Идентификација на дерматофити - масена спектрометрија (систем MALDI-TOF) Биоклиника

Преглед

Дерматофитите или дерматофитните габи се филаментозни кератофилни микромицети, таксономски класифицирани по редоследот Onygenales, семејство Arthrodermataceae и се потенцијални патогени на човекот и животните. Од морфолошка гледна точка, карактеристично е присуството на два вида конидии: микроконидија (со една клетка) и макроконидија (со повеќе клетки, исто така наречени ложи).

Нивните несовршени (асексуални) фази, исто така наречени анаморфни форми, се групирани во три рода - Епидермофитон, Микроспорум и Трихофитон, додека совршените (сексуални) фази познати како телеоморфни форми се вклучени во родот Артродермија.

Екологија

Под природни услови, дерматофитите имаат способност да го распаѓаат кератинот. Оваа метаболичка способност им овозможува да преживеат во животната средина, а понекогаш и да создаваат површни болести со локација на кожата, косата или ноктите - кај луѓето и животните.

Во зависност од видот на користениот кератин, преференцијално, дерматофитните видови спаѓаат во три категории:

Геофилите користат девитализиран кератин, од лушпести клетки, влакна и други фрагменти од мелем присутни во околината, особено во почвата. Болести ретко може да се појават кај луѓе и животни; преносот помеѓу поединците е скоро нула.
Зоофилите имаат тропизам кон кератинот во кожата и косата на животинскиот слој. Главно влијае на животните, иако некои може да се пренесат исклучително лесно на луѓето. Интерперсоналниот пренос, иако е можен, е исклучително мал.
Антропофилите, главно, паразитираат кај човечкиот кератин. Тие предизвикуваат болести кај луѓето, понекогаш се карактеризираат со висок степен на зараза.

Геофилни видови Зоофилни видови Антропофилни видови

M. cookei	M. canis	E. floccosum
M. гипс	M. gallinae	M. audouinii
M. praecox	M. nanum	M. ferrugineum
T. ajelloi	M. persicolor	T. концентрикум
T. terrestre	T. erinacei	T. menthagrophytes var. интердигитален
Ванбурсегеми	T. menthagrophytes var. менатгрофити	T. rubrum
T. simii	T. schoenleinii
T. tonsurans
T. violaceum
T. soudanense

Епидемиолошки карактеристики

Изворите на контаминација и начинот на пренесување се особено важни епидемиолошки карактеристики во процесот на идентификување на вклучените видови; на пример, контактот со мали диви цицачи или домашни миленици може да биде причина за заразување на дерматофити произведени од носители на зоофилни видови. Од друга страна, меѓучовечкиот контакт или извршувањето на одредени спортски активности може да предиспонираат за појава на инфекции со претежно антропофилни дерматофитни видови.

Преваленцата на дерматофитска инфекција кај општата популација е 10-20%.

Спецификацијата на клиничарот во препораките наменети за лабораторискиот лекар за некои анамнетски податоци со епидемиолошки карактер, не е само препорачана, туку и задолжителна, обезбедувајќи висок степен на точност на идентификацијата на предметните видови дерматофити.

Клинички аспекти

Дерматофитите лесно ги напаѓаат епидермисот и панерата - кератинизирани анатомски структури
Локалната воспалителна реакција е со различен степен на интензитет, во зависност од вклучениот дерматофит и имунолошкиот статус на заразениот домаќин.
По исклучок, оштетувањето на ткивото може да премине во подлабоки структури; е случај на дерматофитна болест (болест Хадида-Шузобое) и мицетоми предизвикани од некои дерматофити.

