Морфолошки промени во кардиомиоцитите, капиларите и инервацијата
Едиција наука VVB LAUFERSWEILER VERLAG VVB LAUFERSWEILER VERLAG STAUFENBERGRING 15 D-35396 ГИСЕН Тел: 0641-5599888 Факс: -5599890 [email protected] www.doktorverlag.de 9 ISB8: 9 9 9008-29 9: 9 9008: 9 89009: 89 9: 009 9: 89 9: 89 9: 9 7 5 CARINA GRUBER MORPH. ПРОМЕНИ ВО СРЦЕНАТА ХИПЕР- И АТРОФИЈА Морфолошки промени во кардиомиоцитите, капиларите и инервацијата во случај на нутриционистички хипер- и атрофија на срцето на глувчето CARINA GRUBER ИНВАГУРАЛНА ДИСЕРСТАЦИЈА за добивање на степен на д-р. медицински ветеринар на Одделот за ветеринарна медицина на Универзитетот Justастус Либиг, Гисен 9 5 9 0 0 2 издание научен VVB VVB LAUFERSWEILER VERLAG
Делото е заштитено со авторски права во сите негови делови. Секоја употреба не е дозволена без писмено одобрение од авторот или издавачот. Ова се однесува особено на репродукции, преводи, микрофилмирање и складирање и обработка од електронски системи. 1-то издание 2012 година Сите права се задржани. Ниту еден дел од оваа публикација не смее да се репродуцира, чува во систем за пребарување или да се пренесува, во каква било форма или на кој било начин, електронско, механичко, фотокопирање, снимање или на друг начин, без претходно писмено одобрение од авторот или издавачите. st 1 Edition 2012 2012 by VVB LAUFERSWEILER VERLAG, Giessen Печатено во Германија Едиција на науката VVB LAUFERSWEILER VERLAG STAUFENBERGRING 15, D-35396 GIESSEN Тел: 0641-5599888 Факс: 0641-5599890 е-пошта: Redaktion@dokver
Од Институтот за ветеринарна анатомија, хистологија и ембриологија на Универзитетот usастус Либиг, Гижен, супервизор: проф. Мартин Бергман и Институтот за анатомија и клеточна биологија на Универзитетот usастус Либиг, Гисен, анатомија 1, супервизор: ПД. Д-р Кристијан Михлфелд Морфолошки промени во кардиомиоцитите, капиларите и инервацијата во случај на хипер- и атрофија на срцето на глувчето поврзана со исхраната ИНВАГУРАЛНА ДИСЕРСТАЦИЈА за добивање на степен на д-р. медицински ветеринар на Одделот за ветеринарна медицина на Универзитетот Justастус Либиг во Гисен, поднесен од страна на ветеринар Карина Грубер од Хајлброн Гисен 2011 година
Со одобрение на Одделот за ветеринарна медицина на Универзитетот usастус Либиг, Гисен Декан, проф. Д-р Х. в Рецензент на М. Крамер проф. Д-р. М. Бергман Проф. Др. C. Mühlfeld Ден на дискусија 30 јануари 2012 година
Содржина Список на табели Список на слики I III 1. Вовед 1 1.1 Анатомија на срцето кај цицачи 1 1.1.1 Фино и ултраструктура на срцето 1 1.1.2 Фино и ултраструктура на нервниот систем на срцето 4 1.2. Преглед на литературата 8 1.2.1 Морфолошки промени во срцето со хипер- и атрофија 8 1.2.1.1 Миокарден состав и миоцити 8 1.2.1.2 Капилари 10 1.2.1.3 Инервација 11 1.2.2 Функционални нарушувања на срцето поради хипер- и атрофија 12 1.2.2.1 Срцева функција 12 1.2.2.2 Функција на автономниот нервен систем 13 1.3 Прашања и цели на работата 14 2. Материјал и методи 16 2.1 modelsивотински модели и предтретман на ткива 16 2.1.1 modelsивотински модели 16 2.1.2 Подготовка на срцата за вградување на ткивата и микроскопија 19 2.2 Вградување на ткивата 21 2.2.1 . Вградување на епон 21 2.2.2 Вградување на парафин 22 2.2.3 Вградување на замрзнување 24
2.3 Методи за проценка на индивидуалните параметри 24 2.3.1 Имунохистохемија 24 2.3.1.1 Имунопероксидаза метод 24 2.3.1.2 Имунофлуоресценција 26 2.3.2 Преглед на утврдени параметри 27 2.3.3 Пресметување на индивидуалните параметри 30 2.3.3.1 Димензии на телото и срцето 30 2.3.3.2 Состав на миокардот 30 2.3.3.3 Кардиомиоцити 33 2.3.3.4 Капилари 34 2.3.3.5 инервација 35 2.4 Статистика 42 3. Резултати 43 3.1 Квалитативна проценка 43 3.1.1. Светло микроскопско оценување 43 3.1.2 Електронска микроскопска проценка 43 3.2 Квантитативни резултати 48 3.2 .1 Дебелина на експериментална група кај животни 48 3.2.1.1 Димензии на тело и срце 48 3.2.1.2 Миокарден состав 48 3.2.1.3 Кардиомиоцити 49 3.2.1.4 Капилари 49 3.2.1.5 инервација 49 3.2.2 Неисхранетост на експериментална група на животни 54 3.2.2.1 Димензии на телото и срцето 54 3.2.2.2 Миокарден состав 54 3.2.2.3 Кардиомиоцити 54 3.2.2.4 Капилари 55 3.2.2.5 Инервација 55
