Создавање на абдоминални адхезии кај протоколот за глувци (во превод на германски)
Вовед
Абдоминалните адхезии се форма на ткиво со лузни кои се формираат во стомакот како одговор на воспаление, обично по операција или интраабдоминална инфекција. Адхезиите се главна причина за хронична болка во стомакот и неплодност и се водечка причина за опструкција на тенкото црево 1. Присуството на адхезии ја отежнува извршувањето на втората абдоминална операција и ја зголемува веројатноста за компликации 2.
И покрај долгогодишното истражување, механизмите што се основа на формирањето на адхезии остануваат слабо разбрани. Познато е дека првичното оштетување на перитонеалната површина предизвикува излачување на течност богата со фибрин, која потоа формира тромб што ги врзува површините на цревата и абдоминалниот wallид 3 заедно. Подоцна, фибробластите и другите клетки мигрираат во леплива површина и лачат сврзно ткиво 4. Со месеци до години се развива адхезија на крвните садови и нервите 5.
Постојат неколку комерцијални производи кои се дизајнирани да го намалат формирањето на адхезии по абдоминална операција (на пр. Сефрафилм). Сите овие производи дејствуваат како механички бариери и го запираат формирањето на адхезија спречувајќи физички контакт помеѓу цревните јамки и абдоминалниот wallид 6,7. И покрај доказите од контролирана студија дека бариерата со хируршка адхезија го намалува формирањето на адхезии 8, анегдотално многу хирурзи се разочарани од ефикасноста на механичките производи за бариери.
Во моментов нема анти-адхезивни терапии базирани на лекови, што го одразува фактот дека точните процеси вклучени во формирањето на адхезија се слабо разбрани. Да се развие терапија специјално насочена кон клеточни или молекуларни агенси вклучени во формирањето на адхезии, ќе бара подобро разбирање на настаните што се вклучени во формирањето на адхезија. Неколку групи идентификуваа молекуларни механизми кои можат да бидат важни за формирање на адхезии 9-11. Modelsивотинските модели обезбедуваат одлична средина за формирање на адхезии за проучување. Многу студии се објавени на неколку животни, особено стаорци и глувци 6,12-14, опишувајќи го хируршкото создавање одговорност. Поради нашето искуство со фиброза кај глувци и широката достапност на трансгени глувци и антитела базирани на глувци со студијата, го избравме глувчето како наш модел за проучување на адхезиите. Тука известуваме за технологијата што ја развивме за репродуктивно и сигурно создавање на адхезии во глувчето.
Потребна е претплата. Ве молиме, препорачајте JoАВО на вашиот библиотекар.
Протокол
Следниот протокол е одобрен од Комитетот за грижа и употреба на животни на универзитетот Стенфорд (IACUC) и ги исполнува сите институционални етички упатства во врска со употребата на лабораториски животни.
1. Создавање на адхезии
Потребна е претплата. Ве молиме, препорачајте JoАВО на вашиот библиотекар.
Резултати од репрезентацијата
До седум дена по операцијата, цекумот и евентуално асцендентното дебело црево, црниот дроб и јамките на тенкото црево треба да се прилепат на десниот абдоминален wallид. (Слика 8) Отсечените ткива можат да бидат вградени и исечени и даваат одлични хистолошки делови. (11, 12)
Ако постапката е направена правилно, 100% од глувците треба да имаат значителни адхезии за седум дена. Смртноста треба да биде помала од 5%.
1 ">
трион> Слика 9: Исекување на ткиво од адхезија. (а) и (б) „Островот“ на кожата и абдоминалниот wallид споен со основното црево се ослободува со сечење во полн круг околу лепената област. Кликнете тука за да видите поголема верзија на оваа бројка.
jove_content "fo: keep-together.within-page =" 1 ">
Потребна е претплата. Ве молиме, препорачајте JoАВО на вашиот библиотекар.
Дискусија
Критичните чекори во оваа постапка се: темелно брусење на слепото црево без да се предизвика перфорација, ставање конци во абдоминалниот wallид и примена на точна количина на јачина. Нанесете шкурка само на цекумот или на мал специфичен дел од цревата. Распространетата употреба на смара хартија на големи количини на тенкото црево има тенденција да предизвика значителен илеус. Бидете внимателни да го изшкуркате додатокот со доволно сила за да ја направите површината груба, но не толку многу што wallидот да пукне. Да се најде таа рамнотежа може да потрае. Внимателно сфатете го цревото и избегнувајте остри или забни форцепси за да манипулирате со цревата. Лесно е случајно да предизвикате крварење со фаќање на мезентериумот на тенкото црево со форцепс или премногу силно влечење на цревата.
Ако се појави прекин во wallидот на додатокот, постапката треба да се запре и животното да се изврши во еутаназија. Според наше искуство, солзата на цекалот резултира со смрт на животно по неколку дена, дури и ако солзата е санирана добро. Покрај тоа, прекин на wallидот на слепото црево ќе предизвика истурена столица, што ќе влијае на воспалителниот одговор на непредвидливи начини.
