Одделение за нутриционистичка физиологија - PDF бесплатно преземање
Стол за нутриционистичка физиологија Влијание на изофлавоноидите генистеин и даизеин врз протеомот на човечки ендотелијални клетки in vitro и мононуклеарни крвни клетки in vivo во контекст на нивната постулирана анти-атерогена активност Дагмар Фукс Комплетна копија од научниот центар Вајенстефан за исхрана, употреба на земјиште и минхен Добивање на степен на доктор на науки одобрена дисертација. Претседавач: Унив.-Проф. Д-р рер. нат Мајкл Шеман Испитувач на дисертацијата: 1. Унив.-Проф. Д-р рер. нат Ханелор Даниел 2-ри Унив.-Проф. Д-р рер. нат Eraералд Римбах, Кристијан-Албрехтс-Университит зу Кил Дисертацијата е доставена до Техничкиот универзитет во Минхен на 6 април 2006 година и прифатена од Вајенстефан научен центар за исхрана, употреба на земјиште и животна средина на 19 јуни 2006 година.
Содржина iii 10.6 Користени буквари. 142 10.7 Хемикалии и потрошен материјал. 143 10.8 Уреди. 146 10.9 Бафери и решенија. 147 10.10 Благодарници. 152 10.11 Биографија. 153
1 Вовед 5 Процес регулиран со оксистероли и цитокини решително ја одредува стабилноста на плаките (Лусис АЈ, 2000). Сл. 1.2 Шематски приказ на раните фази на атерогенезата. Ендотелијалниот слој е оштетен: ЛДЛ продира во интимата, каде што се менува оксидативно. Моноцитите влегуваат во wallидот на крвниот сад и апсорбираат оксидирани LDL честички, така што се формираат клетки од пена (Stipanuk MH, 2000). ММ-ЛДЛ, малку оксидиран ЛДЛ; вол-ldl, оксидиран LDL; М-ЦСФ, фактор стимулирачки за колонијата во макрофагите; MCP-1, моноцитен хемотактички протеин.
1 Вовед 7 Сл. 1.4 Метаболизам на хомоцистеин (модифициран од Биесалски Х.К. и Грим П., 2004) Генетска основа на хиперхомоцистаинемија Хиперхомоцистистенемија (HHcy), која е предизвикана од дефект на генетски ензим или како резултат на недоволно снабдување на еден или повеќе витамини вклучени во метаболизмот на хомоцистеин е важен независен фактор на ризик за атеросклероза (Кларк Р и сор., 1991; МекКали КС, 1996; Селхуб Ј, 1999; Уеланд ПМ и сор., 2000). HHcy може да се подели на три различни степени на сериозност. Блага форма, која влијае на 5-7% од населението, има плазма нивоа над 10 μmol/l на Hcy. Нивото на плазма кај пациенти со умерена HHcy е над 30 μmol/l и во тешка варијанта над 100 μmol/l (Brattstrom L & Wilcken DEL, 2000). Дури и со лесна HHcy, ризикот од развој на атеросклероза е зголемен (Лоренс де Конинг АБ и др., 2003), со тоа што врската со смртноста е највисока кај плазматските нивоа над 15 μmol/l (Nygard O et al., 1997). HHcy може да се должи на разни генетски дефекти кои влијаат на ензимите цистатионин-β-синтаза, метилен тетрахидрофолат редуктаза (MTHFR) и метионин синтаза (Medina MA & Amores-Sánchez MI, 2000). Релевантноста на овие дефекти на ензимите е објаснета во следните делови. Најчеста причина за тешка HHcy или хомоцистинурија е автосомно рецесивно, хомозиготно дефицирање на цистатионин-β-синтаза. Опишани се повеќе од 60 различни мутации на генот, со размена на
1 Вовед 13 Фосфоглицеридите се намалуваат. Хостеролските естри формирани од LCAT се таложат во внатрешноста на HDL. Холестеролот што потекнува од мембраните на екстрахепатичното ткиво, на тој начин може да се поврзе со површината на ХДЛ, што доведува до формирање на фракцијата ХДЛ 3. Катализираните реакции на LCAT и навлегувањето на супстанции (фосфолипиди, аполипопротеин Ц и Е), кои беа ослободени при распаѓање на VLDL, резултираат во HDL 2 и HDL 1, кои конечно се распаѓаат во црниот дроб (види слика 1.5) (Löffler G & Petrides PE, 2003). Сл. 1.5 Постпрандијален метаболизам на липидите. Метаболизмот на липидите после јадење е поделен на егзоген, ендоген и обратен трансфер на липиди. (CETP, протеин за трансфер на холестерол естер) (Детјен и сор., 2004).
1 Вовед 18 Агонисти BAX и BCL-X се засноваат на ослободување на про-апоптотски фактори, особено цитохром Ц, од митохондриите. Преку врзување со фактор-1 и каспаза-9 поврзани со апоптоза, цитохром Ц формира таканаречен апоптозом, кој ја активира каспаза-3 и со тоа ја поставува апоптозата во движење. Концентрацијата на анти-апоптотски членови на семејството Bcl-2, кои го инхибираат ослободувањето на цитохром Ц од митохондриите, се намалува со ox-ldl (Metzler B et al., 2000; Napoli C et al., 2000). Понатаму, ox-ldl ја зголемува експресијата на цитокини како што се IL-1, TNF и PDGF, кои за возврат го активираат SAPK/JNK (Мецлер Б и сор., 2000). Преку процес во кој се вклучени лизозомите и лизозомалните протеази, ox-ldl исто така може да предизвика апоптоза релативно независно од каспазите (Salvayre R et al. 2002).
4 Резултати 38 Сл. 4.2 Претставнички 2D СТРАНИЕ на протеини од HUVEC кои беа одгледувани со 5 µg/ml ox-ldl во отсуство и присуство на 2,5 μm или 25 μm генистеин. Броевите на места се идентични со оние во Табела 10.2. Истражувањата за влијанието на изофлавоноидната мешавина на генистеин и даизеин, како и екстрактот S40cl врз протеомот на HUVEC не може да се спроведат, бидејќи многу голема количина HUVEC мораше да се чува во култура за да се добие доволно количество протеин за анализа на протеомот, што од технички и финансиски причини не можеше да се реализира.