4. Дискусија 59 4.1 Критика на методот 59 4.1.1. Експеримент врз животни 59 4.1.2 Земање примероци 61 4.1.3 Фиксација, вградување и обработка на примероците 62 4.1.4 стереолошки метод 68 4.1.4.1 Ориентација на ткиво 70 4.1.4.2 Тест системи 70 4.1.4.3 Големина на примерок 71 4.1. 4.4 Понатамошни стереолошки аспекти 71 4.2 Дискусија за резултатите во споредба со податоците од литературата 73 4.2.1 Дебелина 73 4.2.1.1 Развој на срцева хипертрофија 73 4.2.1.2 Однос на левата комора со телесната тежина 76 4.2.1.3 Миокард и кардиомиоцити 77 4.2.1.4 Капилари 82 4.2.1.5 Инервација 84 4.2.2 Неисхранетост 87 4.2.2.1 Развој на срцева атрофија 87 4.2.2.2 Однос на левата комора до телесната тежина 87 4.2.2.3 Миокард и кардиомиоцити 89 4.2.2.4 Капилари 92 4.2.2.5 Иннервација 93 4.3 Изгледи 94 5. Резиме 95 6. Библиографија 97
7. Преглед на материјалот 117 7.1 Користени супстанции 117 7.1.1 Хемикалии 117 7.1.2 Сера 118 7.1.3 Примарни антитела 119 7.1.4 Секундарни антитела 119 7.1.5 Други супстанции 119 7.2 Бафери и раствори 120 8. Додаток 123
Табела 3.4 Преглед на индивидуалните резултати на параметрите 52 во однос на капиларите на дебелите животни и придружните контролни животни Табела 3.5 Преглед на индивидуалните резултати на параметрите 52 во однос на инервацијата на дебелите животни и придружните контролни животни Табела 3.6 Преглед на индивидуалните резултати на параметрите во однос на 56 од Димензии на телото и срцето на неухранети животни и придружните контролни животни Табела 3.7 Преглед на индивидуалните резултати од параметрите кои се однесуваат на миокарден состав на неухранети животни и придружните контролни животни Табела 3.8 Преглед на индивидуалните резултати на параметрите во врска со 56 од кардиомиоцитите на неухранети животни и придружните животни Контролни животни Табела 3.9 Преглед на индивидуалните резултати од параметрите кои се однесуваат на 57 од капиларите на неухранети животни и придружните контролни животни Табела 3.10 Преглед на индивидуалните резултати на П параметри кои се однесуваат на инервација на неухранети животни и придружни контролни животни II
Промените во инервацијата поврзана со неа досега беа многу несоодветно проучени. Во веќе споменатата студија за стаорци со хипертрофична десна комора предизвикана од висок крвен притисок, морфолошка хиперинзервација на миоцитите со симпатички нервни влакна (Кимура и сор. 2006) и во морфолошки преглед на нервниот систем кај глувци со атрофично срце поради кахексија на тумор, скратување на вкупната должина срцеви нервни влакна (Mühlfeld et al. 2011). Целта на оваа студија беше структурно карактеризирање на различни оддели на левата комора во врска со хипер- и атрофија поврзана со исхраната. Инервацијата во врска со хипер- и атрофија на срцето поврзана со исхраната беше снимена квантитативно за прв пат и трите оддели кардиомиоцити, капилари и инервација беа исто така поврзани за прв пат. Податоците се собрани со светлосна и електронска микроскопија со употреба на стереологија. Детално се утврдени следниве параметри: - Волуменот на миоцитите и нивните органели - Вкупната должина на капиларите - Вкупната должина на аксоните 15
страдал од дијабетес мелитус. За оваа цел, на сите животни (вклучително и на контролните) им беше одземена храната шест часа, потоа беа измерени и по уште шест часа гладување се утврди нивото на гликоза во крвта со употреба на венска крв (Accu Check). Потоа, на животните им биле инјектирани интраперитонеално 10 μl/g телесна тежина од 10% раствор на гликоза и нивото на гликоза во крвта било забележано повторно по 30, 60 и 120 минути. Како што може да се види од табелата подолу, нема никакви разлики во споредба со контролната група и затоа може да се претпостави дека животните не страдале од дијабетес мелитус за време на жртвувањето (слика 2.1). Theивотните биле анестетирани со вдишување со изофлуран, а потоа биле жртвувани со кршење на вратот. Табела 2.1: Телесна тежина и тежина на левата комора на животните во групата на дебелина и придружна контролна група. Границата на значење за разликата помеѓу двете групи беше стр