Методи за споредување на хранливите материи во пчеларниот леб направени од африканизирани и европски медоносни пчели и
Апстракт
Вовед
Исхраната игра основна улога во здравјето и виталноста на пчелните колонии и нивното воспоставување како популации. Хранливите материи од храната обезбедуваат енергија и биохемиските компоненти неопходни за одгледување на потомство, терморегулација, храна и одговор на имунитетот. За пчелните колонии, хранливите материи потребни од населението во колонијата за да растат и да го одржуваат своето здравје доаѓаат од нектар и полен. Нектарот обезбедува јаглехидрати, а поленот ги обезбедува преостанатите диететски побарувања, како што се протеини, липиди, витамини и минерали.
Подвидовите на пчели се разликуваат во нутриционистички засновани параметри на ниво на колонија, како што се долговечноста на работникот, одгледувањето на потомство и механизмите на социјален имунитет 2-6. Овие разлики можат да бидат поврзани со тоа како храната, особено поленот, се обработува од колонијата и се вари од страна на поединци. Поленот е во саќе клетки и се чува хемиски променет со микробиолошка ферментација на млечна киселина 07/10. Ферментираниот полен се нарекува пчелен леб. Може да има генотипски разлики помеѓу подвидовите во нивната способност да се здобијат со хранливи материи од поленот што го собираат и складираат и тоа може да влијае на растот и преживувањето на колонијата. Генотипските ефекти врз преработката на храна и стекнувањето на хранливи материи се документирани во други организми што предизвикува некои луѓе да добиваат повеќе хранливи материи и калории од другите додека ја консумираат истата храна 11-14.
Протокол
1. Добивање на пчелин леб AHB и EHB колонии
2. Хранење пчели во кафези
- Ставете рамковно запечатено работно дете од колониите АХБ и ЕХБ во посебни кафези со потекло од просторија за животна средина поставена од 32 до 34 ° C и 40% релативна влажност .
- Кога работниците ќе се појават и ќе бидат стари приближно 24 часа, подигнете 12 кафези за биоеза на плексиглас (димензии = 11,5 х 7,5 х 16,5 см 3) и додадете или 100 новосоздадени ЕМС или 100 новосоздадени работнички пчели АХБ секој кафез. Ставете дел од чешел со познат број или клетки EBB или ABB (24-30 клетки на кафез) во секој кафез за да ги создадете следниве комбинации на третман: AHB хранат ABB, EHB хранат ABB, AHB хранат EBB и EHB хранат EBB . (4 третмани; 6 кафези на третман; вкупно 24 кафези).
- Формулиран во ампули со вода и 50% мед и раствор на вода до волуменот на секој кафез. Наполнете ги шишенцата со мед и вода дневно за 11-дневниот период на студирање.
3. Земање примероци од пчели и пчелин леб и проценка на потрошувачката
- Пример за нови 10 пред да ги ставите во кафезите од работниците на ЕХБ и АХБ. Погледнете ги овие како пчели на ден 0 и тие служат како основа за концентрација на протеини во хемолимфа.
- Отстранете 10 пчели од секој кафез откако ќе се храните со EBB или ABB 4, 7 и 11 дена.
- Ставете ги живите пчели во индивидуални цевки со микроцентрифуга и ставете пакувања мраз. Изберете под-примерок од четири пчели за анализа на концентрација на протеини во хемолимфа.
- Откако ќе земете примероци од пчели на Ден-11, пресметајте го бројот на саќе клетки кои сè уште содржат пчеларник. Ова е релативна мерка за потрошувачката на пчеларниот леб.
- Преостанатата пчеларница од ќелиите во секој кафез и чувајте ја во одделни микроцентрифужни цевки од кафез. Примероците од месни житни култури чувајте ги на -80 ° C додека не се анализира концентрацијата на протеини растворливи во pH и содржината на аминокиселини.
4. Проценка на pH на поленот и пчелниот леб
- Земете шест случајни 0,3 g примероци од поленот што се хранат со пчелите во EFA и растворете го во 300 μl дестилирана вода. Измерете ја pH вредноста со водоотпорно копје со двојно вкрстено pH со точност од 0,01.
- Земете 0,3 g примерок од пчелен леб што остана во секој кафез по 11-дневниот период на хранење. Растворете го јабниот леб во 300 μl дестилирана вода и измерете ја pH вредноста како што е опишано во поленот (4.1).
Резултати од репрезентацијата
Пчеларниците се чуваа на -80 ° C помалку од еден месец пред да се анализираат за концентрација на pH и протеини и околу 4 месеци пред анализа на аминокиселини. Пчеларниците се разликуваа од поленот во рН и концентрацијата на протеини (Илустрација 1). PH вредноста на пчеларниот зеленчук беше пониска од концентрацијата на полен во протеините. И ЕМС и АХБ користат повеќе АББ отколку ЕББ (Слика 2).
