до синтеза на скратен или дисфункционален протеин. Губење на функцијата на АПЦ ја инхибира апоптозата и дозволува β-катенин да се акумулира интрацелуларно, што го стимулира растот на клетките со последователниот развој на аденоми.
Постојат корелации помеѓу одредени мутации и клинички манифестации на болеста, но сепак, корелацијата не е точна и може да се појават разлики.
Генетските абнормалности што ја предизвикуваат класичната форма на болеста се наоѓаат помеѓу егзон 5 и 5 ′ дел од егзон 15, додека оние поврзани со ослабената форма имаат тенденција да се собираат во екстремниот 5 ′ регион на генот и 3 ′ дел од егзон 15 (проксимална со кодон 1517 или дистално до 1900 година). Мутациите во регионот на кодон 1250 - 1464 се поврзани со тешка полипоза. Пациенти со мутации помеѓу кодоните 1445 - 1578 може да развијат тешки дезмоидни тумори 1; 2; 4 .
Различни мутации во генот АПЦ дефинираат широк спектар на синдроми познати како полипоза поврзана со АПЦ, кои вклучуваат:
4. FAP - ослабена форма (AFAP) 2 .
1. Во PAF - класична форма дијагнозата се утврдува на присуство на над 100 колоректални аденоматозни полипи или помалку од 100 аденоматозни полипи и роднина со PAF. Досега се опишани случаи во кои биле пронајдени неколку илјади полипи, но генерално просекот бил 500 за време на дијагнозата. Средната возраст за развој на полипи, клинички цревни манифестации и колоректален карцином се 16, 29 и, соодветно, 36 години 2. Вродена хипертрофија на епителот на ретиналниот пигмент е многу специфична за PAF; дискретни рамни пигментирани лезии се присутни во мрежницата, честопати билатерални, без клинички последици. Овие обично претходат на појавата на полипоза и корелираат со присуството на мутации помеѓу егзоните 9 и 15 од генот АПЦ 4. .
2. Гарднер синдром (СГ) е асоцијација на аденоматозна полипоза на дебелото црево со остеоми (лоцирани главно во черепот и мандибулата), стоматолошки абнормалности (недостаток на ерупција на заб, вродено отсуство на еден или повеќе заби, натброени заби, цисти и одонтоми) и тумори меки ткива (епидермоидни цисти, фиброиди, дезмоидни тумори). Овие бенигни екстраинтестинални тумори се јавуваат кај приближно 20% од поединците и семејствата со ПАФ.
3. Туркот синдром (СТ) е ретка комбинација на повеќецентрична колонозна аденоматозна полипоза и тумори на ЦНС (обично медулобластоми). Пациентите развиваат колоректален карцином кај млади возрасни лица, или како резултат на малигна трансформација на преканцерозни лезии или развој на ново во интеркалираниот недопрен епител.
4. AFAP е форма на болест која се карактеризира со присуство на мал број полипи, во просек 30, лоцирани во асцендентното црево. Просечната возраст на појава на полипи е 36 години, а кај колоректалниот карцином е 50-55 години (10-15 години подоцна од пациентите со класичен PAF, но порано од спорадичните форми на колоректален карцином). Галични полипи (со минимален малиген потенцијал), како и аденоматозни полипи на тенкото црево (со кумулативен ризик од малигнитет од 4-12%) често се поврзани 2 .
Дезмоидни тумори се јавуваат кај приближно 10% од пациентите со ПАФ, почести се кај жени и се предизвикани од операција или бременост. Овие се главната причина за морбидитет, како резултат на ефектот на компресија што го врши и на крвните садови и на различните абдоминални органи. Секое клиничко сомневање мора да се потврди со преглед на слики. Третманот на дезмоидни тумори треба да биде резултат на мултидисциплинарен тим кој вклучува хирурзи, онколози и гастроентеролози.
Други вон-цревни тумори се ретки и се претставени со аденокарцином на панкреасот (2%), карцином на тироидната жлезда (2%), аденокарцином на желудникот (0,5%) и хепатобластом кај деца под 5 години (1,6%).
Дијагнозата на PAF се заснова на клинички податоци и семејна историја, но мора да се потврди со генетско тестирање.
