Авторадиографија - биологија

Колку е топло премногу топло за живот длабоко под дното на океанот?

Антибиотици од бактерии

Миграција на клетки: новооткриена функција на познат протеин

Молекуларен компас за порамнување на клетките

Она што ги прави лисјата стареат наесен

Демократијата на птиците за мршојадец

Околина на Екембо: Луѓето исто така живееле во отворени пејзажи

| Генетика | Земјоделство, шумарство и сточарство

Разновидноста на пченицата е создадена со вкрстување на диви треви

Колку е топло премногу топло за живот длабоко под дното на океанот?

Авторадиографија

Овој напис или следниот дел не се соодветно обезбедени со придружни документи (на пример, индивидуални докази). Според тоа, податоците за кои станува збор се евентуално наскоро отстранети. Помогнете ни на Википедија со истражување на информациите и додавање на добри докази. Повеќе детали може да бидат дадени на страницата за разговор или во историјата на верзиите. Конечно, ве молиме отстранете ја оваа знак за предупредување.

биологија

Авторадиографија или Радиографија (честа кратенка AURA) ја опишува визуелизацијата на хемиската компонента преку радиоактивни изотопи, првично со оцрнување на фотографски филм, сега сè повеќе со помош на детектор за зрачење. Снимката добиена е Авторадиограм наречен.

Апликации

За три децении, авторадиографијата беше составен дел од анализата на ДНК секвенцата на Сангер. Сепак, од последните години на 20 век, флуоресцентни наместо радиоактивно обележани ДНК нуклеотиди се повеќе се користат за анализа на секвенци.

Авторадиографијата се користи и во производството на рекомбинантни протеини, анализа на ензимски реакции или идентификување на ензимски подлоги.

Исто така се користи во фармакокинетиката за спроведување на студии за екскреција на метаболизам на дистрибуција на апсорпција на ослободување (LADME).

извршување

Заедничко за сите апликации на авторадиографија е потребата од шверц на радиоактивни изотопи во молекулите што треба да се анализираат. Поради честата појава на соодветните стабилни изотопи во биомолекулите и нивното релативно ниско ниво на опасност, често се користат радиоизотопите 14 C (јаглерод), 35 S (сулфур), 32 P (фосфор) и 3 H (тритиум).

Бактериски вид трансформиран со експресивен плазмид се третира со хранлив медиум кој содржи радиоактивно обележана аминокиселина 35 S-метионин. 35 S-метионин е инкорпориран во рекомбинантен протеин кој е кодиран на плазмидот. Екстракт од бактерии се одделува со SDS-PAGE, гелот се суши и се нанесува филм. Откако филмот е „изложен“ на бета зраците емитирани од изотопите, позицијата на рекомбинантен протеин е видлива на развиениот филм.

2-ри пример - анализа на активноста на ензимите

АТПаза, ензим кој го раздвојува нуклеотидот АТП, е инкубиран со радиоактивно обележан 32 П-АТП. Смесата се одделува по различно време со тенок слој хроматографија, плочата за хроматографија се суши и се става на филм. Оцрнувањето на филмот од 32 П-фосфат ја одразува активноста на ензимот.