Нивоа на растворливи протеини во хемолимфот на AHB беа значително повисоки од EHB, без оглед на видот на пчеларството што го консумираше (Слика 3). Овие разлики во нивото на протеини во хемолимфа се случија иако EHB и AHB конзумираа слични количини од секој вид пчеларница. Возраста на пчелите во времето на земање мостри значително влијае на концентрацијата на растворливи протеини во хемолимфата. Во споредба со ден 7 или 11, нема диференцирани концентрации на протеини биле значително помали кај пчелите ден 4.
_content "> Од 10-те аминокиселини кои се неопходни за пчелите, сите освен хистидин биле откриени во полен. Во повеќето случаи, концентрациите на аминокиселини измерени во пчеларник биле поголеми отколку во поленот (Слика 4). На пример, концентрациите на леуцин и треонин биле околу 60% повисоки кога се споредуваат со јубилеј со полен, а концентрациите на валин се околу 25% повисоки. Нивото на аланин, аспартинска киселина, глутамин и метионин беше исто така повисоко отколку во поленот. Концентрациите на аминокиселини не се разликуваат значително помеѓу АББ и ЕББ, со исклучок на фенилаланин и цистеин. Нивоата на фенилаланин беа околу двапати повисоки во споредба со АББ или ЕББ или поленот. Концентрациите на цистеин се пониски во EBB во споредба со ABB или поленот. Триптофан беше единствената аминокиселина која се наоѓа во поголеми концентрации во поленот отколку во EBB или ABB. Концентрациите на пролин во поленот и АББ беа повисоки отколку во ЕББ.
Дискусија
Користејќи го методот опишан погоре, откривме дека фирмата за пчеларник AHB се троши во поголеми количини и од AHB и од EHB. Иако ЕХБ и АХБ конзумирале слични количини на секој вид пчелен леб, АХБ имала повисоки титри на протеини од хемолимфа. Наодите засновани врз наши методи беа слични на претходните извештаи каде нивоата на протеини во хемолимфа беа повисоки во AHB отколку во EHB иако и двајцата беа хранети со иста диета 26. Со мерење на потрошувачката на EBB и ABB, кои се консумираат со различна стапка и во EHB и AHB, беше утврдено дека концентрациите на протеини во хемолимфа во секој подвид не се зголемуваат со зголемување на внесувањето храна. Се чини дека има плато за концентрација на протеини во хемолимфа кај возрасна пчела медицинска сестра и дека поставената точка за платото е поголема во AHB од EHB.
Постојат неколку важни барања за колониите за производство на месни леб за да се оптимизира стапката на складирање на полен. Прво, колониите мора да се врамуваат со отворено потомство. Без да се хранат отворено потомство, работниците нема да соберат многу полен. Второ, колонијата мора да биде без матици, така што нема да се произведува дополнително потомство. Одгледувањето на потомство бара големи количини на полен и се чува само вишок полен. Во малите колонии основани во ЕФА, би имало малку полен на располагање како пчеларник ако се прошират областите за размножување, па колониите мора да бидат без шепотеви за да можат да се чуваат. Конечно, за да се направи пчеларник, поленот мора да биде коркуларен товар собран и складиран во клетките на саќе. Кога поленот ќе се собере во стапици за полен, треба да се премачка во ситен прав пред да им биде достапен на пчелите за да можат да го соберат како брановидни оптоварувања.
Методите што се користат за мерење на потрошувачката на пчеларници произведоа квалитативни отколку апсолутни проценки. Единствената потрошувачка што била преброена е кога ќелиите биле целосно испразнети од кошници од пчели. Попрецизна проценка на вкупната потрошувачка на леб од кошници може да се добие со отстранување на лебот од пчели од ќелиите и правење пита што може да се мери пред и по периодот на студијата. Сепак, сакавме да ја задржиме кошницата во клетките за да можат пчелите да се фокусираат на неа додека го хранат во колонија и можеби ќе продолжат да ја обработуваат за време на периодот на студирање. Разликата во тежината на деловите на чешел пред и по студијата не се користи како проценка на потрошувачката, бидејќи тежината се зголемува затоа што пчелите го ставаат разредениот мед што им се храни во некои клетки.
Работниците исто така можеле да додадат и дел од разредениот мед во пчеларниот саќе. Од овие причини, клетките што содржат приближно еднакви количини на пчеларници се изброени пред и по периодот на хранење и произведоа квалитативно мерење. Како и да е, постоеше неверојатна разлика помеѓу двата вида пчеларник во бројот на празни ќелии АББ во споредба со ЕББ пребројани по 11 дена.
Методите користени за мерење на концентрацијата на протеини беа слични на оние претходно опишани за да се утврдат ефектите на диеталниот протеин врз африканизираните и европските пчели 26 Како продолжение на постапката, бевме во можност да процениме растворлив протеин во полен и пчеларник. Овие методи дадоа слични резултати со претходните извештаи 7,10,27. Нашите резултати обезбедуваат дополнителни докази дека AHBs асимилираат протеини во исхраната поефикасно од EHB и дека ова може да биде клучен фактор во еколошката доминација на AHB во повеќето региони каде што се имигрирани и воспоставени 30-32.