Пациентот може да биде целосно асимптоматски и затоа добивањето детална историја на семејни неоплазми е од суштинско значење за правилна дијагноза. Ректално крварење или абдоминални манифестации може да бидат, во зависност од стадиумот на болеста, знак на предупредување. Идентификувањето на екстраколоничните манифестации (дезмоидни тумори или остеоми на мандибулата) може да го натера лекарот да препорача сигмоидоскопија или колоноскопија, во зависност од возраста на пациентот или формата на сомнителното заболување.
За време на детството, само мали аденоми можат да се идентификуваат со ендоскопија, ограничена главно на ректосигмоидниот регион. Како што стареат пациентите, може да се најдат стотици колоректални или екстраколонични аденоми.
Дијагнозата на ослабената форма на PAF е многу посложена отколку во случајот на класичната форма, поради широката фенотипска варијација. Колоноскопија, наместо сигмоидоскопија, се препорачува за скрининг на лица со ризик од болест, бидејќи полипите имаат тенденција да се собираат во асцендентниот дебело црево. Дијагнозата на AFAP се заснова на комбинација на клинички манифестации и генетска анализа 1 .
Генетското тестирање се користи главно за проверка на асимптоматски лица со ризик од развој на ран PAF, но исто така и за потврдување на дијагнозата кај пациенти со нејасни клинички манифестации. Откако ќе се идентификува мутацијата, тестирањето може да се прошири и на роднините на пациентот.
Тестови за мутации во генот APC се достапни во нашата лабораторија за тестирање на асимптоматски возрасни лица изложени на ризик.
Не е идентификувана мутација кај приближно 25-30% од пациентите со очигледни клинички манифестации на PAF.
Бидејќи ПАФ е автосомно доминантно наследно заболување, секое дете на заболено лице има 50% ризик да ја наследи мутацијата на АПЦ. Кај повеќето луѓе со мутација на АПЦ што предиспонира PAF, таа е наследена од еден од родителите.
Ризикот од браќа и сестри на заболеното лице зависи од генетскиот статус на родителите. Ако родител е засегнат или има мутација на АПЦ, ризикот да се пренесе на децата е 50%.
Околу 20-30% од пациентите имаат de novo мутации.
Пренатална дијагноза кај ризични бремени жени е можна со анализа на ДНК извлечена од фетални клетки добиена со амниоцентеза, обично изведена на околу 15-18 недела од бременоста или биопсија на хорионски ресички на околу 10-12 недела од бременоста. Мутациите што предизвикуваат болест мора да се идентификуваат пред пренаталното тестирање кај заболен член на семејство.
Целта на генетската дијагностика кај асимптоматски лица е да се идентификуваат носителите и да се спречи предвремената смртност од рак или други компликации на PAF. Поединци со ПАФ имаат 100% ризик од развој на колоректален карцином, кој се намалува на скоро на нула кога пациентите се ставаат во соодветна програма за скрининг и третман 1; 3. Профилактички хируршки третман применет во многу центри е проктоколектомија со илео-анална анастомоза која овозможува одржување на ректалната функција 4 .
Примерок собрани - крвта ќе дојде 3 .
Контејнер за берба - вакутаин кој содржи ЕДТА како антикоагуланс 3 .
Количината собрана - 5 ml крв 3 .
Причини за одбивање да се обиде - употреба на хепарин како антикоагуланс; коагулирани или хемолизирани примероци 3 .
Стабилност на тестот - 7 дена на 2-8ºC 3 .
Метод - секвенционирање на сите егзони на APC генот + анализа на бришење/удвојување на MLPA 3 .
Известување и толкување на резултатите
Мутациите откриени во генот APC и соодветниот генотип 3 ќе бидат соопштени .
1. Елизабет Халф, Дани Берчович, Пол Розен. Фамилијарна аденоматозна полипоза. Во списанието „Орфанет“ за ретки болести, 4:22, 2009 г.
2. ЕС Боја, Р Мејди. Фамилијарна аденоматозна полипоза (FAP): Што мора да се знае и што треба да се стори - Извештај за случајот. Во urnурналул Педиатрулуи - XI: 43-44, 2008 година.
3. Лабораторија во Синево. Специфични препораки на употребената технологија за работа во 2010 година. Ref Type: Каталог.