Класификација на клинички аспекти - површни дерматофити

Епидермофиши

Кружен епидермис (циркулира „херпес“), најчеста форма на тинеа корпорис
Ингвинално интертриго (tinea cruris)
Intertrigo interdigito-plantar (најчеста манифестација на tinea pedis)
Плантарни лезии на хиперкератоза („изглед на мокасин“)
фоликулитис
Токелау (вгнездена тинеа)
Други епидемофити (комбинации на еритема-везикули-ерозивни-кора)

Пиломикоза

Тинеа капитис (микроспорични и трихофитни заболувања на смолкнување, керион, фавус)
Тинеа на лицето (сикоза)

Онихомикоза (tinea unguium)

Дистална субунгвална онихомикоза
Проксимална субунгвална онихомикоза
Површна леукемија
Тотална ониходистрофија

Мицеланеа

Дерматофитно заболување

Дерматофитски мицетом

РАБОТИ

лабораторискиот лекар мора да биде информиран за голем број важни аспекти, особено корисни за дијагноза: видот на лезијата, професијата на пациентот (доколку постои сомневање за каква било поврзаност со болеста), сите миленици со кои стапил во контакт, патувања на пациентот во странство, влез во контакт со луѓе од ендемски области за одредени дерматофити, чести базени, спортски сали, фитнес клубови или салони за убавина во периодот што претходи на појавата на лезии.
по можност, примероците се земаат пред администрација на антифунгални агенси (во случај на локални препарати, се препорачува интервал од најмалку 5-7 дена од последната администрација)
претходна деконтаминација на областа за берба не се препорачува, бидејќи може да се влијае на одржливоста на габичните елементи и добивањето на негативни култури.

влакната се собираат со пар пинцети, по можност под УВ-светло, во темна просторија. Се испраќа во лабораторија во стерилен сад. Максимално време на мирување: 72 часа на собна температура.
Фрагментите на ноктите се собираат од спојот на здравото ткиво со погоденото, со стружење со стерилна кирета или со сечење со ножици. Се испраќа во лабораторија во стерилен сад. Максимално време на мирување: 72 часа на собна температура.
скалите на кожата се собираат со стружење на активната област на лезијата (обично периферна) со стерилна кирета или со притискање и повторливо бришење со стерилен брис претходно навлажнет со стерилен солен раствор. Земање примероци со брис се препорачува во случај на обрежани лезии на дерматофити и вклучува непосредно сеење на примерокот на изолациони медиуми.
влажните лезии се земаат со стерилни брисеви кои се испраќаат во лабораторијата во транспортен медиум.

ВНИМАВАЕ! Дерматофитите се уништуваат ако се чуваат на 4-6 ° C.

Директен микроскопски преглед

Тоа е задолжително, дозволува брза потврда на сомневање за дерматофитска инфекција и информации на клиничарот, долго пред позитивната култура.

Култура

Изолацијата на патогени габи е фаворизирана со сеидбата на примероците земени на цврсти медиуми кои содржат циклохексимид, супстанца способна делумно или тотално да го попречи развојот на загадувачки габи. Изолацијата во лабораториски услови на габи од патолошки примероци, без оглед на нивната природа, е неоспорна потреба за разбирање на инфективниот процес и за започнување на антифунгална терапија.

Идентификација на дерматофитни габи со масена спектрометрија

Класичните методи за идентификација на дерматофитните габи се засноваат на набvationудување на макроскопски карактери (пигментација, режим на раст, текстура на колонии), употреба на селективни медиуми за култура и микроскопско испитување на макро/микроконидија. Овие методи се крајно макотрпни.

Системот MALDI-TOF, користејќи масена спектрометрија, во моментов е одлична алтернатива на конвенционалните методи за идентификација.

Интерпретација на резултатите

Позитивен резултат на природен микроскопски преглед

Присуството на елементи кои сугерираат на габична инфекција е доволно за да се започне со третманот, но не гарантира добивање на позитивни култури.

Негативен резултат на микроскопија, позитивен во културата

Укажува на мала количина на дерматофитни габи во примерокот, собрани во близина на погодената област. Индициран е антифунгален третман.

Негативна култура, позитивен резултат во директна микроскопија

Може да се должи на жетва во центарот на лезијата, каде што дерматофитите веќе не се одржливи и може да биде последица на претходниот третман против габи. 33% од примероците на ноктите даваат лажни негативни култури.

Значење на изолирање на габите од примероците

Во повеќето случаи, изолацијата на дерматофитните габи има клинички импликации. Сапрофитски габи (Scopulariopsis brevicaulis, Fusarium sp.) Се јавуваат секундарно по дерматофитска инфекција или траума.

За фрагменти од ноктите, препорачуваме повторна берба доколку е изолирана во културата на Fusarium sp., Aspergillus или Acremonium sp.