Хемостазата мора да биде завршена на крајот од постапката. Некои крвни садови повторно ќе се отворат и ќе започнат откако крварењето ќе престане да се покажува. Кога се двоумите, ставете абсорбирачка монофиламентна фигура од осум фигура конци околу точката на крварење. Овој тип на конец е поповолен од свила или плетена абсорбирачка конци, бидејќи може да се извлече со минимален отпор, иако ткаенината. Откривме, сепак, дека свилата или плетенката што може да се апсорбира е најефикасна за предизвикување на адхезии во абдоминалниот страничен wallид, отколку монофиламентот помалку воспалителен.
Нанесувањето на скроб на крајот од постапката ќе помогне да се зголеми формирањето на адхезии, но откривме дека прекумерната количина на скроб ќе предизвика воспалителен одговор што предизвикува смрт. Скробот треба малку да се попрска. Не треба да биде толку многу што да формира цврст слој.
Како прва постапка што треба да се научи, вообичаено е да се изгубат повеќе глувци. Според наше искуство, најчестите причини за смрт се дехидрираност поради илеус предизвикана од прекумерна абразија на цревата и сепса како резултат на интестинална перфорација. Смртта предизвикана од крварење може да се случи доколку на крајот од операцијата не се постигне целосна хемостаза.
Ако формирањето на адхезии е недоволно, размислете за агресивна абразија на додатокот и на sideидот на десната страна, што ќе остави поголема цврстина или поставете повеќе конци на абдоминалниот страничен wallид. Според наше искуство, да се чека помалку од една недела пред абдоменот да резултира со помалку од соодветно формирање на адхезија, повторно да се отвори. Од друга страна, ако стапката на смртност кај глувците е голема по операцијата, размислете да користите помалку агресивна абразија на слепото црево, поточно за инспекција на хемостаза и да ставите помалку скроб од друга страна. Исто така, важно е внимателно да се следи стапката на дишење на глувчето за време на операцијата. Доколку хирургот стекне искуство со оваа постапка, смртноста треба да биде помала од 10%.
Оваа техника е развиена за да се формираат примарно адхезии помеѓу додатокот и десниот абдоминален wallид. Адхезии, исто така, често ќе се формираат помеѓу тенкото црево, црниот дроб и засекот на средната линија. Користењето на оваа техника обично нема да предизвика адхезии на левата страна на стомакот. Ограничување на оваа техника е дека поверојатно се формираат адхезии помеѓу цревата и абдоминалниот wallид отколку адхезии помеѓу јамките на цревата. Покрај тоа, веројатно нема да резултира со ткиво полно со лепак во целосно замрзнат стомак, што често се забележува кај луѓе кои имале повеќе операции.
Содржина "> Бидејќи оваа техника постојано предизвикува формирање на лепливо ткиво помеѓу додатокот и страничниот allид, веруваме дека е идеално дизајнирано во тест интервенции за да се намали формирањето на адхезија. Оваа техника може да се користи и за истражување на молекуларните патеки и типовите клетки се вклучени во формирање на адхезија. Адхезивното ткиво лесно се сече и е подготвено за хистологија, обезбедувајќи одлични хистолошки слики (Слики 11, 12) може да биде.
Некои истражувачи можеби сакаат модел во кој адхезиите се формираат помалку од 100% од времето. Испуштањето на примената на скроб ќе ја намали стапката на адхезија на околу 80%. Намалувањето на бројот на свилени нишки поставени во десниот абдоминален wallид дополнително ќе ја намали стапката на адхезија.
Според наше искуство, седмиот ден по операцијата е првиот момент кога цревата е постојано прицврстена на абдоминалниот wallид. Сепак, и други времиња може да бидат порелевантни, во зависност од фокусот на проектот. На пример, истражувачите заинтересирани за миграција на неутрофили и макрофаги во просторијата за задржување можеби ќе сакаат да можат да собираат ткиво во првите пет дена по операцијата. Од друга страна, таложењето на колаген од фибробластите се одвива со недели по првичната повреда и за ова има смисла да се испита ткивото на моменти распространето за неколку недели по операцијата.
Хируршките лупи се многу корисни за зголемување на хируршкото поле при вршење на оваа постапка. Може да се користи и хируршки микроскоп, но можноста на хирургот да го прегледа хируршкото поле од различни агли е ограничена. Постапката исто така може да се спроведе без воопшто зголемување.
Потребна е претплата. Ве молиме, препорачајте JoАВО на вашиот библиотекар.
Откривање
Авторите наведуваат дека немаат финансиски интереси.
Признанија
ЦДМ беше поддржана од постојан истражувачки стипендија на Американскиот колеџ за хирурзи (АЦС). MSH беше поддржан од грант за клинички соработници за образование на Калифорнија, Институт за регенеративна медицина (CIRM) TG2-01159. MSH, HPL и MTL беа поддржани од Наградата за грант за истражување на Американското здружение на максилофацијални хирурзи (ASMS)/Фондација максилофацијални хирурзи (MSF). HPL беше поддржан од грантот на NIH R01 GM087609 и подарок од Ингрид Лаи и Бил Шу во чест на Ентони Шу. HPL и MTL беа поддржани од лабораторијата Хејги за детска регенеративна медицина и фондацијата Даб. МТЛ беше поддржана од фондот Ган/Оливие.