SERVALight EosUltra Western Blot Chemiluminescence HRP супстрат комплет - PDF бесплатно преземање

ПРИРАЧНИК ЗА УПОТРЕБИ СЕРВАЛИСТИК EosUltra Western Blot Chemiluminescence HRP супстрат комплет (без кат) SERVA Electrophoresis GmbH Carl-Benz-Str. Телефон 7 Д Хајделберг, Факс

servalight

2 Содржина 1. СЕРВЕЛСТВО ЕОСУЛТРА Општи информации Компоненти на комплетот Услови за складирање 2 2. ВРШЕЕ НА ДЕТЕКЦИЈА Важно на почетокот Неопходни, не испорачани материјали и решенија Шема на протоколот за откривање на размачкана гарнитура 5 3. РЕШЕНИЈА НА ПРОБЛЕМОТ 7 4. НАРАЧКА ИНФОРМАЦИИ 8 Ver 03/12 1

3 1. SERVALight EosUltra 1.1. Општи информации SERVALight EosUltra е високо чувствителен хемилуминисцентен супстрат за откривање на конјугати од рен пероксидаза (HRP), на пр. обележани антитела на имуноблоти. Интензитетот на сигналот на подлогата овозможува откривање на антиген во долниот опсег на фемтограм (10-15). Предности: Откривање на филмови или со системи за документација погодни за хемилуминисценција, на пр. ProXima C16Phi +, Isogen Многу кратко време на изложеност и/или поголеми разредувања на антитела поради оптимизирани, силно-интензивни сигнали SERVALight EosUltra не е погоден за употреба во дијагностика или други клинички апликации, туку само за истражување и развој. SERVALight е произведен од Cyanagen Srl. Cyanagen Srl е предмет на следните патенти на САД и ЕУ, САД, ЕП, САД, како и веќе поднесените и соодветно валидни патенти за други земји Компоненти на комплетот мачка. - бр. SERVALight EosUltra Luminol Solution SERVALight EosUltra Peroxide раствор ml 10 ml ml 50 ml ml 100 ml 1.3. Услови за чување Чувајте го комплетот на 2 8 C. Ако се чува на препорачаната температура, може да се користи барем додека: видете ја ознаката. 2

6 2.3. Шема на инкубација за блокирање на трансферот на гел за електрофореза за откривање на вестерн блот 1. Инкубација на антитела 2. Антитела SERVALight EosUltra откривање на инкубација 2.4. Протокол (1) Отстранете го размачкувачот од апаратот за размачкување и блокирајте го на собна температура (мин) или на 2-8 ° C преку ноќ. (2) Отстранете го блокирачкиот реагенс и додадете го првиот работен раствор на антитела во соодветно разредување. Инкубација 1 час на собна температура или преку ноќ на 2-8 C со тресење. (3) Последователно миење на мембраната со пуфер за перење (5 мин). Повторете го чекорот на миење 4-6 пати. Поголемите волуменски тампон или бројот на чекори за перење може да помогнат во намалувањето на позадината. (4) Додадете соодветно разредување на конјугатот HRP. 1 час инкубација на размачкување на собна температура со тресење. (5) Повторете го чекорот (3). (6) Пред откривањето, решенијата за откривање треба да бидат на собна температура. (7) Подгответе го работниот раствор на подлогата со мешање на еднакви пропорции на раствор на пероксид со раствор на луминол. Треба да се користи 0,1 ml работен раствор на cm 2 мембрана. 5

7 (8) Работниот раствор е стабилен 24 часа на собна температура. (9) 5 мин инкубација на размачканата мембрана со работен раствор на подлогата. (10) Трансфер на заштитениот фрагмент (на пример, завиткајте го во фолија без воздушни меури) во филмската касета со протеинската страна нагоре и вметнете го филмот. Тука треба да работите во соодветна темна соба. Филмот треба да остане сув за време на изложеноста. ВАORTНО: Вишокот на подлогата треба да се отстрани од формулата. Филмот треба да се стави внимателно, бидејќи поради интензитетот на сигналот, дури и мало лизгање на филмот/размавта може да доведе до заматени или неточни сигнали. (11) Пред сè, се препорачува време на изложеност од 60 секунди. Во зависност од јачината на сигналот, соодветното време на изложеност за оптимален интензитет на сигналот може да се избере. (12) Потоа се развива изложениот филм. (13) Како алтернатива на развојот на филмот, откривањето може да се изврши и со употреба на соодветни системи за документација, на пр. ProXima C16 Phi +, Изоген. (14) Доколку е потребно, дамката може да се отстрани по откривањето и повторно да се наполни со антитела. 6-ти

9 4. Информации за нарачка на мембраните Cat.- Не. Имобилон (PVDF), 26,5 см x 3,75 м, големина на пора: 0,2 μm (1 ролна) Флуоробинд (PVDF), 10 x 10 см, големина на пора: 0,2 μm (20 листови) Флуоробинд (PVDF), 25 см х 3 м, големина на пора: 0,2 μm (1 ролна) Протеински стандард SERVA Western Blot протеински стандардни реагенси меѓу реагенси за откривање/комплети хемилуминисценција реагенс за рен пероксидаза SERVALight Поларис CL HRP WB подлога комплет SERVALight Eos CL HRP WB Подлога за комплетно средство Комплет за подлоги CL HRP СБ